从山茶种子中制备具有降脂作用的不饱和脂肪酸提取物及方法技术

本发明专利技术属植物药技术领域。本发明专利技术公开了从山茶种子中制备具有降脂作用的不饱和脂肪酸提取物及方法。采用本发明专利技术的方法得到的提取物具有显著降低血液中胆固醇含量、甘油三脂含量和低密度脂蛋白含量的作用。本发明专利技术的提取物可与药用载体混合制成药物组合物，或制成保健品。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属植物药
，具体涉及一种。降血脂药物的研究、开发一直是各大药业公司和学术科研部门的研究重点。根据其化学结构特点和主要降血脂功能，目前国际上降血脂化学药主要有胆酸整合剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸及其衍生物、贝特类、普罗布考、泛硫乙胺、弹性酶、Omega-3脂肪酸等几大类。这些药品主要是通过阻止胆酸或胆固醇从肠道吸收、抑制胆固醇的体内合成或促进转化、促进细胞膜上LDL受体表达加速脂蛋白分解、激活脂蛋白代谢酶类、阻止其他脂质的体内合成等机制而发挥作用。从天然资源中寻找安全、疗效好的新分子并开发成新药，是国际上新药研发的一个重要领域，具有重大的科学价值和经济价值。山茶(Camellia japonica)，属茶科(Theaceae)，别名茶子树、山茶油树、建茶、白花茶，是多年木本油料植物。原产中国，具有适应性强、分布广、丰产性好、增产潜力大的特点，主要分布在湖南、浙江、江西、广西等省，我国是世界上最大的山茶种植基地。山茶油的品质好、价值高，是一种可与橄榄油媲美的高级食用油，具有很高的食用价值，长期以来一直作为一种高档的烹调用油应用于市场。茶油主要由不饱和脂肪酸组成，含量在80-95％。我们经过长期的研究，在国际上首次发现山茶油中所含的不饱和脂肪酸类分子对高血脂和其他一些心脑血管疾病有着明显的治疗作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于从山茶种子中分离、纯化具有降脂作用的不饱和脂肪酸提取物。本专利技术提供了一种从山茶种子中分离、纯化具有降脂作用的不饱和脂肪酸提取物，该提取物按重量比含有油酸30％～99％、亚油酸1％～15％、花生烯酸0％～5％、EPA 0％～5％、DHA 0％～5％。本专利技术的另一目的是提供了一种从山茶种子中制备具有降脂作用的不饱和脂肪酸提取物的方法，该方法包括下列步骤(1)初提取一定量的山茶油籽，按下述技术流程进行处理山茶油籽→烘干→清理→剥壳→仁、壳分离→(仁)压扁↓ ↓去除杂质 去除壳→蒸炒→压榨→(油)过滤→机榨毛油 (饼)浸出→粕→浸出毛油压榨时可用榨油机进行，采用二次压榨。第一次入榨温度105~110℃，入榨水份为3％左右，第二次入榨温度125℃，入榨水份为2.5％左右；(2)精炼及纯化对上述得到的毛茶油进行进一步的精炼和不饱和脂肪酸类分子的纯化①精炼山茶毛油→碱炼(5％NaOH)→沉降皂化物→脱色压滤(加活性炭助滤剂，去滤渣)→干燥脱水→真空脱臭②饱和脂肪酸的分离取油酸400g与1800ml丙酮混合，经冷冻，有白色结晶析出，继续冷冻至-15℃后，析出大量白色结晶，该白色结晶为饱和脂肪酸，在低温下进行过滤得到饱和脂肪酸，对留在丙酮溶液中的不饱和脂肪酸进行水浴蒸发，并回收丙酮，最后得不饱和脂肪酸350g；③不饱和脂肪酸的纯化在反应器中，将500g尿素溶于1600g甲醇中，然后加入不饱和脂肪酸于50~60℃下搅拌均匀，使其冷却至-5℃，过滤，并在减压下将残留的甲醇抽净，得到油酸结晶物，得到的结晶在80℃热水里进行处理，静置分层，在分液漏斗中分出上面的油层，用饱和氯化钠溶液洗涤后，在真空下脱水，得到近乎无色的油状液体，即为不饱和脂肪酸的提取物。大规模生产提取物的工艺可在此基础上略作修改，并添置大型设备如榨油机、搅拌罐、分液罐、蒸汽炉等。按照上述初提、精炼及纯化等工艺步骤所得到的山茶油提取物的质量标准如下表1 本专利技术提取物的质量指标 本专利技术的提取物经动物试验测定降脂效应结果如下本专利技术提取物的鹌鹑降脂实验(1)制造模型与分组实验动物鹌鹑为同窝孵出，体重在100g左右。10只动物喂普通饲料，其余喂高脂饲料，饲料均按25g/只，分早晚两次给予，自由饮水。喂养20天后，取普通饲料和高脂饲料喂养动物，分别检测血脂以确定高血脂模型的形成。将模型动物分五组①大剂量组山茶油提取物5ml/kg.d，加入高脂饲料喂养；②中剂量组山茶油提取物2.5ml/kg.d，用法同前；③小剂量组山茶油提取物1ml/kg.d，用法同前；④模型对照组喂高脂饲料；⑤正常动物组正常动物，不给药，喂普通饲料。给药2周。(2)指标及测定使用酶法试剂盒检测指标①总胆固醇(TC)；②甘油三脂(TG)；③低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)；④高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)；⑤HDL-C/LDL-C。(3)统计方法t-检验按照上述方法，用不同剂量的本专利技术提取物对高血脂模型动物鹌鹑进行药效实验的研究，结果如下表2 本专利技术提取物的降脂效应 **P＜0.01(与模型组比较)，具有显著性差异从表2和附图说明图1中可以看出，当该提取物的使用剂量为1ml/kg.d时，在2周后实验鹌鹑的胆固醇(CHO)含量、甘油三酯(TG)含量、低密度脂蛋白(LDL)含量分别比模型组下降了22％、37％和34％；当该提取物的使用剂量为2.5ml/kg.d时，上述含量则分别下降了33％、42％和39％；当该提取物的使用剂量为5ml/kg.d时，上述含量则分别下降了45％、47％和45％；而当使用含98％的油酸、0。5％的亚油酸样品，使用剂量为5ml/kg.d时，上述含量则分别下降了37％、44％和39％；由此可见，本专利技术的提取物表现为1.从山茶种子中分离、提取、纯化所得到的山茶油提取物具有显著的降低血液中的胆固醇含量、甘油三酯含量、低密度脂蛋白含量的作用。2.降血脂效应与其中所含的不饱和脂肪酸含量成正比，亦即不饱和脂肪酸的含量越高，降脂效应越明显。本专利技术的又一目的是提供了上述从山茶种子中制得的不饱和脂肪酸提取物用于制备降血脂作用的药物组合物或保健品。本专利技术的提取物可与各种药用辅料制成胶囊、悬浮物、口服液等剂型药物组合物。一般人用量为6-12g提取物/天。该提取物可以直接加入食品中制备预防和治疗高血脂的保健食品。一般加入量为以成人每天摄取2-6g提取物为适宜的剂量范围。按照上述初提、精炼及纯化等工艺步骤所得到的山茶油提取物的质量标准如下表3 本专利技术提取物的质量指标 实施例2不饱和脂肪酸类分子的测定(1)取样品5滴于50ml圆底烧瓶中，加入10ml甲醇，2~3滴浓硫酸和沸石后，回流3小时作甲酯衍生化反应。(2)反应冷却后，加入适量碳酸钠中和其中的硫酸，取0.5ul上层清液作GC/MS分析。(3)GC/MS检测条件检测仪器Finnigan Voyager气相色谱—质谱联用仪色谱柱HP-5石英毛细管柱(30m×0.25mm，0.25um)柱温150℃(保持2min)--300℃(保持10min)升温速度10℃/min 汽化温度250℃载气(流量)He(1.0ml/min)分流比30∶1质谱检测器EI源，电子能量70Ev，源温200℃将GC/MS检测数据进行谱库检索和质谱分析以确定脂肪酸成份的结构，并用面积归一法计算各种脂肪酸的含量。按照上述脂肪酸类分子的测定方法，对山茶油提取物进行测定，结果如下表4 本专利技术提取物中主要活性成分及含量 软脂酸n-palmitic acid；硬脂酸n-stearic acid油酸oleic acid；亚油酸linolenic acid；花生烯酸arachidonic acidEPAall cis-5，8，11，17-eicosapentaenoic acid；DHAall ci本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从山茶种子中制得具有降脂作用的不饱和脂肪酸提取物，其特征在于该提取物含有下列主要活性成分和含量：＊＊＊。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：夏涛，
申请(专利权)人：上海诺金科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]