人工合成Ｂｔ抗虫基因Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抗虫基因Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ及其编码蛋白，该基因是在保持原始苏云金芽胞杆菌Ｂｔ蛋白Ｃｒｙ１Ａｂ部分氨基酸序列不变的前提下，使用植物偏爱性密码子，减少了原始ＤＮＡ序列中的富含ＡＴ序列和存在的反向重复序列以及不明确的真核ＤＮＡ序列内含子序列，通过人工改造合成新的Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ基因序列，然后对该基因进行原核表达载体和植物表达载体的构建，并进行相应宿主细胞的转化。体外实验证明改造合成的Ｂｔ毒蛋白对玉米螟有显著的杀虫效果，本发明专利技术的抗虫基因Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ及其表达的目的蛋白能够在玉米中稳定高效表达，进而用于培育转Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ基因抗虫玉米。该人工改造合成Ｂｔ抗虫基因Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ也可以在提高其它农作物、果树或蔬菜等抗虫性中的得到应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程和生物防治领域，具体涉及一种人工合成Bt抗虫基因 及其应用。
技术介绍
玉米既是重要的粮食作物，又是重要的饲料和工业原料，当前玉米虫害(以玉 米螟为主)严重，造成玉米大量减产，因此采取有效措施控制其危害对提高玉米产量、 增加农民收入具有重要的意义。由于缺乏合适的抗虫品种，目前解决虫害的主要方法是 在生长过程中喷施化学杀虫剂；但是化学杀虫剂同时杀死害虫及其天敌，造成生态不平 衡和环境污染。通过转基因技术可以将Bt抗虫基因导入玉米品种中，进而提高转基因玉 米的抗虫性，降低农药的使用量，节省人力、物力及社会资源。Bt基因编码杀虫晶体蛋白，来自苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringHmsis、，为革兰氏阳性土壤杆菌。它在芽孢形成过程中产生称为S-内毒素的杀虫伴胞晶体蛋白 (控制合成这种蛋白质的基因在质粒上)，这些蛋白具有很高的杀虫活性。其作用原理为 这种抗虫蛋白能被碱性肠液溶解，水解为更小的活性毒素片段——核心片段QHofte and Whiteley^m。活性片段能抗蛋白酶的进一步水解，被激活的蛋白质结合在昆虫肠道 上的刷状小泡上，引起穿孔从而影响渗透平衡本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人工合成抗虫基因Ｃｒｙ１Ａｂ－ｔ，其核苷酸序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：岳润清，铁双贵，王延召，朱卫红，齐建双，柏松，孙静，卢彩霞，
申请(专利权)人：河南省农业科学院，
类型：发明
国别省市：41