8-氧代脱氧鸟苷的检测方法技术

本发明专利技术公开了8-氧代脱氧鸟苷的检测方法，包括：将含8-oxo-dG待测物加入到固相载体；加入抗8-oxo-dG抗体，使8-oxo-dG与抗8-oxo-dG抗体反应形成特异性结合物；加入抗鼠IgG-HRP多聚物，使抗鼠IgG-HRP多聚物与特异性结合物反应形成8-oxo-dG、抗8-oxo-dG抗体和抗鼠IgG-HRP多聚物的三元复合物；加入ECL化学发光底物，ECL化学发光底物在三元复合物作用下发光；检测ECL化学发光底物的发光强度，根据发光强度计算待测物中8-oxo-dG的含量。本发明专利技术的方法，回收率高、检测限低、交叉反应低、操作简单，检测时间短、无需复杂的前期处理和采用贵重仪器，检测成本低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和免疫学领域，尤其是涉及一种8-氧代脱氧鸟苷的 检测方法。
技术介绍
机体在细胞中的线粒体、微粒体、质膜和胞质中的酶系统和非酶系统在代谢过程中，可以产生活性氧自由基。同时机体在受到外源化学物质和电离辐射等条件下也可能产生活性氧自由基。所述活性氧自由基可以与DNA的碱基形成加合物如脱氧鸟苷，所述脱氧鸟苷加合物在羟化酶的作用下，形成羟基脱氧核苷，其中8-氧代脱氧鸟苷(8-oxo-dG)是羟基脱氧核苷羟中的主要一种，全名为8-羟基-2、-脱氧鸟苷(8-oxo-dG)，其化学结构如图1 所示。8-oxo-dG可直接引起基因突变和癌基因表达。如Kuchino等报道8_羟基脱氧鸟嘌呤具有同任何碱基配对的能力。脱氧鸟嘌呤的C8被羟基化后，脱氧鸟嘌呤同胞嘧啶特异性配对的能力丧失，导致DNA复制时碱基的错配，从而出现多种基因突变的形式。Wood等曾证实在大肠杆菌中，8-氧代脱氧鸟苷具有诱导G — T置换的能力。Cheng等也报道8_氧代脱氧鸟苷可以引起G —T和A —C置换。8-氧代脱氧鸟苷可以引起突变，ras基因激活的主要原因为点突变。Kamiya等M证实用人工合成的第1本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种８－氧代脱氧鸟苷的检测方法，包括步骤：将含８－ｏｘｏ－ｄＧ的待测物加入到固相载体中；向固相载体中加入抗８－ｏｘｏ－ｄＧ抗体，使８－ｏｘｏ－ｄＧ与抗８－ｏｘｏ－ｄＧ抗体反应形成特异性结合物；向固相载体中加入抗鼠ＩｇＧ－ＨＲＰ多聚物，使抗鼠ＩｇＧ－ＨＲＰ多聚物与所述特异性结合物反应形成８－ｏｘｏ－ｄＧ、抗８－ｏｘｏ－ｄＧ抗体和抗鼠ＩｇＧ－ＨＲＰ多聚物的三元复合物；向固相载体中加入ＥＣＬ化学发光底物，所述ＥＣＬ化学发光底物在所述三元复合物的作用下发光；检测ＥＣＬ化学发光底物的发光强度，根据发光强度计算待测物中８－ｏｘｏ－ｄＧ的含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周际，施艾马克华科奥斯特，李远，
申请(专利权)人：华瑞同康生物技术深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：94