组织因子拮抗剂及其使用方法技术

本发明专利技术包括组织因子（ＴＦ）阻断化合物，以及利用或包括一种或多种该化合物的治疗方法和药物组合物。本发明专利技术化合物可特别用于治疗及预防不良性的血栓形成。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药学活性化合物以及含有该化合物的药物组合物及治疗方法。本专利技术优选的化合物可用以治疗或预防不良性血栓形成。本专利技术具有广泛的应用范围，包括其用于筛选治疗或预防血栓形成的候选化合物的用途。组织因子(TF)为263个氨基酸组成的完整膜蛋白，负责激活凝血蛋白酶级联反应。血管损伤会使血液暴露于表现于皮下细胞表面上的组织因子，导致与血浆因子VII(FVII)或活化的因子VII(FVIIa)形成钙依赖性的高亲和性的复合体。与TF的结合促使酶原FVII被数种蛋白酶(如因子Xa或凝血酶)迅速地蛋白质水解为活性丝氨酸蛋白酶FVIIa。TF作为FVIIa的必需辅因子而大幅提升FVIIa对其蛋白质底物因子IX及X的催化效率。TF/VIIa复合体通过有限的蛋白质水解而活化因子IX(FIX)及X(FX)，最后导致凝血酶产生及纤维蛋白分解。在疾病状态下，例如动脉粥状硬化或微血管移植、血管造形术、部署植入装置(例如移植模、导管或动静脉分流器)或动脉内切开术的类侵入性外科程序后，TF引起的凝血可能引发血栓形成障碍而导致诸如心脏病发作、中风、不稳定性心绞痛、移植片衰竭或其它冠状动脉疾病。血栓形成同时亦可能并发各种血栓栓塞障碍及凝塞，分别例如肺栓塞(例如心房纤维颤动及栓塞、深度静脉血栓形成等)及播散性血管内凝血。体液操作亦可能引起不良性血栓，特别是在输血或体液抽样及涉及体外循环(例如心肺迂回补助外科手术)及透析过程中。有些抗凝血剂被用以减轻或避免与血栓形成有关的血凝块。给予适当的抗凝血剂或其混合物常可降低或去除凝血，它包含使用一种或多种香豆素衍生物(例如华法令(warfin)及二香豆醇)或带电聚合物(例如肝磷脂、水蛭素或水蛭素类(hirulog))(参考例如上述的Gilman等人，R.J.Beigering等人，血液学年报，72177(1996)；J.D.Willerson，循环，94866(1996))。有些具有抗血小板活性的抗体亦可用以减轻各种血栓形成。例如一种治疗抗体ReoProTM即常用以减轻各种由血管造形术、心肌梗塞、不稳定性心绞痛及冠状动脉狭窄症所引起的血栓栓塞障碍。此外，ReoProTM可作为降低心肌梗塞及心绞痛危险性的预防剂(J.T.Willerson，循环，94866(1996)；M.L.Simmons等人，循环，89596(1994))。然而，使用先前的抗凝剂经常会并发一些副作用例如出血、血栓形成复发、「白血块」症候群、过敏、新生儿缺陷、血小板减少及肝功能障碍。特别是长期给予抗凝剂可能提高患致命性疾病的危险性(参考例如上述的Gilman等人)。蛋白质性药剂在本质上较为安全，但一般限于用在急性症状的处理上，且给药常限于非肠道用药。此类药剂一般认为较不适合于慢性疾病(例如动脉粥状硬化，即心脏病发作的主因)的长期治疗，由于蛋白质治疗可以增加免疫反应产生机率，其生产成本较高及/或有限的口服生物有效性。因此亟需新式抗凝血药剂。特别是需要可长期给药以治疗慢性症状如动脉粥状硬化的新式抗凝血药剂。本专利技术更特别的方法包括给予治疗上有效量的至少一种本专利技术的化合物或组合物。本专利技术化合物或组合物典型是给予需要此种治疗的哺乳类动物，例如易患不良性血栓形成、已患该病或正从该病复原的人类患者，或已患由组织因子导致的疾病或障碍(例如心血管疾病、细胞增殖障碍、手术后并发症或免疫功能障碍)、由该病复原或对易患该病的哺乳类动物。优选化合物或组合物亦可用于治疗或预防各种血栓形成所导致的公知障碍，例如公开于此的特别的障碍。本专利技术亦包含一种可阻断或抑制因子X及/或IX的组织因子依赖性活化作用的方法。该方法一般包含以TF阻断化合物与组织因子接触，从而抑制因子X或因子IX与组织因子或TF/VIIa的功能性复合体的形成。优选TF阻断化合物与组织因子结合从而抑制该功能性复合体的形成。根据本专利技术的抑制或防止该功能性复合体的形成，其应用范围相当广泛，包括哺乳类动物的上述疾病或障碍的治疗，特别是已患该疾病或障碍或易患该病症的人类。在用于检测的至少一项测试中，本专利技术的化合物一般具有优良的阻断活性，优选的检测方法为测量TF介导的血液凝集。更特别的测试为测量特异凝血因子的标准体外分析，其中该分析是公认的在TF或TF相关复合体(如人类TF/VIIa复合体)存在下可提供最理想结果的分析。该分析中所提供的TF可为重组分子或由天然来源纯化的分子，一般取决于所选择的特异分析。更特别的体外分析是检测及测量特异凝血因子的活性，该凝血因子具有公认的在人类TF或人类TF/VIIa复合体存在下会增强的活性。较令人感兴趣的是测量因子X至Fxa和因子IX至FIXa的TF依赖性活化作用的标准体外分析。在此有时这些分析称为“初级筛选分析”，或相关术语或词组如“发现方法”，以意指它在筛选化合物分析中的优选用途。例如本专利技术的特别优选化合物在测量因子X至FXa的TF依赖性激活作用的初级筛选分析中具有优良的阻断活性。另外的优选化合物在测量因子IX至FIXa的TF依赖性激活作用的初级筛选分析中具有优良的阻断活性。需了解词组“优良的阻断活性”或相关词组意为优选使用本专利技术化合物以降低或抑制因子X至Fxa和/或因子IX至FIXa的凝血激活作用。优选化合物为合成或半合成化合物，如以下公开的小分子化合物。以下提供关于初级筛选分析的更特别公开。本专利技术优选的小分子化合物的IC50(相对于适当对照，抑制50％因子X活化作用所需浓度)约为100μM或更小，优选约10μM或更小。另外对TF或TF/VIIa依赖性激活作用，在分析中优选的化合物具有与其同等或大于约70％的抑制作用。在一个优选的实施方案中，初级筛选分析包含以下所有步骤1)在导致因子Xa形成的条件下将TF/VIIa复合体与因子X在适当分析溶液中混合，2)将该溶液与可经检测标识的因子Xa底物接触；及3)检测溶液中标识的产物，此即为因子X活化作用的指标。该初级筛选分析的优选用途是可有效地测量候选化合物降低或消除TF或TF/VIIa依赖性因子X活化作用的能力。该分析一般是有弹性的，且可根据需要修改，以测试化合物的阻断因子X活化作用的能力。例如可在上述任一或多个步骤中加入候选化合物，但对许多筛选应用来说在步骤1)中加入化合物是优选的。该方法中使用的优选TF/VIIa复合物包括暴露于利于较好的暴露的TF阻断位点状况的TF。用于TF的分离及使用的更特异的条件提供如下。如上所述，另一初级筛选分析为测量TF或TF/VIIa对因子IX的活化作用的标准体外分析。在此实施例中，优选化合物具有约200μM或更小，优选约10μM或更小的IC50(相对于适当对照，抑制50％因子IX活化作用所需浓度)。在一优选的实施方案中，测量因子IX活化作用的标准分析包含以下所有步骤1)在有利于因子FIXa形成的条件下将TF/VIIa复合体与因子IX在适当分析溶液中混合，2)将该溶液与可经检测标识的因子FIXa底物接触；及3)检测溶液中的标识产物，此即为因子IXa活化作用的指标。在优选的实施方案中，该筛选分析可有效地测量候选化合物的降低或消除因子IX活化作用的能力。该分析一般对TF或TF/VIIa依赖性FIXa形成作用敏感，可用于多种方面以测试所需化合物的阻断因子IX活化作用的能力。例如可在上述任一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗易患、已患由组织因子（ＴＦ）引起的疾病或正从该病恢复的哺乳动物的方法，该方法包括使用治疗上有效量的至少一种ＴＦ阻断化合物以治疗该病。

【技术特征摘要】
US 1999-10-27 60/161,8551.一种治疗易患、已患由组织因子(TF)引起的疾病或正从该病恢复的哺乳动物的方法，该方法包括使用治疗上有效量的至少一种TF阻断化合物以治疗该病。2.根据权利要求1所述的的方法，其中所述的疾病选自心血管疾病、凝血障碍、细胞增殖障碍、手术后并发症或免疫功能紊乱。3.一种阻断或抑制组织因子依赖性因子X及/或因子IX活化作用的方法，它包括将组织因子与TF阻断化合物接触，从而抑制因子X或因子IX与组织因子或TF/VIIa的活化或功能性的复合体的形成。4.根据权利要求3所述的的方法，其中所述的TF阻断化合物是与组织因子结合从而抑制功能性复合体的形成。5.根据权利要求1-4项的任一项所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物的IC50较在测量TF/VIIa依赖性因子X活化作用的标准分析中的IC50低约100μM。6.根据权利要求1-4项的任一项所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物的IC50较在测量TF/VIIa依赖性因子X活化作用的标准分析中的IC50低约200μM或更低。7.根据权利要求1-6项的任一项所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物包括一种选自羧基、硫酰胺基、亚磺酰基、磺酰基、亚硫酸根、酰胺基或硝基的取代基。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物进一步包括选择性取代的碳环芳基或选择性取代的杂芳基。9.根据权利要求7所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物进一步包括选择性取代的苯基。10.根据权利要求1-6项的任一项所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物具有下列任一如本文所定义的化学式的结构I、II、III、IIIa、IV、IVa、V、VI、VIa、VII、VIII、IX、IXa、IXb、IXc、IXd、X、XI、或XII。11.根据权利要求1-6项的任一项所述的方法，其中所述的组织因子阻断化合物为下列之一 Compound1Compound2Compound3 Compound4Compound5Compound6 Compound7Compound8 Compound9Compound10Compound11 Compound12Compound13Compound14 Compound15Compound16 Compound17Compound18Coumpound1912.一种如本发明所定义的化学式I、II、III、IIIa、IV、IVa、V、VI、VIa、VII、VIII、IX、IXa、IXb、IXc、IXd、X、XI、或XII任一化合物。13.根据权利要求12所述的化合物，其中所述的化合物的IC50较在测量TF/VIIa依赖性因子X活化作用的标准分析中低约100μM。14.根据权利要求12所述的化合物，其中所述的化合物的IC50较在...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦进安，LK露帕斯其，EL尼威斯，HC望，DP泰勒，
申请(专利权)人：苏诺尔分子公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]