轻度骨关节炎生物标志物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及新生物标志物的鉴定和选择以及新生物标志物组合的鉴定和选择，与未患骨关节炎的个体相比，所述新生物标志物和新生物标志物组合在患轻度骨关节炎的个体中差异表达。与本发明专利技术生物标志物的产物特异性和／或选择性杂交的多核苷酸和蛋白质也包括在本发明专利技术的范围内，还包括用于诊断轻度骨关节炎的含有所述多核苷酸和蛋白质的试剂盒。本发明专利技术还包括多核苷酸和蛋白质用于监测个体中疾病消退和监测治疗方案的效力的用途，所述多核苷酸和蛋白质与本发明专利技术生物标志物的产物特异性和／或选择性杂交。本发明专利技术还提供了本发明专利技术生物标志物的产物用于鉴定骨关节炎中新治疗靶标的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新轻度OA生物标志物的鉴定和选择以及新生物标志 物组合的鉴定和选择，与未患骨关节炎的个体相比，所述新生物标志 物和新生物标志物组合在患轻度骨关节炎的个体中差异表达。测量本 专利技术生物标志物和组合生物标志物产物的表达在OA疾病早期患者的 诊断中展示出特别的优点。应该理解，为了测量本专利技术生物标志物的 产物，与本专利技术生物标志物的产物特异性和/或选择性杂交/结合的多 核苷酸和蛋白质也包括在本专利技术的范围内，还包括含有所述多核苷酸 和蛋白质、用于诊断个体患有轻度骨关节炎(OA， osteoarthritis)的 试剂盒。本专利技术还提供在鉴定结合本专利技术生物标志物基因和/或调节其 活性的化合物中使用本专利技术生物标志物产物的方法。通过这些方法鉴 定的化合物可用于开发研究骨关节炎和骨关节炎进程的分析技术。此 外，通过这些方法鉴定的化合物还可用作开发预防和治疗组合物的先 导化合物，所述组合物用于预防、治疗、控制和/或改善骨关节炎或其2.
技术介绍
骨关节炎(OA)是关节软骨随时间逐渐退化的慢性疾病，所述关 节软骨覆盖在骨末端，形成关节的关节面。据信有许多因素使患者易 患骨关节炎，包括遗传易感性、肥胖症、意外或运动创伤、手术、药 物和重体力需求。骨关节炎,皮认为是从关节软骨的损伤开始的。最普 遍的两种对关节的损伤是运动相关损伤和长期"反复使用"关节损伤。 最经常受骨关节炎影响的关节是膝、髋和手。在多数情况下，由于膝 和髋必要的承重功能，这些关节中的骨关节炎比手骨关节炎更易导致残疾。随着软骨退化的; ^艮，关节中和关节周围的其他组织(包括骨、 肌肉、韧带、半月板和滑膜)中发生次级变化。软骨组织初级衰竭和 其他组织次级损伤的净效应是患者发生疼痛、肿胀、虚弱和患病关节 丧失机能。这些症状经常t艮到具有严重影响的程度，即，使患者丧 失劳动力和/或生活质量的后果。关节软骨主要由软骨细胞、II型胶原、蛋白聚糖和水组成。关节 软骨没有血或神经分布，软骨细胞是该组织中仅有的细胞类型。软骨 细胞负责制造形成软骨基质的II型胶原和蛋白聚糖。其后该基质又具 有允许用水^^质饱和的物理化学特性。这种结构-功能关系的净效应 是关节软骨具有特殊的耐磨特征，并且关节软骨面之间发生几乎无摩 擦的移动。在未患骨关节炎时，关节软骨经常在甚至高需求的身体条 件下提供终生的无痛承重和无限制的关节移动。与所有的活组织一样，关节软骨持续地经历更新过程，其中去除 (分解代谢活性)"老"细胞和基质组分并产生(合成代谢活性)"新" 细胞和分子。相对于多数组织，关节软骨的合成代谢/分解代谢周转率 较低。成熟软骨结构完整性的长期维持依赖于基质合成和降解之间适 当的平衡。软骨细胞通过应答于来自其环境中的化学和机械刺激维持 基质平衡。软骨细胞对这些刺激合适并有效的应答是软骨动态平衡所 必需的。通过合成代谢活性不足或分解代谢活性过剩破坏动态平衡可 引起软骨降解和骨关节炎(Adams等，1995, Nature 377 Suppl:3-174 )。 多数受到损伤和分解代谢活性提高的组织能够启动增强的合成代谢应 答，允许组织复原。不幸的是，关节软骨应答于软骨基质损伤或消耗 而上调其合成代谢活性以及提高合成蛋白聚糖和II型胶原的能力非 常有限。目前没有已知的医学治疗能逆转这种软骨损伤的效应。所有目前 的骨关节炎疗法都是针对治疗其症状。此外，由于骨关节炎隐匿式发生并且^^^慢，因此骨关节炎经常在疾病t良的晚期才得到鉴定，而不是潜在治疗可能更有效的疾病U早期。因此预防、改变或治疗 骨关节炎疾病过程中的进一步^^严重依赖于鉴定疾病的早期诊断标 志物，从而允许早期干涉。"轻度骨关节炎"目前非常难于诊断。医师主务农赖患者的病史和身体检查来进行骨关节炎的诊断，x光不显示特定关节的早期改变。 目前没有公认的生化标志物可用于证实轻度骨关节炎的诊断。症状如 发作性关节痛是早期骨关节炎的普^现。在发作时关节疼痛，疼痛 可持续几天至几周并自发緩解。然而这些症状经常不与软骨损伤的病 理阶段良好相关。"轻度"骨关节炎更可靠的度量可通过测定关节损伤 的程度来获得，然而目前没有测量相对非侵袭性的关节衰退的方法。3.
技术实现思路
本专利技术涉及新轻度OA生物标志物的鉴定和选择、新轻度OA生 物标志物组合的鉴定和选择以及选择新生物标志物组合的方法，与未 患OA的个体相比，所述新轻度OA生物标志物和新轻度OA生物标 志物组合在患轻度骨关节炎的个体中差异表达。测量本专利技术生物标志 物或生物标志物组合的产物的表达在诊断个体为患轻度OA中展示出 特定的优势。应该理解，为了测量本专利技术生物标志物产物的表达，与 本专利技术生物标志物及其衍生物的产物特异性和/或选择性杂交/结合的 多核普酸和蛋白质也包括在本专利技术的范围内，还包括用于诊断个体为 患有轻度OA的含有所述多核苷酸和蛋白质的试剂盒。本专利技术还包括 与本专利技术生物标志物的产物特异性和/或选择性杂交的多核苷酸和蛋 白质用于监测个体中疾病t艮和监测治疗方案的效力的用途。本专利技术 还提供鉴定在骨关节炎新治疗靶标的鉴定中使用本专利技术生物标志物的 产物的方法。本专利技术还提供在与本专利技术基因结合和/或调节其活性的化 合物的鉴定中使用本专利技术生物标志物产物的方法。通过这些方法鉴定 的化合物可用于开发研究骨关节炎和骨关节炎发展的测定技术。此外， 通过这些方法鉴定的化合物可在本专利技术预防和治疗组合物的开发中用作先导化合物，所述组合物用于预防、治疗、控制和/或改善骨关节炎 或其症状。本专利技术包括含有至少两种分离多核苷酸的组合物，其中每种分离 的多核苷酸与生物标志物选择性杂交，所述生物标志物选自表l或表4列出的生物标志物，并且其中组合物允许测量至少两种所述生物标 志物的表达水平。分离的多核苷酸可以是单链或双链RNA或DNA。本专利技术还包括含有至少两种分离的多核苷酸的组合物，其中每种 分离的多核普酸与生物标志物的RNA产物和/或RNA产物的互补多 核苷酸序列选择性杂交，所述生物标志物选自表1或表4列出的生物 标志物，并且其中组合物允许测量至少两种所述生物标志物的RNA 表达水平。本专利技术的特征还在于包含两种或更多分离多核苷酸集合的组合 物，其中每种分离的多核苷酸与表3或表5中列出的RNA序列和/或 该RNA序列的互补多核苦酸序列选择性杂交。本专利技术还包括包含至少两种表6和/或表8中列出的生物标志物特 异性引物的组合物。本专利技术还包括包含至少两种表8中列出的多核苷 酸探针的组合物。本专利技术还包括包含两种或更多分离蛋白质集合的组合物，其中每 种分离的蛋白质与生物标志物的蛋白质产物选择性结合，所述生物标 志物选自表1或表4中列出的生物标志物，并且其中所述组合物用于 测量至少两种所述生物标志物的表达水平。表7中列出了本专利技术范围 内的分离蛋白质的实例。分离的蛋白质可以是配体，其中所述配体包括抗体及其片段。单 克隆抗体和多克隆抗体均在本专利技术范围内。包含至少两种抗体的组合物也涵盖在本专利技术的范围内，其中每种抗体与生物标志物的蛋白质产物选择性结合，所述生物标志物选自表l或表4中列出的生物标志物，并且其中所述组合物允许测量至少两 种所述生物标志物的表达水平。表7列出了本专利技术包括的抗体实例。抗体可包括单克隆抗体和多克隆抗体。本专利技术还涉及诊断或检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含至少两种分离多核苷酸的组合物，其中每种分离多核苷酸与选自表１或表４所列出生物标志物的生物标志物选择性杂交，且其中所述组合物允许测量所述生物标志物中至少两种的表达水平。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宗正，张宏伟，亚当登普西，托马斯耶格尔，承恩，
申请(专利权)人：基因信息公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]