一种高产L-精氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及微生物代谢工程技术领域，公开了一种高产L‑精氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明专利技术通过敲除底盘菌基因组上poxB基因、speC基因、speF基因、ldhA基因、adhE基因、proB基因，并在底盘菌基因组中引入EP‑bifido途径、插入基因簇argC‑argJ‑argB‑argD‑argF‑argG‑argH，调节EMP、PPP、以6‑磷酸果糖和5‑磷酸木酮糖为底物生成乙酰磷酸三条途径中的碳通量，在不影响NADPH生成的情况下，提高碳的转化率和减少二氧化碳的释放，最终得到一种高产L‑精氨酸的基因工程菌。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，尤其涉及一种高产l-精氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。

技术介绍

1、在微生物生长代谢和调控过程中，l-精氨酸是不可或缺的重要角色。在人体内参与鸟氨酸循环，促进尿素的形成，使人体内产生的氨经鸟氨酸循环转变成无毒的尿素，由尿中排出，从而降低血氨浓度；同事，其有较高浓度的氢离子，可以有助于纠正肝性脑病时的酸碱平衡。l-精氨酸主要用途有：用于生化研究，各类肝昏迷及病毒性肝类谷丙转氨酶异常者；作为营养增补剂、调味剂；与糖进行加热反应(氨基-羰基反应)可获得特殊的香味物质，是gb 2760-2001规定为允许使用的食品用香料；是维持婴幼儿生长发育必不可少的氨基酸；是鸟氨酸循环的中间代谢物，能促使氨转变成为尿素，从而降低血氨含量；是精子蛋白的主要成分，有促进精子生成，提供精子运动能量的作用。此外，静注精氨酸，能刺激垂体释放生长激素，可用于垂体功能试验；在临床上，适用于血氨增高的肝昏迷，特别是伴有碱中毒的患者；用于辅助测定脑垂体功能；口服用于精液分泌不足和精子缺乏引起的男性不育症。精氨酸具有较为广泛的用途。

2、目前，国内外用于l本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产L-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：所述基因工程菌通过敲除底盘菌基因组上poxB基因、speC基因、speF基因、ldhA基因、adhE基因、proB基因，并在底盘菌基因组中引入EP-bifido途径、插入基因簇argC-argJ-argB-argD-argF-argG-argH。

2.如权利要求1所述的一种高产L-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：基因工程菌基因组中还插入Ptrc-argJ基因。

3.如权利要求1所述的一种高产L-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：EP-bifido途径的引入方式为：敲除pfkA基因、edd基因，并在基因组中整合上fxpk...

【技术特征摘要】

1.一种高产l-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：所述基因工程菌通过敲除底盘菌基因组上poxb基因、spec基因、spef基因、ldha基因、adhe基因、prob基因，并在底盘菌基因组中引入ep-bifido途径、插入基因簇argc-argj-argb-argd-argf-argg-argh。

2.如权利要求1所述的一种高产l-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：基因工程菌基因组中还插入ptrc-argj基因。

3.如权利要求1所述的一种高产l-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：ep-bifido途径的引入方式为：敲除pfka基因、edd基因，并在基因组中整合上fxpk-fbp基因。

4.如权利要求1所述的一种高产l-精氨酸的基因工程菌，其特征在于：底盘菌为大肠杆菌w3110δlaci...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳志强，叶炜杰，王丽娟，杨焜，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：