利用纳米复合水凝胶制备固定化酶的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种利用纳米复合水凝胶制备固定化酶的方法及应用，本发明专利技术采用复合水凝胶固定化酶，通过电荷作用将负电荷的酶蛋白富集于带有正电纳米粒载体上，增加了物理作用力，并且通过原位聚合方法，形成三维网状结构，使羰基还原酶或脂肪酶固定在水凝胶内部，提高了固定化酶的孔隙体积、比表面积、平均孔隙尺寸和孔隙宽度，进而提高了酶的负载量，最大负载率为3422mg/g，解决了包埋法固定化酶易泄露的问题。本发明专利技术方法反应条件温和，提高了固定化酶的稳定性和催化活性。

【技术实现步骤摘要】

(一)本专利技术属于酶固定化，具体涉及一种利用纳米复合水凝胶制备固定化酶的方法及应用。

技术介绍

0、(二)
技术介绍

1、酶是参与生物生命活动的重要大分子，是参与人体内代谢过程和维持生理机能的天然催化剂。酶对作用底物具有良好的选择性和催化效率，酶的活性中心由三维结构肽链的折叠而形成，该结构对外界条件的变化会做出迅速响应。酶广泛应用于生物工程、食品、医药、化工、环保等领域。

2、醇类化合物是重要的医药中间体，常见的药物中间体包括脂肪族醇、芳香族醇、脂环醇、醚醇以及多羟基醇。酶催化已成为药物生成的重要技术，使用酶催化的方法可以绿色高效合成醇类医药中间体，包括他汀类药物(阿托伐他汀、瑞舒伐他汀、匹伐他汀)、替格瑞洛、阿瑞匹坦等。这些醇类医药中间体在药物合成和研发中发挥着重要作用，通过它们的合成或结合其他化合物可以赋予药物特定的功能，如提高生物活性、药物的稳定性和溶解度等。

3、采用游离细胞或者酶作为催化剂，往往存在稳定性较差、易变性失活等问题，而且，游离细胞或者酶通常只能使用一个批次，导致酶制剂占生成成本的比例较高。酶固定化，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种利用纳米复合水凝胶制备固定化酶的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)氯化钙、氯化镁分别溶解于双蒸水中混合配制成质量分数5％的水溶液；将氯化钙水溶液和氯化镁水溶液以体积比1:1混和。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)水凝胶预聚混合液中引发剂终浓度0.05～0.5M，单体终浓度0.1～1.0mM。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述酶液包括羰基还原酶纯酶液或脂肪酶纯酶液，所述纯酶液用量以蛋白含量计为1～6g/L。

5.如权利要求1所述的方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种利用纳米复合水凝胶制备固定化酶的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)氯化钙、氯化镁分别溶解于双蒸水中混合配制成质量分数5％的水溶液；将氯化钙水溶液和氯化镁水溶液以体积比1:1混和。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)水凝胶预聚混合液中引发剂终浓度0.05～0.5m，单体终浓度0.1～1.0mm。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述酶液包括羰基还原酶纯酶液或脂肪酶纯酶液，所述纯酶液用量以蛋白含量计为1～6g/l。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)过硫酸铵加入浓度以水凝胶预聚混合液体积计3～10mg/ml。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)，25℃、500rpm下交联45...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亚军，朱嘉琪，窦哲，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：