富硒红球藻粉的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种富硒红球藻粉的制备方法及应用，其步骤：Ａ、筛选无机硒耐受性强、硒蛋白和虾青素含量高、生长快速的雨生红球藻新品系；Ｂ、在一定温度、ｐＨ值、光照下，利用红球藻培养基进行培养；Ｃ、根据雨生红球藻品种对硒耐受性的不同，采用接种培养基中直接加无机硒或当藻细胞达到一定生物量后加入不同量的无机硒，配制高浓度含硒培养基或低浓度含硒培养基；Ｄ、藻细胞连续培养后，通过过滤或离心的方法采收，并用清水冲洗新鲜藻泥，洗去藻细胞表面的无机硒。烘干、喷雾干燥或冷冻干燥获得富硒雨生红球藻藻粉。制备的富硒雨生红球藻藻粉硒化合物含量介于１０－２０００μｇ／ｇ，有机硒含量达到９９％以上。富硒红球藻制品可在制备食品、保健食品和药品中应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种富硒红球藻粉的制备方法，其步骤是：Ａ、筛选硒耐受性强、硒蛋白和虾青素含量高、生长快速的雨生红球藻新品系：藻种在红球藻培养基中生长，利用理化诱变和分子生物学育种技术，筛选出对无机硒耐受性强、硒蛋白和虾青素含量高、生长快速的雨生红球藻新品系；（１）紫外线诱变为物理诱变剂之一，根据波长将紫外线分为ＵＶＡ、ＵＶＢ、ＵＶＣ三种，其波长分别为３２０－４００ｎｍ、２８０－３２０ｎｍ、１００－２８０ｎｍ，对诱变有效的范围是２００－３００ｎｍ，紫外线的作用是使ＤＮＡ双链之间或同一条链上的两Ｌ或高浓度２００－５００ｍｇ／Ｌ；Ｄ、藻细胞连续培养２－１５天后，通过过滤或离心的方法采收，并用清水或清洗液冲洗新鲜藻泥，洗去藻细胞表面的无机硒，利用烘干、喷雾干燥或冷冻干燥方法获得富硒雨生红球藻藻粉。个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，阻碍双链的分开、复制和碱基的配对，引起突变；经紫外诱变处理后的藻株要暗处理后再进光照培养，将２０Ｗ的紫外灯打开，预热２０分钟，紫外灯发出的波长处于稳定后，分别取处于对数生长期藻液６ｍＬ，置于小培养皿内，在磁力搅拌下，在距离紫外灯３０ｃｍ处进行照射，时间分别为３、４、５分钟，各重复３次；取５ｍＬ紫外照射处理后的藻液接种到装有２０ｍＬ培养液的５０ｍＬ小锥形瓶中，遮光３小时以避免光修复，再重新放回到光照培养箱中培养３天，血球计数法对藻细胞进行计数，选择致死率在５０％－８０％的处理，进行双层平板分离，挑取生长快、体积的克隆，接种于２５ｍＬ小锥形瓶中培养，将正常生长状态的克隆分别接种至２５０ｍＬ锥形瓶中继续培养，每１０天继代培养一次，共４次，突变株表现特性稳定的克隆，并进行硒难受性、硒蛋白和虾青素含量等特性检测，筛选得到稳定的突变株系；（２）化学诱变方法：采用与诱变对象的化学诱变剂，化学诱变剂有碱基类似物、烷化剂、移码突变剂、脱氨剂、羟化剂，烷化剂有一个或活性烷基，它们易于取代ＤＮＡ分子中活泼的氢原子，直接与一个或碱基起烷化反应，改变ＤＮＡ的分子结构，引起突变，１－甲基－３－硝基－１－亚硝基胍，一次处理使细胞发生一次或突变，使基因并发突变，在复制叉附近一个基因突变能诱发临近位置的基因陆续连锁突变；取对数期藻液４ｍＬ，４０００ｒｐｍ，２５℃，离心５ｍｉｎ，弃上清液，加入ｐＨ值６．５的无菌磷酸钾缓冲液５ｍＬ，洗涤三次，定容，加入ＮＴＧ溶液，使终浓度分别为１．０ｇ／Ｌ和２．０ｇ／Ｌ，各３次重复，于２５℃水浴中处理３０分钟，加入等量...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡章立，高彦东，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]