【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种以人参皂苷rb1为原料、采用生物酶转化法制备人参皂苷rh2的方法。
技术介绍
1、人参皂苷是人参等草本植物发挥各种药理学作用的主导成分，其中原人参二醇类皂苷由达玛烷型三萜类皂苷组成，主要包括常见人参皂苷(如rb1、rb2、rb3、rd等)和稀有人参皂苷(rg3、rh2、ck等)，其表现出特定的药理活性，如抗肿瘤、抗氧化、抗免疫、诱导细胞快速凋亡、抗衰老等。稀有皂苷与同类高含量常见人参皂苷相比，其皂苷元结构相同，只是糖基数目不同。因此，可以通过选择性水解高含量皂苷的糖基来制备稀有皂苷。
2、人参皂苷rh2作为一种原人参二醇型人参皂苷，是人参皂苷rb1在体内真正吸收和发挥作用的实体。现有研究发现rh2可以通过诱导分化或凋亡，抑制多种肿瘤细胞的增殖与生长，并表现出低毒性的特点，是重要的肿瘤抑制物。
3、近年来，人参皂苷rh2的制备研究由酸水解法、碱水解法、合成法逐渐向生物转化法过渡，其中糖苷酶生物转化法在生产过程中不使用大量的酸、碱，避免了转化后酸碱的处理弊端，反应条件温和，设备要求不高，容易放大，因此酶法制备人参皂苷rh2是理想的制备方法。
4、然而，目前技术人员尚未开发出在一个反应体系中将人参皂苷rb1直接转化为人参皂苷rh2的方法。
技术实现思路
1、鉴于现有技术存在的上述技术难题，本专利技术的目的在于提供一种糖苷酶组合物、以及使用该糖苷酶组合物在一个反应体系中将人参皂苷rb1直接转化为人参皂苷rh2的方法。>
2、为解决上述技术难题，本专利技术人进行了深入研究，发现将来源于aminobactersp.gsoil204菌的糖苷酶(genbank:aga60126.1)及来源于sphingopyxis alaskensisrb2256菌的β-糖苷酶(genbank:abf52736.1)组合后可实现以人参皂苷rb1为原料在一个反应体系中进行酶催化反应生成人参皂苷rh2，并具有较高的转化率(60％以上)，从而完成了本专利技术。
3、即，本专利技术包括：
4、1.一种糖苷酶组合物，其包含糖苷酶1和糖苷酶2，其中所述糖苷酶1是来源于aminobacter sp.gsoil204菌的糖苷酶(genbank:aga60126.1)，所述糖苷酶2是来源于sphingopyxis alaskensis rb2256菌的β-糖苷酶(genbank:abf52736.1)。
5、2.根据项1的糖苷酶组合物，其中，所述糖苷酶1和糖苷酶2的重量比为1：10～10：1。
6、3.根据项1或2的糖苷酶组合物作为催化剂的用途，所述催化剂用于以人参皂苷rb1为原料、在一个反应体系中、通过酶促反应制备人参皂苷rh2。
7、4.根据项3所述的用途，其中，所述酶促反应在一个反应体系中进行。
8、5.一种制备人参皂苷rh2的方法，其中，以人参皂苷rb1为原料，以根据项1所述的糖苷酶组合物作为催化剂，通过酶促反应制备人参皂苷rh2。
9、6.根据项5所述的方法，其中，所述酶促反应在一个反应体系中进行。
10、7.根据项6所述的方法，其中，所述反应体系包括乙酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液。
11、8.根据项6所述的方法，其中，所述反应体系的ph为4～5.5，优选为5。
12、9.根据项5所述的方法，其中，所述酶促反应的温度为35～50℃，优选为40℃。
13、本专利技术的有益效果是：1)本专利技术通过将两种来源不同的酶进行组合使用实现了在同一体系中将人参皂苷rb1直接转化为稀有人参皂苷rh2；2)两种酶的组合投量可以使人参皂苷rh2含量达到36％以上，转化率达到60％以上；3)本专利技术提供的制备方法操作简单，生成的酶催化产物成分较为单一，易于放大生产，具有广阔的应用前景。
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1.一种糖苷酶组合物，其包含糖苷酶1和糖苷酶2，其中所述糖苷酶1是来源于Aminobacter sp.Gsoil204菌的糖苷酶(GenBank:AGA60126.1)，所述糖苷酶2是来源于Sphingopyxis alaskensis RB2256菌的β-糖苷酶(GenBank:ABF52736.1)。
2.根据权利要求1的糖苷酶组合物，其中，所述糖苷酶1和糖苷酶2的重量比为1：10～10：1。
3.根据权利要求1或2的糖苷酶组合物作为催化剂的用途，所述催化剂用于以人参皂苷Rb1为原料、在一个反应体系中、通过酶促反应制备人参皂苷Rh2。
4.根据权利要求3所述的用途，其中，所述酶促反应在一个反应体系中进行。
5.一种制备人参皂苷Rh2的方法，其中，以人参皂苷Rb1为原料，以根据权利要求1所述的糖苷酶组合物作为催化剂，通过酶促反应制备人参皂苷Rh2。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述酶促反应在一个反应体系中进行。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述反应体系包括乙酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐
8.根据权利要求6所述的方法，其中，所述反应体系的pH为4～5.5，优选为5。
9.根据权利要求5所述的方法，其中，所述酶促反应的温度为35～50℃，优选为40℃。
...【技术特征摘要】
1.一种糖苷酶组合物，其包含糖苷酶1和糖苷酶2，其中所述糖苷酶1是来源于aminobacter sp.gsoil204菌的糖苷酶(genbank:aga60126.1)，所述糖苷酶2是来源于sphingopyxis alaskensis rb2256菌的β-糖苷酶(genbank:abf52736.1)。
2.根据权利要求1的糖苷酶组合物，其中，所述糖苷酶1和糖苷酶2的重量比为1：10～10：1。
3.根据权利要求1或2的糖苷酶组合物作为催化剂的用途，所述催化剂用于以人参皂苷rb1为原料、在一个反应体系中、通过酶促反应制备人参皂苷rh2。
4.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：范代娣，董杨芳，段志广，黄蓉，陈志奇，徐茹，严建亚，
申请(专利权)人：陕西巨子生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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