口服给药的重组人α干扰素组合物制造技术

本发明专利技术提供了由作为生物学活性成分的重组人α干扰素和小牛胸腺素Ｆ５，和选自人血清白蛋白、牛血清白蛋白与β环糊精的一种或多种稳定剂，以及一种或多种药学上常用的其他适当添加剂组成的经口含服给药的组合物。该组合物用于治疗病毒感染性疾病时，基于干扰素与胸腺素的协同作用，其临床效果明显优于单纯以天然干扰素为活性成分的口服制剂。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及经口给药的含有重组人α干扰素(rhα-IFN)的药物组合物，其制备方法及在预防和治疗病毒感染性疾病中的应用。干扰素是一组可诱导的脊椎动物糖蛋白和蛋白质，已经知道其具有抗病毒、抗恶性增殖及免疫调节活性。根据抗原特异性和分子结构，干扰素可分为三种类型α或白细胞干扰素、β或成纤维细胞干扰素及γ或免疫干扰素。α和β干扰素通常是酸稳定性的并相当于以前所说的I型干扰素。γ干扰素通常是酸不稳定的并相当于以前所说的II型干扰素。人α干扰素是天然存在的包括α1干扰素和α2干扰素在内的至少七种成分的混合物。以重组技术生产的人α干扰素表现有与天然人白细胞干扰素相似的生物学活性。以重组DNA技术生产α1、α2a和α2b的方法是本领域技术人员已知的，并已在许多非专利和专利文献中公开(如参见Rubenstein，Biochem.Biophys.Acta，695，5-16(1982)；美专利专利No.4,289,690和美国专利NO,4,503,035等)。已有许多报导描述了于扰素的体外活性，或其在肌肉内、皮内给药后的体内作用，并且美国食品与药品管理局(FDA)已批准了经胃肠道外途经使用高剂量α干扰素治疗人发细胞白血病。然而，大剂量使用天然或重组来源的干扰素可能出现一些付作用，并且尚须花费很高的医疗费用。美国专利No.4,462,985首先公开了经口服给药，使用低剂量干扰素刺激动物食欲及提高疫苗效力的方法。美国专利No.5,017,371公开了经病人口或咽粘膜给药，使用低剂量干扰素减小肿瘤化疗或放疗付作用的方法。另外，Caban J.等人(Arch.Lmmunol.Ther.Exp.Warsz.1993，41(3-4)229-35)报导了经口使用低剂量天然人α干扰素治疗慢性乙型肝炎的临床观察结果。关于经口腔粘膜使用(含服)干扰素的治疗机理，最近有人认为当干扰素与口腔粘膜接触时，可进入淋巴循环系统，直接激活人免疫系统，从而减少了药物用量并提高其治疗效果(Sheree E.C.and Michael S.R.，J.Pharm.Pharmacol.(1993)45606-609).本专利技术的目的是提供一种经口给药的抗病毒组合物，特征在于该组合物由具有协同作用的重组人α干扰素和胸腺素，一种或多种稳定剂，以及药学上已知的其他适当添加剂组成。本专利技术的另一个目的是本专利技术的抗病毒组合物在治疗病毒感染性疾病中的应用。根据本专利技术的组合物，其中所说的重组人α干扰素是杂合α干扰素，包括以重组技术制得的α1干扰素、α2a干扰素和α2b干扰素的混合物。根据本专利技术的组合物，其中所说的胸腺素是从小牛胸腺组织中提取的胸腺素F5。根据本专利技术的组合物，其中所说的作为生物学活性成分的干扰素和胸腺素在每个剂量单位中的含量分别为100-500国际单位(UI)和1-20μg。所说的α干扰素的纯度一般在10％以上，较好在50％以上。根据本专利技术的组合物，其中所说的稳定剂是选自人血清白蛋白、牛血清白蛋白、聚乙二醇400-1000，β环糊精、乳糖、甘露糖醇及葡聚糖中的任何一种或多种。根据本专利技术的组合物，经口腔内含服的给药途径用于治疗病毒性疾病，例如流感病毒、肝炎病毒、EB病毒、带状疱疹病毒，HIV病毒等的感染。作为本专利技术组合物的基本活性成分，α干扰素可用本领域中已知的和文献中已公开的任何一种DNA重组方法生产，但也可以使用从人白细胞分离并纯化的天然人α干扰素。胸腺素是从牛的胸腺分离并纯化的一种分子量在2000-15000之间的多肽物质。可按照Goldstein A.L.等人(Cur-rent status of thymosin and other hormone of thymus gland，Re-cent Progress in Hormone Research，Vol 37，1981)所述的方法制备。已经证明部分纯化的胸腺制剂及纯化的胸腺多肽具有调节和增强免疫功能的作用，可诱导T细胞分化为杀伤细胞、辅助细胞及抑制细胞。临床上，已将胸腺素用于自家免疫病、肿瘤及病毒性疾病的治疗。我们按上述比例联合使用干扰素和胸腺素经口含服给药时，发现两者间在对抗病毒感染上具有显著的协同作用。使用流感病毒在小鼠中进行的初步实验结果表明，与单独使用α干扰素相比，合用α干扰素和胸腺素可显著地提高抗病毒效果。用于本专利技术组合物的稳定剂可以是选自人血清白蛋白、牛血清白蛋白、聚乙醇400～1000、β环糊精、乳糖、甘露糖醇及葡聚糖中的一种或多种稳定剂，但其中优选的人血清白蛋白。使用人血清白蛋白作为蛋白质或多肽活性组分的保护剂或稳定剂是本领域技术人员已知的。在本专利技术的组合物中，人血清白蛋白的含量一般为每剂量单位含20-50μg。用于本专利技术组合物中的其他添加剂可以包括例如蔗糖、葡萄糖、乳糖等稀释剂；淀粉、环糊精、羧甲基纤维素等粘合剂；硬脂酸、硬脂酸镁等润滑剂。考虑到便于本专利技术的组合物经口含服给药，最好将该组合物制成片剂。为此，可使用制药领域中已知的制备口服片剂的方法制备本专利技术组合物的口服含片。首先将17％(重量/体积，下同)的含水淀粉浆和糖类添加剂(保护剂)按前述比例搅拌混合均匀，用10-20目筛网过筛后置于约50℃烘箱中干燥。待干粉末冷却后，用喷雾装置将适当量(如上文所述)的重组体α干扰素和稳定剂人血清白蛋白的溶液喷洒到上述颗粒混合物中，同时用搅拌器不停地搅拌至均匀。然后再加入适当润滑剂，并根据需要加入适当量其他的适当添加剂(如调味剂、抗氧化剂等)，再次搅拌并充分混合。混合完毕后，将所得混合物在低于30℃的温度下风干，干燥时间一般不超过2小时。干燥后的混合物颗粒再次过10-20目筛，并用压片机压制成片剂。本领域技术人员可以理解到，本专利技术的组合物可以按上述方法制成片剂外，也可以根据临床需要和给药途径的不同按已知方法将本专利技术的组合物制成溶液剂、点眼剂、栓剂、乳化剂等不同的剂型。本专利技术的组合物在制成片剂的情况下，一般每片含α干扰素约100-500UI，含胸腺素1-20μg。稳定剂的含量一般应等于或稍大于活性成分α干扰素和胸腺素的含量。对其他添加剂的用量没有严格限制，一般可在常规片剂药物添加剂的用量范围内适当选择。本专利技术的组合物一般可经多种途径给药，但最好是制成片剂经口含服给药。给药剂量一般为每天每公斤体重约0.5-10UI，最好每天每公斤体重1-5UI。我们使用预先接种流感病毒的体重为17-19克的雄性小鼠为动物模型，以不给药物的动物作为对照组(每组10只小鼠)，用本专利技术组合物的稀释液与单独使用相同剂量α干扰素动物进行比较实验，结果表明干扰素经口服给药具有明显的病毒抑制活性，特别是观察到在相同条件下联合使用干扰素和胸腺素时，病毒抑制活性提高约10-20％。以常规细胞病变抑制法进行的稳定性实验的初步结果显示，本专利技术的组合物在4-l0℃环境下放置6个月未见明显的活性丧失。另外，我们使用健康小鼠进行急性毒性试验，经胃肠道给药相当于每天每公斤体重3×104IU干扰素，同时经皮下注射给药相当于每天每公斤体重1.25×105IU干扰素，连续观察10天，结果未观察到任何可检测的毒付作用。实施例1为制备1×104片本专利技术组合物的含片，将乳糖0.97kg、β环糊精0.38kg和17％淀粉浆0.2kg放在本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗病毒组合物，特征在于该组合物由作为生物学活性成分的重组人α干扰素和胸腺素、一种或多种稳定剂及药学上已知的其他适当添加剂组成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：董义兰，程晓耕，林余欣，王轶文，刘振浩，段利，
申请(专利权)人：卫生部长春生物制品研究所，北京国生医药开发中心，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]