松果菊苷的制药新用途制造技术

本发明专利技术的目的在于公开一种化合物的新制药用途，即松果菊苷在制备治疗帕金森病药物中的新制药用途。本发明专利技术公开了松果菊苷对神经元损伤的保护作用、对自主活动和运动的协调性的改善作用等。

【技术实现步骤摘要】
松果菊苷的制药新用途的制作方法松果菊苷的制药新用途本专利技术专利申请为分案申请，原案申请号为200510002898. 7，申请日为 2005年1月28日，专利技术名称为松果菊苷的制药新用途。 专利
本专利技术涉及一种化合物的新制药用途，特别涉及松果菊苷的新制药用途。
技术介绍
肉苁蓉(Herba Cistanches)为常用的传统补益中药，具有补肾阳、益 精血、润肠通便的功效。松果菊苷(图l)是肉苁蓉中含量较高的一种苯乙 醇苷类化合物，在以管花肉苁蓉(6YW朋c力e f^乃^)为原料研制的国家 级二类新药苯乙醇总苷中其含量高达48%。因此进一步研究松果菊苷单体的 活性具有重要的意义。同时，松果菊苷可以是合成的或天然来源的，具体包括从玄参科、木犀 科、唇形科、列当科、车前科、马鞭草科、爵床科、鹿蹄草科等^f的植物中 提取分离得到的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于公开一种化合物的新制药用途，特别涉及松果菊苷的 新制药用途。'松果菊苷是一种已知的具有药物活性的物质，因此，可以按照常规的制 剂方法，将其制备成临床上可适用的任何一种药剂，例如，片剂、胶囊剂、 注射剂、口服液体制剂、颗粒剂等。在制备上述制剂的过程当中，可以将松果菊苷与任何一种适用于制备成 临床药剂的赋形剂混合使用，制备成药物制剂。对本专利技术药物制剂的药效学部分进行初步研究，结果表明松果菊能够显 著改善小鼠的自主活动次数和滚筒运动的协调性；用松果菊苷和阳性药金刚 烷胺预处理后，和MPTP模型组相比能明显的增加其活动次数和滚筒运动潜 伏期。HPLC-EC实验结果发现，给予松果菊苷和金刚烷胺预处理后，能够改善纹状体内DA的'含量；而单用松果菊苷20mg/kg给药组发现，可以增加正 常大鼠的DA含量，并显著性的降低DOPAC和HVA的含量，这些结果表明松 果菊苷在行为学中的效应可能和改善MPTP损伤的C57小鼠纹状体的DA水平 有关;进一步研究表明松果菊苷还能显著的增加DA/DOPAC和DA/HVA的比率， 单用松果菊苷组更为显著。用松果菊苷预处理后和模型组相比则能显著增加 黑质部位的多巴胺能神经元的数量；给予MPTP后可看到黑质和纹状体部位 的TH含量均明显降低，而给予松果菊苷预处理后则可以不同程度的增加TH 含量，从而说明松果菊苷能够保护MPTP诱导的黑质和纹状体部位的多巴胺 能神经元的损伤。其他实验表明，松果菊苷对脑缺血再灌注所致空间学习记 忆障碍小鼠的学S记忆能具有明显的改善作用；对脑神经损伤所致小鼠空间 学习记忆障碍有明显的改善作用。下述实验例用于进一步说明本专利技术 实验例l松果菊苷抗帕金森病小鼠模型的神经保护作用研究1材料1. 1 动物C57BL/6小鼠，雄性，体重20 - 25g ，由北京大学医学部实验动物中心 提供，饲养于室温环境下，明暗周期12小时，自由进食，饮水不限。实验前 适应环境3天。随机分六组，每组12只，分别为对照组、模型组(30 mg/kg MPTP)、以及松東菊苷给药组(10、 50mg/kg) +MPTP、阳性药金刚烷胺组 (40 mg/kg) + MPTP以及单用松果菊苷组(50 mg/kg)。连续灌胃给药14 天，于第11天开始灌胃给药前1小时腹腔注射MPTP 30 mg/kg (对照组和单 用松果菊苷组给予等体积的生理盐水)，连续4天，最后一次给药后l天，进 行行为学指标测试，3天后脱颈处死测定多巴胺递质含量以及免疫组化染色。1. 2松果菊苷松果菊苷(echinacoside)由北京华医神农医药科技有限公司自制，纯度 达到90%以上。 1. 3试剂1-甲基-4-苯基-l， 2， 3， 6-四氢吡啶(MPTP)，多巴胺(DA) ， 3， 4-二羟苯乙酸(DOPAC)，高香草酸(HVA)，均为Sigma公司产品。辛垸基磺4酸钠(SOS)，高氯酸(AR)，半胱氨酸(AR) ， Na2EDTA (AR)，柠檬酸(AR)，无 水乙酸钠(AR)，磷酸氢二钠(AR)，柠檬酸钾(AR)，三乙胺(AR)，甲醇(AR) 等试剂均由北京大学医学部供应科提供。酪氨酸羟化酶(Tyroxine hydroxylase, TH)的多克隆抗体由美国Chemicon International公司提供， HistostainTM-SP Kits以及ECL发光液由北京中山生物技术有限公司提供。 1.4仪器XZ-4型小鼠自主活动仪，由中国医学科学院药物研究所研制。SD-2型小 鼠滚筒仪，北京大学医学部实验仪器厂生产。高效液相电化学检测系统 (Princeton Applied Research Model 174A Polarographic Analyzer)， 美国Princeton Applied Research Corporation生产。2 方法2.1行为学实验 2.1.1 —般行为学表现观察小鼠在腹腔给予MPTP造模后的一般行为表现，有无异常反应，比较 分析各组之间的差异。2.1.2自主活动实验使用XZ-4型小鼠自主活动仪测定小鼠自发活动并记数，将小鼠放入自主 活动箱中(高l'3cm，直径25cm)(每次同时测定4只小鼠，每个活动箱 中一只)由记录仪自动记录小鼠活动情况，测定每只小鼠5分钟内的活动次 数，进行统计学处理。2.1.3滚筒实验使用SD-2型小鼠滚筒仪测试小鼠的滚筒行为表现。测试前连续训练3天， 每天2次，转速为12转/分钟，训练时间120秒。将小鼠置于滚筒仪的滚筒上， 设置转速25转/分钟，测试小鼠从滚筒开始旋转到离开滚筒的时间作为小鼠 运动潜伏期，测试时间为60秒。每只小鼠测3次取平均值，通过Mann - Whitney U-test进行统计学的显著性分析。2.2高效液相-电化学法(HPLC-EC)分析使用高效液相电化学检测仪测定纹状体内DA以及其代谢产物DOPAC禾口 HVA的含量。样品预处理将小鼠脱颈处死，取小鼠双侧纹状体加入IOO Ul溶液A(0.4MHC104)冰浴超声匀浆处理，4'C静置1个小时，注意避光保存。然后 离心15分钟(15,000 X g， 4°C)，取上清加入40 ul溶液B (20 mM柠檬 酸钠，300 mMK2HP04和2 mM Na2EDTA)，充分混匀后4。C静置1个小时，条件 同上。再离心15分钟(15,000 X g， 4°C)，得到样品上清，-8(TC存放备 用。样品测定将上清过滤(孔径0.22 um)后，取15 ul上样。其中流 动相配制如下取柠檬酸IO. 5073 g，乙酸钠5. 7400 g，歸DTA 0. 3723 g， SOS 0.2576 g， NaCl 0. 5851g定容至1 L，过滤，然后按照175: 10加入 乙腈，脱气处理。流速控制为l.O ml/min。电化学检测器工作压O. 7 v，测 定温度37'C。标准品在浓度和峰面积间有良好的线性关系r > 0.99。多巴胺 及其代谢物的含量用ng/mg湿组织重表示。2. 3 Western blotting实验样品预处理将小鼠断头处死，在冰浴培养皿内迅速分离黑质和纹状体， 置于Eppendorf管内迅速称重，于-80。C冰箱存放。加入匀浆缓冲液(lg: 5ml) 冰浴制备匀浆，匀浆缓冲液为80 mM Tris-H本文档来自技高网...

【技术保护点】
松果菊苷在制备治疗帕金森病药物中的应用。

【技术特征摘要】
1. 松果菊苷在制备治疗帕金森病药物中的应用。2、 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所说的治疗帕金森病是指 对多巴胺能神经元的损伤具有保护作用。3、 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所说的治疗抗帕金森病是 指保护黑质和纹状体部位的多巴胺能神经元的损伤。4、 根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：屠鹏飞，蒲小平，姜勇，
申请(专利权)人：北京华医神农医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]