基于电喷雾技术的高通量筛选微生物菌株的方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物工程技术，公开了一种基于电喷雾技术的高通量筛选微生物菌株的方法和应用。该方法包括：建立微生物突变体库，构建微流控芯片；在电场作用下利用微流控芯片对所述微生物突变体库中的菌株进行包埋形成核壳结构液滴，其中，所述核壳结构液滴的外相含有凝胶剂、内相含有所述微生物突变体库菌株的培养液与生物相容剂的混合物；将所述液滴与含固化剂的收集液接触固化形成微球，将所述微球经培养后进行微流控分选；其中，所述凝胶剂与所述固化剂相接触能够发生交联固化反应。该方法能够精确控制液滴的尺寸和形貌，对包封的菌株损伤较小，提升微生物菌株筛选的精确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程技术，具体地，涉及一种基于电喷雾技术的高通量筛选微生物菌株的方法和应用。

技术介绍

1、脱落酸是一种植物生长和发育中的重要激素，在植物中起着重要的免疫调节作用；它在植物对干旱和盐胁迫的响应中发挥关键作用，同时参与脱落酸逆境应答以及种子休眠和萌发等过程。作为调节种子休眠和发芽过程中至关重要的激素，脱落酸通过促进种子贮藏蛋白和脂肪的合成，阻止种胚吸水，抑制胚的萌发，以维持种子休眠。灰葡萄孢霉是一种高产脱落酸的主要微生物，野生型灰葡萄孢霉生产脱落酸产量受限，许多专家通过遗传工程手段改良灰葡萄孢霉的代谢途径和基因表达，从而提高脱落酸的产量；或者利用代谢工程的方法，通过调控相关代谢途径的基因表达或调整代谢通路的流量，以增强脱落酸的合成和积累。但是，脱落酸的生物合成途径相对复杂，涉及多个酶和中间产物，并且灰葡萄孢霉的代谢调控网络非常复杂，脱落酸的产量受到多个代谢途径和基因的调控，这些问题都限制了灰葡萄孢霉生产脱落酸的产量。

2、通过随机诱变形成突变体文库，再对突变文库进行高通量筛选获得高产脱落酸的目标菌株是一种常见的微生物改造策略。目本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于电喷雾技术的高通量筛选微生物菌株的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中所述建立微生物突变体库采用紫外辐照、等离子体诱变和化学诱变中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中所述微流控芯片包括玻璃毛细管组件、载玻片、外相针头和内相针头，所述玻璃毛细管组件包括外相毛细管和内相毛细管，所述外相毛细管固定在所述载玻片上，所述内相毛细管的一端同轴嵌套在所述外相毛细管内，所述外相毛细管的侧壁与所述外相针头连接，所述内相毛细管的侧壁与所述内相针头连接；

4.根据权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.一种基于电喷雾技术的高通量筛选微生物菌株的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s1中所述建立微生物突变体库采用紫外辐照、等离子体诱变和化学诱变中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s1中所述微流控芯片包括玻璃毛细管组件、载玻片、外相针头和内相针头，所述玻璃毛细管组件包括外相毛细管和内相毛细管，所述外相毛细管固定在所述载玻片上，所述内相毛细管的一端同轴嵌套在所述外相毛细管内，所述外相毛细管的侧壁与所述外相针头连接，所述内相毛细管的侧壁与所述内相针头连接；

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s2中所述核壳结构液滴的大小和形貌通过改变外相的流速、内相的流速、电压、微流控芯片的液滴出口与收集液之间的距离中的至少一者进行调节；

5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄和，王月桐，钱璐，施天穹，叶超，李想，赵丹杉，杨巧依，李婷，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：