检测粪便中ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达水平的方法和内参基因的选择方法技术

本发明专利技术公开了一种检测粪便中ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达水平的方法，该方法主要包括以下步骤：将收集的粪便标本用粪便抽提试剂盒进行提取，用ＮａｎｏＤｒｏｐ鉴定ＲＮＡ的浓度；逆转录生成ｃＤＮＡ，通过Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＲＴ－ＰＣＲ检测目的ｍｉｃｒｏＲＮＡ的表达；通过Ｒｅａｌ　Ｔｉｍｅ　ＰＣＲ得到各个ｍｉｃｒｏＲＮＡ的ＣＴ值，再通过－ΔΔＣｔ方法计算各ｍｉｃｒｏＲＮＡ的表达丰度，选取内参基因。本发明专利技术还提供了一种用于检测胰腺癌的内参基因的选择方法。本发明专利技术提供的检测方法结果可靠，稳定性好。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测粪便中ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达水平的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：（１）将收集的粪便标本用粪便抽提试剂盒进行提取，提取后用ＮａｎｏＤｒｏｐ鉴定ＲＮＡ的浓度；（２）将鉴定好的ＲＮＡ进行逆转录生成ｃＤＮＡ，通过Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＲＴ－ＰＣＲ检测目的ｍｉｃｒｏＲＮＡ的表达；（３）得到各个ｍｉｃｒｏＲＮＡ的ＣＴ值，再通过－ΔΔＣｔ方法计算各ｍｉｃｒｏＲＮＡ的表达丰度，计算公式为－ΔΔＣｔ＝－｛（Ｓａｍｐｌｅ　Ｃｔｔａｒｇｅｔ－Ｓａｍｐｌｅ　ＣｔｍｉＲ－１６）－（Ｃｏｎｔｒｏｌ　Ｃｔｔａｒｇｅｔ－ＣｏｎｔｒｏｌＣｔｍｉＲ－１６）｝；（４）选取合适的内参基因，挑选出目的差异基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李兆申，任艳，高军，王小玮，刘建强，顾骏俊，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[]