少突胶质前体细胞的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了少突胶质前体细胞的分离纯化方法，是将新生大鼠大脑皮质和部分白质用胰蛋白酶和ＤＮＡ酶消化后，吹打成单细胞悬液，用混合细胞培养基接种至预先用多聚赖氨酸包被的培养瓶中，培养３～５天待底层细胞融合达６５～７５％时，换为少突胶质前体细胞增殖培养基，培养３～５天，再换为少突胶质前体细胞分离培养基，３７℃消化，从混合细胞中分离出少突胶质前体细胞，吹打成单细胞悬液，用少突胶质前体细胞接种培养基接种至预先用多聚赖氨酸包被的培养瓶中，待细胞贴壁后，换为少突胶质前体细胞纯化培养基，培养２～４天，所得贴壁细胞即为少突胶质前体细胞；本发明专利技术可以方便、短时、经济、高效地获得大量纯度高、活性好的少突胶质前体细胞。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
少突胶质前体细胞的分离纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：　　①获取混合细胞：取出生０～３天的大鼠大脑，去除脑干、小脑、嗅球、脑膜、海马和海马周边白质，将剩余的大脑灰质和白质用胰蛋白酶和ＤＮＡ酶消化后，吹打成单细胞悬液，离心弃去上清液，细胞用混合细胞培养基重悬，备用；所述混合细胞培养基由ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养基和体积分数为１０％的胎牛血清组成；　　②培养混合细胞：将步骤①所得细胞悬液接种至预先用多聚赖氨酸包被的培养瓶中，温度３７℃培养，培养３～５天待底层细胞融合达６５～７５％时，将混合细胞培养基更换为少突胶质前体细胞增殖培养基，继续培养３～５天；所述少突胶质前体细胞增殖培养基由ＤＭＥＭ／Ｆ１２培...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：牛建钦，肖岚，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三军医大学，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]