【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种同型半胱氨酸诊断/测定试剂(盒),同时本专利技术还涉及测定同型半胱氨酸浓度的方法,属于医学检验测定
技术介绍
测定血浆中同型半胱氨酸的方法有很多种,包括高效液相色谱法(HPLC)、氨基酸分析仪测定法、离子色谱法、酶联免疫分析法(EIA)、毛细管气相色谱-质谱,荧光偏振免疫分析(FPIA)、电化学法及酶法等等。1.高效液相色谱法(HPLC):是经典的参考方法,但其有操作比较复杂,试验耗时比较长,试验数据变异比较大的缺点,在临床应用方面逐渐被酶联免疫分析法、荧光偏振分析法和酶法所取代。高效液相色谱法是:先使用还原剂使血样中所有形式的同型半胱氨酸转变成还原形式,然后与荧光剂进行衍生生成同型半胱氨酸-荧光物质复合物,将衍生后的样品进行色谱分析。因色谱固定相对不同物质的吸附力不同,因此流动相将其洗脱下来的次序也不同,根据这一原理将样品中的不同物质分开,以荧光检测器检测洗脱下同型半胱氨酸-荧光物质复合物的荧光强度,将其与标准品/内标的比值进行比较和计算,就可以测定血总同型半胱氨酸的水平。2.酶联免疫分析法(EIA):是临床上测定同型半胱氨酸水平的常用方法,其特点是操作比较方便、快捷,重复性好,方法稳定可靠。缺点是大部分操作还是手工操作,比较耗时等。酶联免疫分析法其基本分析原理:先使用酶将血样中所有形式的同型半胱氨酸转变成S-腺苷-L-同型半胱氨酸,然后加入酶标的抗S-腺苷-L-同型半胱氨酸的单克隆或多克隆抗体,采用竞争结合的原理,将不同水平的标准品与酶标抗体竞争结合,然后以显色试剂和终止试剂分别进行显色和终止,制作出同型半胱氨酸浓度与发色 ...
【技术保护点】
一种酶比色法及酶联法技术的同型半胱氨酸浓度测定方法,其方法如下:2同型半胱氨酸+谷胱甘肽二硫谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶2谷胱甘肽+同型胱氨酸2谷胱甘肽+氧谷胱甘肽氧化酶谷胱甘肽二硫+过氧化氢过氧化氢+还原型色原体组合过氧化物酶吲嗒胺色原或醌亚胺色原+水将最终反应物置于可见光分析仪下,检测400-700nm处直接反映吲嗒胺色原或醌亚胺色原含量高低的光吸收程度,得出同型半胱氨酸浓度大小测定结果。
【技术特征摘要】
1.一种酶比色法及酶联法技术的同型半胱氨酸浓度测定方法,其方法如下:2同型半胱氨酸+谷胱甘肽二硫谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶 2谷胱甘肽+同型胱氨酸2谷胱甘肽+氧谷胱甘肽氧化酶谷胱甘肽二硫+过氧化氢过氧化氢+还原型色原体组合过氧化物酶吲嗒胺色原或 醌亚胺色原+水将最终反应物置于可见光分析仪下,检测400-700nm处直接反映吲嗒胺色原或醌亚胺色原含量高低的光吸收程度,得出同型半胱氨酸浓度大小测定结果。2.一种同型半胱氨酸诊断/测定试剂(盒),主要成分包括:缓冲液 20——500mmol/L稳定剂 1——4000mmol/L过氧化物酶 500——80000U/L谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶 1000——80000U/L谷胱甘肽氧化酶 1000——80000U/L谷胱甘肽二硫 1——50mmol/L还原型色原体组合 0.1——20mmol/L试剂成分的浓度不一定只限于上述范围;在此范围内效果较好,在此范围外,试剂仍会反应作用。其特征在于:试剂(盒)可以是干粉状态,在使用前加水溶解后使用;也可以配制成液体试剂,直接使用。3.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断/测定试剂(盒),其特征在于:由缓冲液、稳定剂、谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶、谷胱甘肽氧化酶、谷胱甘肽二硫、过氧化物酶、还原型色原体组合组成单剂试剂。4.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断/测定试剂(盒),其特征在于:由缓冲液、稳定剂、谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶、谷胱甘肽氧化酶、谷胱甘肽二硫、过氧化物酶、还原型色原体组合组成双剂试剂;试剂1,由缓冲液、稳定剂、谷胱甘肽二硫、还原型色原体组合组成;试剂2,由缓冲液、稳定剂、谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶、谷胱甘肽氧化酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成。过氧化物酶、还原型色原体组合、谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶、谷胱甘肽氧化酶、谷胱甘肽二硫在试剂1或试剂2中的位置可以不限。5.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断/测定试剂(盒),其特征在于:由缓冲液、稳定剂、谷胱甘肽同型胱氨酸转氢酶、谷胱甘肽氧化酶、谷胱甘肽二硫、过氧化物酶、还原型色原体组合组成多剂试剂;试...
【专利技术属性】
技术研发人员:王尔中,
申请(专利权)人:苏州艾杰生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:32[中国|江苏]
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