含有铝佐剂和组氨酸的疫苗制造技术

为了提高含铝盐疫苗的稳定性，本发明专利技术使用了氨基酸组氨酸。这可提高ｐＨ稳定性和佐剂吸附，并可减少抗原水解。组氨酸优选在吸附于铝盐的过程中存在。疫苗中的抗原可以是蛋白质或糖，优选得自脑膜炎奈瑟球菌。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及疫苗制剂领域。
技术介绍
除了含有抗原性物质外，疫苗还含有诸如稀释剂、赋形剂、防腐剂、稳定剂和缓冲剂之类的物质。通常，疫苗还含有佐剂，即一种能增强针对疫苗抗原的免疫应答反应的物质。传统上用于人疫苗的佐剂为铝盐，如氢氧化铝和磷酸铝。还已知许多其它实验性佐剂，这些佐剂在如参考文献1中有评述。但是，吸附于铝盐仍然是最常用的疫苗佐剂剂型。虽然铝盐已被广泛使用，但是它们并不总是与各种具体抗原相容。例如，已有人提出，氢氧化铝可能并不适合用于多价疫苗，包括乙型肝炎表面抗原，或者不适合用于从流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)得到的荚膜多糖。还有人提出，出于相容性考虑，应将同一疫苗制剂内的不同抗原吸附于不同的铝盐。除了抗原相容性外，还需要考虑使用铝盐时的疫苗稳定性。例如，已显示其蛋白质吸附能力在室温下随着时间而下降，在高压灭菌时也如此。铝盐还可能导致难以冻干。此外，已发现氢氧化铝甚至在低温时以及抗原偶联于载体蛋白时可水解多糖抗原，从而导致疫苗效力下降。通常，当人们将注意力转移到配制临床用的抗原时才会产生上述问题，在初始研究以及抗原本身开发期间，人们可能并不会对佐剂予以考虑。本专利技术的一个目的是提高含有铝盐的疫苗的稳定性。具体而言，提高在各种温度条件下的pH稳定性(缓冲作用)和佐剂吸附作用，和/或提高抗原稳定性(如减少水解)。专利技术公开的内容本专利技术以氨基酸——组氨酸能提高含有铝盐佐剂的疫苗的稳定性的惊人发现为基础。这已见于糖抗原和蛋白质抗原。因此，本专利技术提供一种组合物，该组合物含有抗原、铝盐和组氨酸。本专利技术还提供一种生产所述组合物的方法，该方法包括将抗原、铝盐和组氨酸混合的步骤。抗原抗原优选是蛋白质抗原或糖抗原(任选地偶联)。优选的抗原得自细菌，其中奈瑟氏球菌属(Neisseria)的细菌(如脑膜炎奈瑟球菌，(N.meningitidis)特别优选。·脑膜炎奈瑟球菌B血清群蛋白质抗原，如在参考文献9-15中所给出的抗原，其中，蛋白质′287′(见下文)及其衍生物(如ΔG287)特别优选；·脑膜炎奈瑟球菌B血清群外膜囊(OMV)制品，如参考文献16-19等所公开的哪些制品；·脑膜炎奈瑟球菌A、C、W135和/或Y血清群糖抗原，如参考文献20中公开的C血清群寡糖(还可参见参考文献21)；·肺炎球菌(Streptococcus pneumococcus)糖抗原(参见参考文献22-24)；·百日咳杆菌(Bordetella pertussis)抗原，如百日咳杆菌百日咳全毒素(PT)和丝状血凝集素(FHA)，任选地可与pertactin和/或凝集原2和凝集原3组合(如参考文献25和26)；·白喉抗原，如白喉类毒素(如参考文献27的第3章)，如CRM197突变体)(如参考文献28)；·破伤风抗原，如破伤风类毒素(如参考文献27的第4章)；·幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)蛋白质抗原，如CagA(如参考文献29)、VacA(如参考文献29)、NAP(如参考文献30)、HopX(如参考文献31)、HopY(如参考文献31)和/或脲酶；·流感嗜血杆菌糖抗原，优选寡糖；·淋病奈瑟球菌(N.gonorrhoeae)抗原(如参考文献9-11)； ·肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)抗原(如参考文献32-38)；·砂眼衣原体(Chlamydia trachomatis)抗原(如参考文献39)；·牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)抗原(如参考文献40)；·粘膜炎莫拉氏菌(Moraxella catarrhalis)抗原(如参考文献41)；·无乳链球菌(Streptococcus agalactiae，链球菌B组)抗原(如参考文献42和43)；·酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes，链球菌A组)抗原(如参考文献43-45)；·金黄色葡萄球菌(Staphylococcis aureus)抗原(如参考文献46)；·炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)抗原(如参考文献47-49)。用于本专利技术的特殊的病毒抗原包括·甲型肝炎病毒抗原，如灭活的病毒(如参考文献50和51)；·乙型肝炎病毒抗原，如表面抗原和/或核心抗原(如参考文献51和52)；·丙型肝炎病毒抗原(如参考文献53)；·脊髓灰质炎病毒抗原(polio antigen)(如参考文献54和55)，如IPV；·狂犬病抗原(如参考文献56)，如冻干的灭活病毒(如参考文献57，RabAvertTM)；·麻疹、腮腺炎和/或风疹抗原(如参考文献27的第9-11章)；·流感抗原(如参考文献27的第19章)，如血凝素和/或神经氨酸酶表面蛋白；·黄病毒家族(黄病毒属)的病毒抗原，如从黄热病病毒、日本脑炎病毒、登革热病毒的4种血清型、蜱传脑炎病毒、西尼罗河脑炎病毒得到的抗原；·鼠疫病毒(pestivirus)抗原，如从传统的猪热病毒(porcine fever virus)、牛病毒性腹泻病毒和/或边界疾病病毒(border disease virus)获得的抗原；·细小病毒抗原，如细小病毒B19的抗原。该组合物可含有一种或多种这些细菌抗原和病毒抗原。该组合物可不含有病毒抗原。可使用的其它抗原包括·朊病毒蛋白(如CJD朊病毒蛋白)； ·淀粉样蛋白，如β肽(参考文献58)；·癌症抗原，如参考文献59的表1和参考文献60的表3和表4所列出的那些抗原。当使用糖或碳水化合物抗原时，较佳将它们偶联于载体蛋白，以增强免疫原性(如参考文献61和70)。优选的载体蛋白是细菌毒素或类毒素，如白喉类毒素或破伤风类毒素。特别优选的是CRM197白喉类毒素。其它合适的载体蛋白包括脑膜炎奈瑟球菌外膜蛋白(如参考文献71)、合成肽(如参考文献72和73)、热激蛋白(如参考文献74)、百日咳蛋白(如参考文献75和76)、从流感嗜血杆菌获得的蛋白D(如参考文献77)、从C.difficile获得的毒素A或毒素B(如参考文献78)，等等。当混合物含有从A和C血清群获得的荚膜糖时，较佳的是，MenA糖MenC糖的比例大于1(如2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、10∶1或更高)。可将脑膜炎奈瑟球菌不同血清群获得的糖偶联于相同或不同的载体蛋白。可采用任何合适的偶联反应，需要时可使用任何合适的接头。需要时，可将毒性的蛋白质抗原脱毒(如采用化学和/或遗传方法将百日咳毒素脱毒，参见参考文献26)。人乳头状瘤病毒(HPV)病毒样颗粒(VLP)不是优选的抗原(参见WO00/45841、WO00/57906、WO01/28585)。当该组合物中含有白喉抗原时，较佳的是，该组合物还含有破伤风抗原和百日咳抗原。类似地，当组合物中含有破伤风抗原时，组合物中较佳还含有白喉抗原和百日咳抗原。类似地，当组合物中含有百日咳抗原时，组合物较佳还含有白喉抗原和破伤风抗原。可使用百日咳全细胞抗原。较佳是将抗原吸附于铝盐。当存在HBsAg时，较佳的是，该抗原吸附于羟基磷酸铝，或者不吸附于任何盐。最好是避免将HBsAg吸附于氢氧化铝。当存在流感嗜血杆菌糖抗原时，较佳的是，该抗原吸附于羟基磷酸铝，或者不吸附于任何盐。最好避免Hib糖吸附于氢本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，其特征在于，它含有抗原、铝盐和组氨酸。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：M肯托尼，M马费伊，
申请(专利权)人：启龙股份公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]