【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药及生物领域，关于柳叶腊梅的有效成分的提取方法，具体涉及 一种利用高速逆流色谱从柳叶腊梅中提取并分离香豆素类化合物的方法。
技术介绍
畲药是我国民族特色药物之一，在畲族中有着悠久的应用历史。浙南地区畲 族百姓主要用于治疗伤食所致的痞满证和慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡引起的胃胀、胃 痛、泛酸等。柳叶腊梅鲜叶可按茶叶炒青工艺制成茶冲泡饮用，也可炼制挥发油制成片 剂、滴丸，用于镇咳、平喘、防治感冒和流行性感冒。柳叶腊梅具有抗菌、消炎、抗病 毒，增强肌体免疫力等功能，无毒副作用，其市场及经济效益前景非常看好。香豆素类化合物在医药方面的应用是广泛认可的，特别是6，7-二甲氧基香豆 素(如式1所示)，又称滨蒿内酯、二甲氧香豆素、七叶内酯二甲醚、蒿属香豆精和东喘 宁，具有显著的降压作用及利胆、抗炎、镇痛、降血脂、平喘、抗凝等作用。临床上主 要用于治疗心绞痛、心律失常、支气管哮喘等疾病。och31 2然而目前国内外对柳叶腊梅的化学成分研究甚少，更未见关于上述化合物的同 时分离的报道。一般柱分离等传统的分离方法不仅耗时，费力，而且高污染，高成本， 尚风险。专利技术内...
【技术保护点】
一种应用高速逆流色谱分离香豆素类化合物的方法，其特征在于所述的方法为：取柳叶腊梅的初提物为原料，以高速逆流色谱法分离提取，取体积比为０．１～２：１．２：０．５～１．５：１．２的正庚烷、乙酸乙酯、甲醇、水组成高速逆流溶剂体系，混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为流动相，下相为固定相，超声脱气，取柳叶腊梅的初提物，溶于下相中作为供试品，所述柳叶腊梅的初提物与下相的质量体积比为１ｇ∶２０～８０ ｍｌ；将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，在５００～１０００ｒ／ｍｉｎ转速下，以０．１～３ｍｌ／ｍｉｎ的流速注入流动相，以波长６０～４００ｎｍ的紫外检测器检...
【技术特征摘要】
1.一种应用高速逆流色谱分离香豆素类化合物的方法，其特征在于所述的方法为 取柳叶腊梅的初提物为原料，以高速逆流色谱法分离提取，取体积比为0.1 2: 1.2 0.5 1.5: 1.2的正庚烷、乙酸乙酯、甲醇、水组成高速逆流溶剂体系，混合充分后静 置，按上下两相分开，取上相为流动相，下相为固定相，超声脱气，取柳叶腊梅的初提 物，溶于下相中作为供试品，所述柳叶腊梅的初提物与下相的质量体积比为lg:20 80 ml；将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，在500 1000r/min转速下，以0.1 3ml/min的流速注入流动相，以波长60 400nm的紫外检测 器检测，当明显有流动相流出时，开始取供试品作为样品溶液进样，同时开始用自动部 分收集器收集流出液，将收集得到的流出液用高效液相色谱进行检测，将与6，7-二甲 氧基香豆素标准品保留时间相同且6，7- 二甲氧基香豆素纯度大于98%的洗脱液合并， 用旋转蒸发仪回收溶剂，得到6，7-二甲氧基香豆素；所述的柳叶腊梅的初提物为弱极性溶剂的超声提取物的干燥物，所述所极性溶剂为 水、甲醇、乙醇或者乙酸乙酯中的一种或两种以上的混合，所述的样品溶液中含有的柳 叶腊梅初提物的质量与高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱的体积比为0.1 0.5 350g/ ml ο2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述收集得到的流出液用高效液相色谱进行 检测，将与6，7，8-三甲氧基香豆素标准品保留时间相同且6，7，8-三甲氧基香豆素纯 度大于98%的洗脱液合并，用旋转蒸发仪回收溶剂，得到6，7，8-三甲氧基香豆素。3.如权利要求1或2所述的高速逆流色谱分离香豆素类化合物的方法，其特征在于所 述的方法包括如下步骤(1)过20目筛的柳叶腊梅枝干粉末加入弱极性溶剂中，在频率20 300kHz超声作 用下提取0.5 2小时，然后过滤，取滤液浓缩至质量无变化，干燥得到柳叶腊梅初提物， 所述弱极性溶剂为水、甲醇、乙醇或者乙酸乙酯中的一种或两种...
【专利技术属性】
技术研发人员：王鸿，杨春，应国清，易喻，梅建凤，程文亮，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：86
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