一种糖皮质激素增效剂制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，公开了一种糖皮质激素增效剂，其特征在于使用人参总皂苷作为增效剂，其配比分别如下：人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，地塞米松０．７５～１８７．５ｍｇ；人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，倍他米松０．７５～１８７．５ｍｇ；人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，强的松５～１２５０ｍｇ；人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，强的松龙５～１２５０ｍｇ；人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，甲强龙４～１０００ｍｇ；人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，可的松２５～６２５０ｍｇ；人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，氢化可的松２０～５０００ｍｇ。人参总皂苷作为一种糖皮质激素增效剂，可在包括系统性红斑狼疮、肾病综合征、多发性肌炎、类风湿性关节炎等在内的需要长期或大量使用糖皮质激素治疗的疾病中得以应用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，具体涉及一种糖皮质激素(glucocorticoid，GC)增效剂，是将人参总皂苷(ginsenosides，GS)用作GC的抗炎、抗应激、免疫抑制等生物学效应增效剂的用途。
技术介绍
GC既是人体分泌的一种甾体类激素，也是临床常用的药物，它主要通过与糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor，GR)结合发挥作用。大剂量GC常用于抗炎、抗应激作用，如抢救休克病人及控制严重变态免疫反应等；小剂量GC常用于一些自身免疫性疾病的长期治疗。由于GC本身的副作用如可导致溃疡出血、血压升高、免疫力降低、骨质疏松等，以及长期使用产生激素抵抗等，使其在临床应用受到很大限制。如果能有一种药物可以增加GC的生物学效应，那么就可以减少其用量，降低副作用的发生而不影响其疗效。GS是中药人参的主要有效成分，现代药理研究发现它既具有抗应激提高免疫力等作用，又可在一定程度上上调GR水平和最大结合容量，从而可以提高GC与其受体结合的数量和能力。但至今未见将GS用作GC增效剂的报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种GC增效剂，它可以在增强GC的生物学效应的基础上减少GC用量。通过体内外实验证明GS与GC联合应用可以增强GC的抗炎、抗应激及免疫抑制等效应，从而减少GC用量。因此，可将GS用作GC的增效剂。体外实验结果表明GS可以提高HL-7702细胞中地塞米松(dexamethasone，Dex)诱导的GR基因转录，并可以部分逆转Dex对GR表达和结合容量的抑制作用，这种情况同样可见于除红细胞以外的其它细胞株中。进而我们又通过动物实验证实，GS联合小剂量GC对大鼠应激后肝功能的保护作用要远远优于单独使用GC，其机理部分是通过提高GR最大结合容量、GRmRNA表达和抑制某些炎症因子的释放而实现的。这强烈提示GS可以通过提高GR的表达和结合能力来增强GC的生物学效应。临床前瞻性随机双盲对照研究也证实，低于临床常用剂量的小剂量GC对应激、炎症等造成的肝损伤无明显保护作用，但联合一定量的GS后则呈现出肝功能明显好转的趋势。本专利技术的技术方案是一种糖皮质激素增效剂，其特征在于使用人参总皂苷作为增效剂，其配比如下人参总皂苷200mg～1200mg，地塞米松0.75～187.5mg；人参总皂苷200mg～1200mg，倍他米松0.75～187.5mg；人参总皂苷200mg～1200mg，强的松5～1250mg；人参总皂苷200mg～1200mg，强的松龙5～1250mg；人参总皂苷200mg～1200mg，甲强龙4～1000mg；人参总皂苷200mg～1200mg，可的松25～6250mg；人参总皂苷200mg～1200mg，氢化可的松20～5000mg。本专利技术将GS用作GC增效剂，不仅增强了GC的生物学效应，而且可以减少GC用量，从而降低其副作用的发生率。由于与GR结合是GC发挥作用的主要途径，因而GS对GC的增效作用是没有病种特异性的，即适用于所有适合GC治疗的疾病。可将人参总皂苷用于所有使用糖皮质激素的疾病中，尤其是需要长期或大量使用糖皮质激素治疗的疾病如系统性红斑狼疮、肾病综合征、多发性肌炎等等。附图说明图1.GS影响GC诱导报告基因表达的量效关系图2.GS影响GC诱导报告基因表达的时效关系图3.GS对Dex诱导HL-7702细胞GR mRNA表达下降的抑制效应图4.GS对Dex诱导GR蛋白下调的抑制效应图5.HL-7702细胞GR简单单位点饱和分析图6.肝总动脉结扎后12h各组大鼠血清ALT变化图7.肝总动脉结扎后12h各组大鼠血清AST变化图8.肝总动脉结扎后12h各组大鼠血清ALP变化图9.各组肝脏GR Bmax的变化比较图10.各组肝脏GR mRNA的变化比较图11.各组血清皮质酮的变化比较图12.各组血清TNF-α的变化比较图13.各组血清IL-1β的变化比较图14.各组血清IL-6的变化比较注图3、4中a，P＜0.01 vs control group；b，P＜0.05 vs Dex-treated group；图6、7、8中△P＜0.01 vs NC group；*P＜0.01 vs Model group；**P＜0.05 vs Model group图9、10、11、12、13、14中△△P＜0.05 vs NC group；△P＜0.01 vs NC group；*P＜0.01 vs Model group。具体实施例方式现结合实施例对本专利技术作详细描述。实施例1.体外实验1.以不同浓度的GS(6.25～100 mg/L)与10-8M/L Dex共同处理HL-7702细胞，24小时后检测GS对GC诱导GR转录激活功能的影响。图1所示是GS影响GC诱导报告基因表达的量效关系。可见GS对GC诱导GR报告基因的表达有显著的增强作用，但是呈非剂量依赖性特征，当GS浓度为25mg/L，GS的增强作用最强。图2所示是GS影响GC诱导报告基因表达的时效关系。可见GS能够显著增强GC诱导GR转录激活效应，当GS剂量为25mg/L、作用时间为36h时，其作用效果最佳。2.将同时含有25 mg/L GS与Dex(10-8mol/L)的培养液诱导细胞36h后，检测细胞GRmRNA水平和GR蛋白表达。图3所示是GS对Dex诱导HL-7702细胞GR mRNA表达下降的抑制效应。可见Dex处理后细胞GR mRNA表达下降47％(P＜0.05)，然而，GSS能够抑制Dex对细胞GR mRNA的下调作用，能够使Dex诱导细胞GR mRNA的表达升高大约40％。表明GS在细胞GR转录水平上具有拮抗(反转)Dex对GR mRNA转录负调节的作用。图4所示是GS对Dex诱导GR蛋白下调的抑制效应。可见与对照组相比Dex可致细胞GR水平下降至52％，而Dex与GS合用后，可使GR表达水平上升至73％，两组比较具有显著的统计学差异(P＜0.05)。表明GS能够显著抑制Dex对细胞GR蛋白表达的下调作用，其作用效应与GS增强被抑制的GR mRNA的转录有关。3.为了明确GS在改变细胞GR蛋白量的变化的同时，对GR与配体的结合活性是否有影响，分别观察了细胞经0.01％乙醇、10-8mol Dex或10-8mol Dex与25mg/L GS共同作用36 h后GR饱和曲线的变化。图5所示是HL-7702细胞GR简单单位点饱和分析。可见各组随着3H-Dex浓度增加，非特异结合量(F)也增加，特异结合最终趋向饱和。Dex组饱和曲线起始段较阴性对照组明显低平，其最大特异结合容量为36fmol/106细胞，明显低于对照组(83fmol/106细胞)，说明HL-7702细胞经Dex处理后，其GR结合活性明显降低；然而，Dex与GS联合作用组细胞GR接近饱和时的特异结合容量约为58fmol/106细胞。证实GS可以部分拮抗Dex对GR结合活性的抑制作用，并且提高Dex作用下细胞GR的结合容量。表1所示是不同诱导条件下HL-7702细胞平衡解离(Kd)常数最大结合容量(Bmax)的比较。HL-7702细胞在正常状态下的Kd值和Bmax分别为3.57±0.52nM和49665±4863位点/细胞，经Dex处理后细胞GR的Kd明显升高达7.1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种糖皮质激素增效剂，其特征在于使用人参总皂苷作为增效剂，所说糖皮质激素选自地塞米松、倍他米松、强的松、强的松龙、甲强龙、可的松、氢化可的松，其配比分别如下：　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，地塞米松０．７５～１８７．５ｍｇ；　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，倍他米松０．７５～１８７．５ｍｇ；　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，强的松５～１２５０ｍｇ；　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，强的松龙５～１２５０ｍｇ；　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，甲强龙４～１０００ｍｇ；　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，可的松２５～６２５０ｍｇ；　　　　人参总皂苷２００ｍｇ～１２００ｍｇ，氢化可的松２０～５０００ｍｇ。

【技术特征摘要】
1.一种糖皮质激素增效剂，其特征在于使用人参总皂苷作为增效剂，所说糖皮质激素选自地塞米松、倍他米松、强的松、强的松龙、甲强龙、可的松、氢化可的松，其配比分别如下人参总皂苷200mg～1200mg，地塞米松0.75～187.5mg；人参总皂苷200mg～1200mg，倍他米松0.75～187.5mg；人参总皂苷200mg～1200m...

【专利技术属性】
技术研发人员：封颖璐，凌昌全，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]