引物探针组合物、ARMS-PCR试剂盒和人类红细胞血型抗原基因的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种引物探针组合物及应用、扩增体系和人类红细胞血型抗原基因的检测方法，涉及生物检测领域。引物探针组合物包括探针、上游引物及下游引物。其中，探针具有荧光基团、淬灭基团及结合区；上游引物具有检测区及第一靶序列结合区；下游引物具有第二靶序列结合区；引物探针组合物用于检测目标基因位点的靶序列，检测区用以与探针的结合区相结合，第一靶序列结合区及第二靶序列结合区分别用以与靶序列相结合；上游引物的熔解温度及下游引物的熔解温度均低于探针的熔解温度。本发明专利技术的技术方案通过采用上游引物和下游引物，只有两个引物同时与靶序列配对才能进行扩增反应，在保证引物探针组合物的灵敏度的同时，提高了其特异性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测，特别涉及一种引物探针组合物、arms-pcr试剂盒和人类红细胞血型抗原基因的检测方法。

技术介绍

1、扩增阻滞突变系统pcr（amplification refractory mutation system pcr，arms-pcr），又称为等位基因特异性pcr（allele-specific pcr，as-pcr）是一项在pcr基础上发展起来的新方法，可检测出dna中各种点突变。

2、目前提高arms-pcr特异性的方法主要有三种，1、在上游引物的3'端倒数第2位或第3位碱基处引入一个错配碱基，该错配碱基与3'末端的错配碱基共同作用，使引物在野生型扩增产物率显著降低。2、增加一条与野生型模板互补的封闭引物blocker，其3'端通过特殊修饰使得引物无法进行延伸，通过封闭引物与突变引物竞争结合野生模板来提高在检测野生模板时的特异性。3、降落pcr，上游引物由于和野生型存在错配，tm值（熔解温度）会变低，pcr扩增时，退火温度由高到低，可以使引物与突变型优先结合，从而提高特异性。

3、目前提高arms-pcr特本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物包括：

2.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物用于检测目标基因位点的等位基因位点；和/或，

3.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物用于检测人类红细胞血型抗原基因位点的靶序列。

4.如权利要求3所述的引物探针组合物，其特征在于，所述上游引物的序列如SEQ IDNO.1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示，所述探针的结合区序列如SEQ IDNO.3所示；

5.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述荧光基团...

【技术特征摘要】

1.一种引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物包括：

2.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物用于检测目标基因位点的等位基因位点；和/或，

3.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物用于检测人类红细胞血型抗原基因位点的靶序列。

4.如权利要求3所述的引物探针组合物，其特征在于，所述上游引物的序列如seq idno.1所示，所述下游引物的序列如seq id no.2所示，所述探针的结合区序列如seq idno.3所示；

5.如权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述荧光基团包括fam基团，所述淬灭...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文娟，张传国，张平，张翠云，
申请(专利权)人：深圳市爱康试剂有限公司，
类型：发明
国别省市：