【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学领域,具体地说,涉及一种关于通过抑制nat10表达，诱导肿瘤细胞衰老的方法以及试剂盒。
技术介绍
1、肿瘤干细胞(cscs)是一种独特的具有自我更新、扩张和分化能力的肿瘤细胞亚群。cscs越来越被认为是癌症转移、复发和耐药性的核心角色，但其潜在的机制还需要进一步的探索。
2、越来越多的证据表明，表观遗传修饰参与了癌症干细胞性的编排。肿瘤抑制基因的dna高甲基化和多能性相关基因的低甲基化都可能有助于csc的形成。组蛋白修饰特征的改变也与cscs广泛相关。催化组蛋白药物的酶，如ezh2(为h3k27me3)和bmi1(h2ak119ub1)，参与诱导cscs的细胞转化。rna修饰在癌症干细胞性中的作用不容忽视。m6a的读者，ythdf1和ythdf2，促进csc表型，导致癌症转移和化疗耐药性。随着对表观遗传学的深入了解，cscs是如何被调控的。
3、n4-乙酰胞苷(ac4c)是最近发现的发生在rna中的乙酰化标记，其形成很大程度上依赖于唯一报道的作者酶n-乙酰转移酶10(nat10).研究人员发现，nat10介导的ac4c修饰可以维持靶标转录本的稳定性，提高翻译效能，从而参与多种生理和病理事件的调控。一些研究已经将nat10与癌症联系起来。然而，nat10对cscs和肿瘤转移的影响还远未阐明。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种关于通过抑制nat10表达，诱导肿瘤细胞衰老的方法以及试剂盒。
2、第一方
3、s1,采用cck-8试验,比较nat10敲除细胞及其亲代细胞的增殖能力；
4、s2,使用划痕伤口愈合试验,评估nat10在癌细胞转移中的作用；
5、s3,根据p16和p21指标,评估nat10敲除细胞的衰老。
6、作为一个优选例，所述nat10敲除细胞系包括h1299、a549、hepg2、hep3b、huh7和mhcc97-h细胞系。
7、作为另一优选例，所述cck-8试验比较增殖能力数据是nat10敲除后h1299、hepg2、huh7和hep3b细胞的增殖能力数据。
8、作为另一优选例，所述划痕伤口愈合试验评估转移能力数据是nat10敲除后h1299细胞和huh7细胞的迁移能力数据。
9、作为另一优选例，所述p16和p21指标评估nat10敲除细胞衰老数据是nat10敲除后h1299、a549、hepg2和mhcc97-h细胞中p21蛋白水平数据,在mhcc97-h细胞系中p16蛋白水平数据。
10、第二方面，本专利技术提供了检测nat10含量的试剂在制备肺癌或肝癌衰老诊断试剂或试剂盒中的应用。
11、本专利技术优点在于：nat10在多种肺癌和肝癌细胞系中均被敲低，导致其增殖和迁移能力受到抑制。nat10敲低的癌细胞显示细胞周期阻滞在g0/g1期。nat10基因敲低抑制了癌症的迁移能力。nat10的下调与肿瘤干细胞(csc)标记物、促肿瘤基因和衰老相关基因的表达降低有关。nat10的减少加速了肝癌和肺癌细胞中cd274 mrna的衰减。nat10敲低后产生的较低水平的程序性死亡配体1(pd-l1)促进了t细胞介导的抗肿瘤免疫。nat10参与了癌细胞干细胞性和衰老的调控。nat10基因敲低是一种很有前途的癌症治疗方法。
12、在本专利技术中，nat10的下调可以抑制体外肺癌细胞和肝癌细胞的增殖和转移。值得注意的是，nat10可能作为癌细胞共抑制分子pd-l1的上游调控因子，参与肿瘤免疫逃逸。
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1.一种诱导肿瘤细胞衰老的方法，其特征在于，所述的方法是以NAT10敲除作为肿瘤衰老的靶标，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述NAT10敲除细胞系包括H1299、A549、HEPG2、HEP3B、HUH7和MHCC97-H细胞系。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CCK-8试验比较增殖能力数据是NAT10敲除后H1299、HEPG2、HUH7和HEP3B细胞的增殖能力数据。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述划痕伤口愈合试验评估转移能力数据是NAT10敲除后H1299细胞和HUH7细胞的迁移能力数据。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述P16和P21指标评估NAT10敲除细胞衰老数据是NAT10敲除后H1299、A549、HEPG2和MHCC97-H细胞中P21蛋白水平数据,在MHCC97-H细胞系中P16蛋白水平数据。
6.检测NAT10含量的试剂在制备肺癌或肝癌衰老诊断试剂或试剂盒中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种诱导肿瘤细胞衰老的方法，其特征在于，所述的方法是以nat10敲除作为肿瘤衰老的靶标，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述nat10敲除细胞系包括h1299、a549、hepg2、hep3b、huh7和mhcc97-h细胞系。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述cck-8试验比较增殖能力数据是nat10敲除后h1299、hepg2、huh7和hep3b细胞的增殖能力数据。
4.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：武多娇，程舟礼，王克，杨莹，杨志诚，李许硕，孙璐，陈钰汶，
申请(专利权)人：复旦大学附属金山医院上海市金山区眼病防治所，上海市金山区核化伤害应急救治中心，
类型：发明
国别省市：
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