【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种蛇毒蛋白的提取工艺,具体涉及一种蛇毒蛋白分离纯化出具有酪 蛋白水解活性的蛋白酶。
技术介绍
现有蛇毒蛋白提取中化学成份复杂,具有其他蛋白质和多肽的混合物,做为进一 步研究有局限。本专利技术提取出具有酪蛋白水解物活性的物质,使分子量在50000的蛋白质 组分得到最多。
技术实现思路
本专利技术目的是针对现有蛇毒蛋白提取的存在的不足,提供一种简单有效的方法, 使从蛇毒分离提取出一种具酪蛋白水解物活性蛋白,本专利技术目的是这样实现的一)制取粗毒,(二)应用DEAE-S^hadex A-50,用含NaCl的缓冲液进行梯度洗脱,分离蛇毒; DEAF-SephadEx A-50,Sephadex G-75,Pharmacia 产品,三羟甲基氨基甲烷(Tris), *,丙 烯酞胺和十二烷基硫酸钠(SDS)系,Ampboline系瑞典LKB公司产品,酪蛋白系中国医药公 司产品,SDS-N烯酞胺凝胶电泳测蛋白质分子量所用的标准蛋白为瑞典LKB公司产品(19, 300-71,500),牛血清白蛋白(电泳纯)系中国科学院生物物理所生化厂生产,均为电泳 纯。。,用含NaCl的Tris-Hpl-7缓冲液进行直绛梯度洗脱,分离蝮蛇蛇毒。3g粗毒溶于15ml。· lmol/L,PH7. 5的缓冲液中,于IOOOOrpm冷冻离心110分钟, 取上清液上样,柱层析纯化3,1.柱层析。(三)将分离出的粗毒用PH7.5的Tris-HCl缓冲液中于IOOOOOrpm冷冻离心,取得上清液。(四)上述上清液用kphadexG-75柱层析,在吸光度为240nm,收集蛋白峰,经超 滤浓缩 ...
【技术保护点】
一种蛇毒蛋白的提取方法,其特征在于,包含:从腹蛇蛇毒中分离纯化出具有酪蛋白水解活性的蛋白酶。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:张新鼎,
申请(专利权)人:上海优博生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]
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