催化芳香酸的光脱羧酶、突变体及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术涉及一种光脱羧酶CtFAP以及其突变体CtFAP，其氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3所示。本发明专利技术还提供了光脱羧酶突变体CtFAP‑S基因的载体，以及一种脂肪酸脱羧反应的方法。本发明专利技术所述的CtFAP对芳香酸具有较好的脱羧活性。此外本发明专利技术通过添加抗氧化剂显著提高了CtFAP无底物添加状态下的蓝光耐受性。本发明专利技术拓宽了脂肪酸光脱羧酶应用的可能性，为其在工业上广泛应用提供了条件。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶的基因工程，具体地说涉及一种可以催化芳香酸的光脱羧酶、突变体及其编码基因和应用。

技术介绍

1、脂肪酸光脱羧酶(fatty acid photodecarboxylase,fap,ec 4.1.1.106)广泛存在于藻类细胞中，属于葡萄糖-甲醇-胆碱(glucose-methanol-chol ine,gmc)氧化还原酶家族。2017年fred beisson首次从变异小球藻nc64a中发掘出了cvfap，发现其在蓝光(400-520nm)照射条件下，可催化中长链(c12-20)脂肪酸脱羧生成链长减1的烷烃，该酶利用活性中心的黄素腺嘌呤二核苷酸(fad)辅因子完成脂肪酸脱羧反应，这也是继dna光解酶、叶绿素内酯氧化还原酶之后发现的第三种光酶。由于dna光解酶或原叶绿素内酯氧化还原酶具有高度底物特异性，它们作为体外生物催化剂的实际应用受到限制。而光脱羧酶不同，cvfap仅在蓝光照射下即可将羧酸或二羧酸脱羧生成链长减1(或2)的烷烃，具有高度的区域选择性，其与脂肪酶联用可将废弃油脂转化为生物柴油及中长链的烷烃、烯烃等生物燃料。此外，cvfap也本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种光脱羧酶CtFAP，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。

2.一种编码权利要求1所述光脱羧酶CtFAP的基因，优选地，编码光脱羧酶CtFAP的基因为SEQ ID NO:3所示。

3.一种光脱羧酶突变体CtFAP，其氨基酸序列包括SEQ ID NO:2，优选地，其N端添加用于促进表达和纯化的蛋白标签。

4.一种编码权利要求3所述光脱羧酶突变体CtFAP的基因，优选地，编码述光脱羧酶突变体CtFAP的基因包括SEQ ID NO:4。

5.一种光脱羧酶突变体CtFAP基因的载体，其特征在于，其选自如下之一：>

6.权利要求...

【技术特征摘要】

1.一种光脱羧酶ctfap，其氨基酸序列为seq id no:1所示。

2.一种编码权利要求1所述光脱羧酶ctfap的基因，优选地，编码光脱羧酶ctfap的基因为seq id no:3所示。

3.一种光脱羧酶突变体ctfap，其氨基酸序列包括seq id no:2，优选地，其n端添加用于促进表达和纯化的蛋白标签。

4.一种编码权利要求3所述光脱羧酶突变体ctfap的基因，优选地，编码述光脱羧酶突变体ctfap的基因包括seq id no:4。

5.一种光脱羧酶突变体ctfap基因的载体，其特征在于，其选自如下之一：

6.权利要求3所述的所述光脱羧酶突变体ctfap或其编码基因、或权利要求5所述的光脱羧酶突变体ctfap基因载体在催化脂肪酸的脱羧反应中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：蓝东明，和琪，马云建，吴斌，王湘云，周建乐，王永华，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：

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