疫苗制造技术

本发明专利技术涉及细菌多糖抗原疫苗领域。具体是，本发明专利技术涉及包含肺炎球菌多糖抗原并任选包含Ｔｈ１诱导型佐剂的疫苗，所述多糖抗原主要是肺炎链球菌的肺炎球菌多糖偶联物抗原，其选自：ＰｈｔＡ，ＰｈｔＤ，ＰｈｔＢ，ＰｈｔＥ，ＳｐｓＡ，ＬｙｔＢ，ＬｙｔＣ，ＬｙｔＡ，Ｓｐ１２５，Ｓｐ１０１，Ｓｐ１２８，Ｓｐ１３０和Ｓｐ１３３。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细菌多糖抗原疫苗，其制备以及这种多糖在医学中的应用。具体地，本专利技术涉及包含肺炎球菌多糖抗原并任选包含Th1诱导型佐剂的疫苗，所述多糖抗原通常是肺炎球菌多糖偶联物抗原，与肺炎链球菌蛋白抗原一起配制。
技术介绍
肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是革兰氏阳性细菌，由其所致的发病率和死亡率相当高(尤其是在年幼和年迈群体中)。该细菌可导致侵袭性疾病如肺炎，菌血症和脑膜炎，以及与菌群定居(colonization)有关的疾病，如急性中耳炎。在美国60岁以上的人中，肺炎球菌性肺炎的发病率估计是每100,000人中约3到8例。有20％的病例可导致菌血症和其它的表现如脑膜炎，即使在抗菌素治疗的情况下其死亡率也接近30％。肺炎球菌由化学连接的多糖包裹，所述多糖赋予了该细菌的血清型特异性。肺炎球菌有90种已知血清型，而荚膜是决定其毒力的主要物质，因为荚膜不但可以保护细菌的内表面不受补体的影响，而且其本身的免疫原性极弱。多糖是T非依赖性抗原，不能被加工或在MHC分子上呈递，从而不能与T细胞相互作用。然而，它们通过另一机制刺激免疫系统，所述机制涉及B细胞表面受体的交联。多项试验已显示，抗御侵袭性肺炎疾病的保护作用与荚膜的特异性抗体极为相关，且所述保护是血清型特异性的。以多糖抗原为基础的疫苗是本领域熟知的。有四种已获批准用于人类，包括伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)的Vi多糖，流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)的PRP多糖，四价脑膜炎球菌疫苗(由血清型A，C，W135和Y构成)，以及23价肺炎球菌疫苗(由对应于血清型1，2，3，4，5，6B，7F，8，9N，9V，10A，11A，12F，14，15B，17F，18C，19A，19F，20，22F，23F，和33的多糖组成，占肺炎球菌血分离物的至少90％)。后三种疫苗针对在儿童中引起极高发病率和死亡率的呼吸道感染细菌提供对机体的保护作用，然而这些疫苗还没有被批准用于2岁以下的儿童，因为其免疫原性对该年龄组而言不足。肺炎链球菌是婴幼儿和年幼儿童中侵袭性细菌疾病和中耳炎的最常见的原因。同样，老年人对肺炎球菌疫苗的应答较弱，因此，在该群体中细菌性肺炎的发病率增加。已设计出解决婴幼儿中上述免疫原性缺乏的策略，包括将多糖与大的免疫原性蛋白连接，以提供对T细胞的旁路辅助，并诱导针对所偶联的多糖抗原的免疫记忆。目前，正在对肺炎球菌糖蛋白偶联物疫苗在各个年龄组中的安全性，免疫原性和效力进行评估。已知23价非偶联肺炎球菌疫苗的临床疗效差异较大，从0％到81％不等(Fedson et al.(1994)Arch Intern Med.154；2531-2535)。所述效力似乎与正接受免疫的危险人群相关，如老年人，Hodgkin’s患者，脾切除者，镰刀型细胞病(sickle cell disease)和无丙种球蛋白血症(agammaglobulinemics)患者(Fine et al.(1994)Arch Intem Med.1542666-2677)，还与疾病的表现有关。23价疫苗没有显示出针对肺炎球菌性肺炎(在某些高危人群如老年人中)和中耳炎疾病的保护作用。因此需要改进的肺炎球菌疫苗组合物，尤其是那些能更有效地预防或缓解老年人和儿童的肺炎球菌病的疫苗组合物。本专利技术即提供这样的改进的疫苗。专利技术简述本专利技术提供了疫苗组合物，其包括至少一种肺炎链球菌多糖抗原(优选与一种蛋白载体偶联)和选自以下的肺炎链球菌蛋白抗原多组氨酸三联体(Poly Histidine Triad)家族(Pht；如PhtA，PhtB，PhtD，或PhtE)，Lyt家族(例如LytA，LytB，或LytC)，SpsA，Sp128，Sp130，Sp125，Sp101和Sp133，或其截短物或其免疫功能等效物，任选地，还包括Th1佐剂(诱导明显的Th1型免疫应答的佐剂)。优选肺炎球菌蛋白和Th1佐剂都包括。有利的组合物包括上述本专利技术的肺炎球菌蛋白相互之间的组合，以及与其它的肺炎球菌蛋白的组合。本专利技术的组合物尤其适用于对老年肺炎患者的治疗。肺炎球菌多糖疫苗(偶联型或非偶联型)不能针对老年人群的肺炎起保护作用，而在该群体中该病的发病率非常高。抗御肺炎球菌的关键机制是调理吞噬作用(通过产生抗肺炎球菌多糖抗体而导致体液B细胞/中性粒细胞介导的事件，细菌最终被吞噬)，然而所涉及的调理机制有一部分在老年人中变弱，即PMN(多形核细胞)的超氧化物的产生，其它活性氧物质的产生，PMN的移动，PMN的凋亡，PMN的变形性减弱。在老年人中抗体应答也可能减弱。与一般认识相反，正常水平的抗荚膜多糖抗体不能有效彻底地清除细菌，因为肺炎球菌可以侵入宿主细胞以躲避免疫系统的该种免疫作用。令人惊奇的是，本专利技术人发现在刺激免疫系统的体液免疫(B细胞介导的免疫)的同时刺激免疫系统的细胞免疫(例如T细胞介导的免疫)能产生协同作用(或协作)，它增强肺炎球菌从宿主中被清除。这一发现在一般意义上可指导对肺炎球菌感染的预防(或治疗)，而对基于多糖的疫苗无效的老年人肺炎的预防(或治疗)尤其重要。在不受任何理论限制的情况下，本专利技术发现，如果将肺炎球菌多糖(优选与蛋白载体偶联的)与选自如下的肺炎球菌蛋白PhtA，PhtD，PhtB，PhtE，SpsA，LytB，LytC，LytA，Sp125，Sp101，Sp128，Sp130和Sp133(能被加工并呈递在感染的哺乳动物细胞表面的MHCI和MHCII中)一起给药，免疫系统的两种免疫效应可协同。尽管这些肺炎球菌蛋白自身可激发一种或多种由细胞介导的免疫，但本专利技术人也发现在疫苗制品中存在Th1诱导型佐剂可帮助免疫系统的该种免疫，并且惊讶地发现它还可加强免疫系统的两种免疫之间的协同作用。专利技术详述本专利技术提供改进的疫苗，尤其是用于预防或缓解老年人(和/或婴幼儿)的肺炎球菌感染疫苗。在本专利技术中，年龄在55或55岁以上的患者可视为是老年患者，主要是60岁，更主要是60岁以上的患者。因此，在本专利技术的一个实施方案中提供了一种疫苗组合物，其适合老年患者(和/或婴幼儿)应用，该疫苗组合物包含至少一种肺炎链球菌多糖抗原和至少一种选自下组的肺炎链球菌蛋白抗原PhtA，PhtD，PhtB，PhtE，SpsA，LytB，LytC，LytA，Sp125，Sp101，Sp128，Sp130和Sp133。所述疫苗可任选包含Th1佐剂。在第二个优选实施方案中本专利技术提供了一种疫苗(适用于预防老年患者的肺炎)，其包含至少一种(2，3，4，5，6，7，8，9或10种)肺炎链球菌多糖抗原和至少一种选自下组的肺炎链球菌蛋白抗原PhtA，PhtD，PhtB，PhtE，SpsA，LytB，LytC，LytA，Sp125，Sp101，Sp128，Sp130和Sp133，优选还包括Th1佐剂。在以上实施方案中，所述疫苗优选包括本专利技术的上述肺炎球菌蛋白相互之间的组合，以及与其它肺炎球菌蛋白之间的组合，如下所述。所述疫苗还可以用于治疗其它高危人群如婴幼儿中的肺炎球菌感染(例如中耳炎)。本专利技术的肺炎链球菌多糖抗原通常本专利技术的肺炎链球菌疫苗包含多糖抗原(优选与载体蛋白偶联)，其中所述多糖来源于至少四种肺炎球菌血本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫原性组合物，其包含至少一种肺炎链球菌多糖抗原和至少一种选自下组的肺炎链球菌蛋白抗原：ＰｈｔＡ，ＰｈｔＤ，ＰｈｔＢ，ＰｈｔＥ，ＳｐｓＡ，ＬｙｔＢ，ＬｙｔＣ，ＬｙｔＡ，Ｓｐ１２５，Ｓｐ１０１，Ｓｐ１２８，Ｓｐ１３０和Ｓｐ１３３，或其免疫功能等效物。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：克雷格AJ拉弗里尔，简普尔曼，
申请(专利权)人：史密斯克莱比奇曼生物公司，
类型：发明
国别省市：BE[比利时]