【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因检测领域，特别涉及一种用于检测2型糖尿病易感基因多态性位点的引物探针组及试剂盒。
技术介绍
1、糖尿病已经成为当前威胁全球人类健康的最重要的慢性病之一，其中2型糖尿病(t2dm)占糖尿病患者90％以上，近年来呈快速增长趋势，可危及大血管、微血管及周围神经，导致心肌梗死、卒中、肾衰竭、失明及截肢等严重并发症，不仅严重影响患者的生活质量，同时也是患者致死的重要原因。目前临床上治疗和控制糖尿病及其并发症的口服降糖药种类较多，如二甲双胍、磺脲类、格列奈类、α-糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类、dpp-4抑制剂、sglt2抑制剂，根据作用效果的不同，口服降糖药可分为主要以促进胰岛素分泌为主要作用的药物(磺脲类、格列奈类、二肽基肽酶-4(dpp-4)抑制剂)和通过其他机制降低血糖的药物(双胍类、噻唑烷二酮类、α-糖苷酶抑制剂、钠-葡萄糖协同转运蛋白2(sglt2)抑制剂)，为t2dm患者提供了更多的治疗选择。
2、然而，t2dm患者对降糖药的治疗效果因个体差异显著，研究表明遗传作为t2dm发病的主要因素，不同的基因多态性可以造成不同人群对于t2dm不同的易感性。有研究报道，cyp2c9 c.1075a>c(rs1057910)基因多态性因单一氨基酸的替换而降低酶代谢底物活性，从而降低cyp2c9对磺脲类药物的代谢，该位点在东亚人群中的发生突变的频率为0.0436；irs1 c.2911g>a(rs1801278)位点的基因多态性与胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损有关，其在东亚人群中发生突变的频率为0.0084；
3、现有的分子生物学检测基因多态性的方法有很多种，如中国专利号cn107955834b，名称为用于检测2型糖尿病易感基因的突变位点组合及其检测引物与应用，公开了通过基因测序的技术检测与2型糖尿病相关基因的snp位点，涉及到外周血提取—pcr扩增—多重pcr文库构建—产物纯化—文库检测—上机测序等步骤，尽管该方法有高通量、多位点的优势，但该方法同时存在步骤繁琐，试验周期长，成本高，灵敏度低，样本易污染等问题，不利于临床大面积推广。此外，中国专利号cn101619351b名称为一种糖尿病药物治疗相关基因突变的检测方法及其专用芯片和试剂盒，通过特异性探针杂交法(ssop)基因芯片技术检测糖尿病相关基因突变，需先进行pcr扩增，之后将含有目的snp位点的pcr产物与突变探针、野生探针杂交，通过比较两个探针杂交信号强度判断样品基因型。该方法操作过程繁琐，难以实现批量化与自动化，结果不易判读，假阳性概率高。再如飞行时间质谱检测技术，其适用20个以上基因位点的检测，少于10个基因位点，检测成本高，时间慢，另外仪器昂贵，对操作人员的要求也高。
4、因此，迫切需要开发一种操作简单、特异性强、灵敏度高、通量高、可靠性强和成本低的针对2型糖尿病药物敏感性相关snp位点进行检测的产品和方案。
技术实现思路
1、本专利技术的专利技术目的在于：针对上述存在的问题，提供一种用于检测2型糖尿病易感基因多态性位点的引物探针组及试剂盒，以克服现有技术所存在的不足。
2、本专利技术采用的技术方案如下：一种用于检测2型糖尿病易感基因多态性位点的引物探针组，包括用于检测cyp2c9 c.1075a>c、irs1 c.2911g>a、kcnj11 c.67t>c、c11orf65c.175-5285g>t、slc30a8 c.826c>t和pparg c.34c>g位点的引物探针组，引物探针组的核苷酸序列如表1所示：
3、表1
4、
5、
6、其中，用于检测cyp2c9 c.1075a>c位点的野生型引物探针组包括：核苷酸序列如seq id no.1所示的正向野生型引物、seq id no.3所示的反向共用引物和seq id no.4所示的探针；其突变型引物探针组包括：核苷酸序列如seq id no.2所示的正向突变型引物、seq id no.3所示的反向共用引物和seq id no.4所示的探针；
7、用于检测irs1 c.2911g>a位点的野生型引物探针组包括：核苷酸序列如seq idno.5所示的反向野生型引物、seq id no.7所示的正向共用引物和seq id no.8所示的探针；其突变型引物探针组包括：核苷酸序列如seq id no.6所示的反向突变型引物、seq idno.7所示的正向共用引物和seq id no.8所示的探针；
8、用于检测kcnj11 c.67t>c位点的野生型引物探针组包括：核苷酸序列如seq idno.9所示的正向野生型引物、seq id no.11所示的反向共用引物和seq id no.12所示的探针；其突变型引物探针组包括：核苷酸序列如seq id no.10所示的正向突变型引物、seq idno.11所示的反向共用引物和seq id no.12所示的探针；
9、用于检测slc30a8 c.826c>t位点的野生型引物探针组包括：核苷酸序列如seq idno.13所示的正向野生型引物、seq id no.16所示的反向共用引物和seq id no.17所示的探针；其突变型引物探针组包括：核苷酸序列如seq id no.14所示的正向突变型引物、seqid no.15所示的突变型阻滞引物、seq id no.16所示的反向共用引物和seq id no.17所示的探针；
10、用于检测c11orf65 c.175-5285g>t位点的野生本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于检测2型糖尿病易感基因多态性位点的引物探针组，其特征在于，包括用于检测CYP2C9 c.1075A>C、IRS1 c.2911G>A、KCNJ11 c.67T>C、C11orf65 c.175-5285G>T、SLC30A8 c.826C>T和PPARG c.34C>G位点的引物探针组，引物探针组的核苷酸序列如表1所示：
2.如权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，检测CYP2C9 c.1075A>C位点的引物在其3’端的第2-5位置引入错配碱基，在其5’端的第2-6位置引入错配碱基；
3.如权利要求1或2所述的引物探针组，其特征在于，所述探针为Taqman荧光探针，所述探针的5’端选用FAM、Texas Red、HEX、CY5、Alexa Fluor 680、ROX其中的一种荧光染料进行标记；所述探针的3’端选用BHQ1、BHQ2其中的一种荧光染料进行标记。
4.一种用于检测2型糖尿病易感基因多态性位点的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1-3任一所述的引物探针组。
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