【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
提供了脂质纳米颗粒组合物及其制备方法，所述组合物用于将治疗剂或预防剂递送至患者的气道上皮。
技术介绍
1、呼吸道上皮细胞内衬于呼吸道。呼吸上皮细胞的主要功能是湿润呼吸道，保护气道免受潜在的病原体、感染和组织损伤，和/或促进气体交换。气道上皮细胞的功能障碍可导致许多病症，包括例如哮喘和慢性阻塞性肺病(copd)。
2、需要改进的疗法来治疗与气道上皮细胞功能障碍相关的病症，或将受益于核酸分子或其他有效负载分子向气道上皮细胞的递送的其他病症。此外，将有效负载分子有效靶向递送至气道上皮细胞代表着持续的医学挑战。因此，需要开发促进将治疗剂和预防剂(诸如核酸)递送至气道上皮细胞的方法和组合物。
技术实现思路
1、本公开提供了用于递送核酸分子(例如，mrna治疗剂)以对患者产生预防益处的lnp分子。
2、在一个方面，本文提供了一种制备填充脂质纳米颗粒组合物的方法，其包括：
3、(a)将脂质溶液与具有约4.5或更低的ph的水性缓冲溶液混合，所述脂质溶液包含：
4、(i)可电离脂质，
5、(ii)磷脂，
6、(iii)结构脂质，和
7、(iv)peg-脂质，
8、从而产生空脂质纳米颗粒组合物；以及
9、(b)将空脂质纳米颗粒组合物与有效负载组合以形成填充脂质纳米颗粒组合物，其中有效负载用于递送至上皮细胞；以及
10、(c)向所述填充脂质纳米颗粒组合物添加阳离子剂。
11
12、在一个方面，本文提供了将有效负载递送至细胞中的方法，其包括使细胞与本文公开的脂质纳米颗粒组合物接触。
13、在一个方面，本文提供了治疗或预防患者的疾病的方法，其包括向患者施用本文公开的脂质纳米颗粒组合物。
14、每种限制可涵盖各种实施方案。因此，预期涉及任何一个元素或元素组合的限制中的每一种可包括在每个所述方面中。本专利技术在其应用方面不限于在以下描述中阐述或在附图中示出的组分的构造和排列的细节。其他实施方案并且以各种方式实践或执行是可能的。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种制备填充脂质纳米颗粒组合物的方法，其包括：
2.如权利要求1所述的方法，其中所述有效负载包括核酸。
3.如权利要求1所述的方法，其中所述有效负载包括为mRNA的核酸。
4.如权利要求2或3所述的方法，其中所述核酸以核酸溶液的形式提供，所述核酸溶液包含(i)所述核酸和(ii)能够维持酸性pH的缓冲液。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述核酸溶液具有约3至约6的pH。
6.如权利要求4所述的方法，其中所述核酸溶液具有约5的pH。
7.如权利要求4至6中任一项所述的方法，其中所述核酸溶液具有约5mM至约140mM的缓冲液浓度。
8.如权利要求4至7中任一项所述的方法，其中所述核酸以约0.05mg/mL至约5.0mg/mL的浓度存在于所述核酸溶液中。
9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述步骤(b)的组合在约5至约6的pH下进行。
10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述步骤(b)的包封效率为90％或更高。
11.如权利要求1至10中任一项
12.如权利要求11所述的方法，其中所述阳离子脂质是包含基于甾醇的疏水部分和亲水部分的甾醇胺。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述亲水部分包含胺基，所述胺基包含一至四个伯胺、仲胺或叔胺或其混合物。
14.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述亲水部分包含一个或两个末端伯胺。
15.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述亲水部分包含一个或两个末端伯胺和一个内部仲胺。
16.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述疏水部分包含一个或两个叔胺。
17.如权利要求13至16中任一项所述的方法，其中至少一个胺基具有大于约8的pKa值。
18.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式(A1)的化合物：
19.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式A2a的化合物：
20.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式A3a的化合物：
21.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式A4的化合物：
22.如权利要求19至21中任一项所述的方法，其中Y1选自：
23.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式A5的化合物：
24.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是选自以下的化合物：
25.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是SA3：
26.如权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂以包含所述阳离子剂和缓冲液的阳离子剂溶液提供。
27.如权利要求26所述的方法，其中所述阳离子剂溶液具有约7至约8的pH。
28.如权利要求26或27所述的方法，其中所述阳离子剂溶液的所述缓冲液浓度为约5mM至约100mM。
29.如权利要求26至28中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂溶液的所述缓冲液包含Tris。
30.如权利要求26至29中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂溶液的所述阳离子剂浓度为约0.1至约50mg/mL。
31.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其还包括向所述填充脂质纳米颗粒添加表面活性剂。
32.如权利要求31所述的方法，其中所述表面活性剂是PEG脂质。
33.如权利要求31所述的方法，其中所述表面活性剂与所述阳离子剂一起提供。
34.如权利要求31至33中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是浓度为约0.1至约50mg/mL的PEG-脂质。
35.如权利要求1至34中任一项所述的方法，其还包括选自以下的一个或多个额外步骤：
36.如权利要求35所述的方法，其中所述一个或多个额外步骤是向所述组合物中添加渗透压调节剂。
37.如权利要求36所述的方法，其中所述渗透压调节剂是氯化钠。
38.如权利要求36或37所述的方法，其中所述渗透压调节剂以包含无机盐和缓冲液的盐溶液的形式提供。
39.如权利要求38所述的方法，其中所述盐溶液中的所述无机盐具有约100至约750mM的浓度。
40.如权利要求38或39所述的方法，其中所述盐溶液具有约7至约8的pH。
41.如权利要求1至40中任一项所述的方...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种制备填充脂质纳米颗粒组合物的方法，其包括：
2.如权利要求1所述的方法，其中所述有效负载包括核酸。
3.如权利要求1所述的方法，其中所述有效负载包括为mrna的核酸。
4.如权利要求2或3所述的方法，其中所述核酸以核酸溶液的形式提供，所述核酸溶液包含(i)所述核酸和(ii)能够维持酸性ph的缓冲液。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述核酸溶液具有约3至约6的ph。
6.如权利要求4所述的方法，其中所述核酸溶液具有约5的ph。
7.如权利要求4至6中任一项所述的方法，其中所述核酸溶液具有约5mm至约140mm的缓冲液浓度。
8.如权利要求4至7中任一项所述的方法，其中所述核酸以约0.05mg/ml至约5.0mg/ml的浓度存在于所述核酸溶液中。
9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述步骤(b)的组合在约5至约6的ph下进行。
10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述步骤(b)的包封效率为90％或更高。
11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂是阳离子脂质。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述阳离子脂质是包含基于甾醇的疏水部分和亲水部分的甾醇胺。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述亲水部分包含胺基，所述胺基包含一至四个伯胺、仲胺或叔胺或其混合物。
14.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述亲水部分包含一个或两个末端伯胺。
15.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述亲水部分包含一个或两个末端伯胺和一个内部仲胺。
16.如权利要求12所述的方法，其中所述甾醇胺的所述疏水部分包含一个或两个叔胺。
17.如权利要求13至16中任一项所述的方法，其中至少一个胺基具有大于约8的pka值。
18.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式(a1)的化合物：
19.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式a2a的化合物：
20.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式a3a的化合物：
21.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式a4的化合物：
22.如权利要求19至21中任一项所述的方法，其中y1选自：
23.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是式a5的化合物：
24.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是选自以下的化合物：
25.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述甾醇胺是sa3：
26.如权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂以包含所述阳离子剂和缓冲液的阳离子剂溶液提供。
27.如权利要求26所述的方法，其中所述阳离子剂溶液具有约7至约8的ph。
28.如权利要求26或27所述的方法，其中所述阳离子剂溶液的所述缓冲液浓度为约5mm至约100mm。
29.如权利要求26至28中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂溶液的所述缓冲液包含tris。
30.如权利要求26至29中任一项所述的方法，其中所述阳离子剂溶液的所述阳离子剂浓度为约0.1至约50mg/ml。
31.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其还包括向所述填充脂质纳米颗粒添加表面活性剂。
32.如权利要求31所述的方法，其中所述表面活性剂是peg脂质。
33.如权利要求31所述的方法，其中所述表面活性剂与所述阳离子剂一起提供。
34.如权利要求31至33中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是浓度为约0.1至约50mg/ml的peg-脂质。
35.如权利要求1至34中任一项所述的方法，其还包括选自以下的一个或多个额外步骤：
36.如权利要求35所述的方法，其中所述一个或多个额外步骤是向所述组合物中添加渗透压调节剂。
37.如权利要求36所述的方法，其中所述渗透压调节剂是氯化钠。
38.如权利要求36或37所述的方法，其中所述渗透压调节剂以包含无机盐和缓冲液的盐溶液的形式提供。
39.如权利要求38所述的方法，其中所述盐溶液中的所述无机盐具有约100至约750mm的浓度。
40.如权利要求38或39所述的方法，其中所述盐溶液具有约7至约8的ph。
41.如权利要求1至40中任一项所述的方法，其中步骤(a)中的所述水性缓冲溶液具有约3.5至约4.5的ph。
42.如权利要求1至41中任一项所述的方法，其中步骤(a)的所述水性缓冲溶液具有大于约30mm的缓冲液浓度。
43.如权利要求1至42中任一项所述的方法，其中步骤(a)的所述水性缓冲溶液具有约15mm或更小的离子强度。
44.如权利要求1至42中任一项所述的方法，其中步骤(a)的所述水性缓冲溶液具有约0.1mm至约15mm的离子强度。
45.如权利要求1至44中任一项所述的方法，其中步骤(a)的所述水性缓冲溶液包含乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、tris缓冲液或其混合物。
46.如权利要求1至45中任一项所述的方法，其中步骤(a)的所述空脂质纳米粒组合物的特征在于约35mv或更高的ζ电位。
47.如权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：M·H·史密斯，N·苏德，C·田，D·W·多尔蒂，
申请(专利权)人：摩登纳特斯有限公司，
类型：发明
国别省市：
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