一种基于自诱导培养基的工业发酵方法技术

本申请涉及生物工程技术领域，具体公开了一种基于自诱导培养基的工业发酵方法，包括以下步骤：将冻存的重组蛋白的大肠杆菌菌株接种于LB液体培养基中培养；培养液再接种于LB液体培养基中扩增；再将培养液接种于自诱导培养基中，进行发酵培养；并基于微生物代谢原理将在发酵中将补料过程中分三阶段引入流加甘油、含乳糖和葡萄糖的混合糖溶液以及含胰蛋白胨和酵母浸粉的混合有机氮溶液；同时采用两段法在发酵培养后半程进行降温发酵。本申请在应用过程中可控性更强，不仅通过高密度发酵获得较高的最终生物量和总体表达量，而且通过从大肠杆菌代谢流角度出发进行发酵过程的合理调控使得副产物明显减少和目的产物纯度提高，更适用于工业发酵所需。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物工程，更具体地说，它涉及一种基于自诱导培养基的工业发酵方法。

技术介绍

1、自诱导培养基是一种包含多种生长因子和细胞信号分子的复杂培养基，这些因子可以在细胞培养的过程中诱导细胞自主分化和增殖，从而实现细胞分化和重编程等研究目的，是一种非常有前景的细胞培养技术。自诱导培养基通常由多种基础培养基、生长因子和细胞信号分子组成，具有高度复杂性和特异性。

2、其中，将相应工程菌接种到自诱导培养基中进行发酵，能够获得不同功能的发酵产物，在细胞生物学研究、组织工程、细胞治疗等多个领域具有广泛的应用前景。目前传统自诱导培养基营养物质一次性加入，一旦中途出现参数异常，人为可干预调控受限，各节点难以把控。如专利公开号为cn111549014a的中国专利技术专利申请文件中公开了一种产酯酶自诱导培养基及其应用，一种产酯酶自诱导培养基，配方为：甘油5～13g/l，葡萄糖0.3～1.3g/l，乳糖1～6g/l，胰蛋白胨10～30g/l，酵母浸粉3～13g/l，0.0～0.5g/l mgso4，17～19g/l na2hpo4，6～8g/l kh2po4，2～本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，发酵培养条件为，温度37℃，pH值6.5-7.0，空气流量5-6.5L/min，初始转速为150rpm，关联搅拌150-400rpm/30%-50%。

3.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，发酵培养2h时，开始以指数流加的方式流加50%甘油，总量为发酵体积的4%，2h内流加完毕。

4.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，...

【技术特征摘要】

1.一种基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，发酵培养条件为，温度37℃，ph值6.5-7.0，空气流量5-6.5l/min，初始转速为150rpm，关联搅拌150-400rpm/30%-50%。

3.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，发酵培养2h时，开始以指数流加的方式流加50%甘油，总量为发酵体积的4%，2h内流加完毕。

4.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，发酵培养3.5h时，以关联溶氧变化的方式流加含15%乳糖和0.5%葡萄糖的混合糖溶液，控制溶氧20%，总量为发酵体积的3.5%，2h内流加完毕。

5.根据权利要求1所述的基于自诱导培养基的工业发酵方法，其特征在于：步骤（3）中，发酵培养5h...

【专利技术属性】
技术研发人员：阮仁全，王辉，王丹慧，夏静雯，
申请(专利权)人：美尔健深圳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：