逆转录病毒蛋白酶抑制剂的联合制造技术

本发明专利技术涉及使用能在体内或体外有效地抑制哺乳动物逆转录病毒复制的逆转录病毒蛋白酶抑制剂的组合，来治疗哺乳动物逆转录病毒、例如ＨＩＶ感染的方法。具体地讲，本发明专利技术涉及与其它蛋白酶抑制剂化合物一起用于联合治疗的蛋白酶抑制剂化合物。本发明专利技术还涉及使用蛋白酶抑制剂与蛋白酶抑制剂以外的抗病毒剂的组合的联合治疗。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本申请是国际申请日为1995年6月2日(国际申请号为PCT/US95/06673)、进入国家阶段申请号为95194464.9的专利技术名称为“逆转录病毒蛋白酶抑制剂的联合”的专利技术专利申请的分案申请。
技术介绍
1、专利
本专利技术涉及使用能在体内和体外有效地抑制哺乳动物逆转录病毒(如HIV)复制的逆转录病毒蛋白酶抑制剂的联合，来治疗哺乳动物逆转录病毒、例如人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的方法。具体地讲，本专利技术涉及与其它蛋白酶抑制剂化合物一起用于联合治疗的蛋白酶抑制剂化合物。2、相关领域在病毒的复制周期中，gag和gag-pol基因转录产物被翻译成蛋白。随后，该蛋白经病毒编码的蛋白酶加工产生病毒核心的病毒酶和骨架蛋白。通常，gag前体蛋白被加工成核心蛋白，pol前体蛋白被加工成病毒酶，例如逆转录酶和逆转录病毒蛋白酶。已经证实，逆转录病毒蛋白酶对前体蛋白的正确加工是传染性病毒颗粒的装配所必须的。例如，已经证实，HIV的pol基因的蛋白酶区的框架迁移突变可以抑制gag前体蛋白的加工。另外还证实，通过对HIV蛋白酶活性位点中的天冬氨酸残基进行位点针对性诱变，也能抑制gag前体蛋白的加工。因此，已经开始了通过抑制逆转录病毒蛋白酶的功能来抑制病毒复制的尝试。逆转录病毒蛋白酶抑制一般包括一个过渡态模拟物，据此使逆转录病毒蛋白酶暴露于一个模拟化合物，该化合物和gag及gag-pol蛋白竞争与酶的连接(一般以可逆方式)，从而抑制结构蛋白的特异性加工和逆转录病毒蛋白酶的释放。通过这种方式可以有效地抑制逆转录病毒复制蛋白酶。目前已经提出了几类模拟化合物，特别是用于抑制蛋白酶，例如用于抑制HIV蛋白酶的模拟化合物。这些模拟物包括羟乙胺等排体，还原酰胺等排体和非肽等排体。参见，例如EP 0346847；EP 0342541；Roberts等，“以肽为基础的蛋白酶抑制剂的合理设计”，科学，248，358(1990)；Erickson等，“与HIV-1蛋白酶复合的C2对称抑制剂的设计活性和2.8A晶体结构”，科学，249，527(1990)；和S.Thaisrivongs，“以结构为基础的非肽蛋白酶抑制剂的设计”，第35届Buffalo药物化学年会，纽约州立大学Buffalo分校，Buffalo，NY，1994年5月22-25日。关于逆转录病毒蛋白酶抑制剂(例如HIV蛋白酶抑制剂)的一个问题就是抑制剂的耐药病毒株的出现。例如，Merck&Co.的HIV蛋白酶抑制剂L-735，524对人类的HIV感染有效，但后来在病人中出现了对L-735，524耐药的HIV株〔Waldholz，华尔街杂志，1994年2月25日，B3页；和Condra等，自然，374569-571，(1995)〕。其它例子参见Vacca等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 914096-4100(1994)；Ho等，病毒杂志，682016-2020(1994)；和Sardana等，生物化学，332004-2010(1994)。专利技术概述本专利技术涉及使用能在体内或体外有效地抑制逆转录病毒复制的逆转录病毒蛋白酶抑制剂的联合，来治疗哺乳动物逆转录病毒、例如人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的方法。具体地讲，本专利技术涉及与其它蛋白酶抑制剂化合物一起用于联合治疗的蛋白酶抑制剂化合物。此外，这种联合还可以用于和其它抗病毒剂的联合。专利技术详述逆转录病毒蛋白酶是逆转录病毒复制过程中的关键酶。通过将病毒与逆转录病毒蛋白酶抑制剂接触，就能够抑制逆转录病毒(例如HIV)的繁殖。然而，随着逆转录病毒与蛋白酶抑制剂接触时间蛋白延长，逆转录病毒的变体可能会经受选择，从而产生对蛋白酶抑制剂耐药的新的流行逆转录病毒株。新的流行逆转录病毒株能产生一种蛋白酶，该蛋白酶不再受蛋白酶抑制剂的抑制或抑制不充分(更为常见)，即使在蛋白酶抑制剂存在下病毒也能自由繁殖，除非不断提高抑制剂的浓度。本专利技术提供一种克服出现对逆转录病毒蛋白酶抑制剂耐药的逆转录病毒株的方法。本方法包括向哺乳动物，例如人、猴子、猫等施用有效量的至少两种逆转录病毒蛋白酶抑制剂。给药可以通过同时施用至少两种逆转录病毒蛋白酶抑制剂来完成，也就是说，施用两种或多种逆转录病毒蛋白酶抑制剂，从而使所述哺乳动物体内在任何时候均存在有效量的至少两种抑制剂。此外，给药也可以通过先后或交替施用至少两种逆转录病毒蛋白酶抑制剂来完成，也就是说，施用两种或多种逆转录病毒蛋白酶抑制剂，从而使所述哺乳动物体内在任何时候均存在有效量的唯一一种抑制剂。通过对逆转录病毒蛋白酶抑制剂的适当选择，即使在任何一种抑制剂的耐药株的存在下，该方法也能有效的控制逆转录病毒的繁殖。逆转录病毒蛋白酶抑制剂基于逆转录病毒耐药株的耐药谱进行选择，这些耐药株是通过将抑制剂与逆转录病毒繁殖培养液接触而在体内或体外产生的。所选择的逆转录病毒蛋白酶抑制剂应对至少一种逆转录病毒耐药株是没有交叉耐药性的。当逆转录病毒株对两种抑制剂均有耐药性时，认为此逆转录病毒株对这两种蛋白酶抑制剂是有交叉耐药性的。尽管有些交叉耐药性是可以忍受的，但优选被选为一组的逆转录病毒蛋白酶抑制剂之间不存在交叉耐药性。这样，由于与第一种逆转录病毒蛋白酶抑制剂接触而可能产生的逆转录病毒变体(或突变株)，仍然可以被第二种逆转录病毒蛋白酶抑制剂所抑制；或由于与第一种和第二种逆转录病毒蛋白酶抑制剂接触而可能产生的逆转录病毒变体(或突变株)，仍可以被第三种逆转录病毒蛋白酶抑制剂、或第四种逆转录病毒蛋白酶抑制剂等所抑制。对各种蛋白酶抑制剂的交叉耐药谱进行比较，选择没有或仅有很少交叉耐药性的化合物用于联合治疗。药物耐药性的表现型可以分为无耐药性，低水平耐药性(EC50或EC90的改变小于约10倍)，中等水平耐药性(EC50或EC90的改变为约10-约100倍)，或高水平耐药性(EC50或EC90的改变大于约100倍)。可以预言，当所能达到的体内抑制剂浓度对耐药病毒的蛋白酶抑制作用降低时，药物的耐药性会引起对病人所携带病毒的作用效果的下降。因此，更为优选的蛋白酶抑制剂的联用是，所选择的蛋白酶抑制剂对于另一个抑制剂来说具有最小交叉耐药谱(即，优选，不高于中等水平耐药性；更为优选，不高于低水平耐药性；最为优选没有耐药性)，同时对野生型和/或耐药性病毒有最大效能。例如，用于与第一种化合物联用的优选化合物，优选针对对于第一种化合物有中等水平、更为优选有高水平耐药性的病毒株有效。各个抑制剂及联合使用的药理学和毒理学也是用于联合治疗的抑制剂的选择因素。更为优选的是，当至少一种对第一种逆转录病毒蛋白酶抑制剂耐药的病毒株，与至少一种对第二种逆转录病毒蛋白酶抑制剂耐药的病毒株在蛋白酶的肽序列中有不同的氨基酸取代时(这些取代影响蛋白酶上同一底物的结合位点区并与所观察到的抑制剂的耐药性有关)选择逆转录病毒蛋白酶抑制剂。因此就限制了可能出现于蛋白酶同一位点的可能的氨基酸取代的数目。当该位点对于酶的活性、有效性和/或稳定性至关重要时，这一点非常正确。这一点已在实施例1和2的有关HIV蛋白酶抑制剂中观察到。针对实施例1的化合物的逆转录病毒耐药性源于HIV蛋白酶的88位氨基酸的位点突变(天冬酰胺88被天冬氨酸88取代)。针对实施例2的化合物的逆转录病毒耐药性本文档来自技高网...

【技术保护点】
选择第一种和第二种逆转录病毒蛋白酶抑制剂给予患者的方法，所述方法包括（ａ）将所述第一种逆转录病毒蛋白酶抑制剂暴露于繁殖中的逆转录病毒培养物中，以及（ｂ）检测一种或多种逆转录病毒蛋白酶抑制剂对源自步骤（ａ）的逆转录病毒株的逆转 录病毒抑制活性，其中按照其对所述逆转录病毒株的效力选择所述第二种逆转录病毒蛋白酶抑制剂。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：ML布赖恩特，KE波特斯，M施米特，SP塔克，
申请(专利权)人：GD瑟尔公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]