【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物防治，尤其涉及茶树源转录因子cswrky71在提高植物抗虫性及制备植物抗虫品种中的应用。
技术介绍
1、茶树(camellia sinensis)为多年生常绿木本植物，其嫩芽和嫩叶常用于制成不同类型的茶叶销往世界各地，是一种极具特色和价值的重要经济作物。然而，茶树在其生长过程中，尤其气温较高的夏秋季期间往往会遭受多种害虫为害，且虫害发生常呈现出种类多、危害大等特点，不仅显著降低当年茶叶产量和品质，严重时还会导致茶树长势衰弱，对来年茶叶生产带来严重影响。目前针对茶树重要害虫的防治主要依赖于化学农药，而因农药广泛使用而造成日益严重的环境生态安全以及人类生命健康等问题使得挖掘研究茶树抗虫新基因、培育茶树抗虫新品种迫在眉睫。
2、拟南芥的种植过程中，常常会出现虫害，而虫害会妨碍拟南芥的正常生长发育，影响后续实验、表型观察以及材料种质的长期保存。
3、近年来的研究表明，转录因子基因在植物的生长发育、逆境响应等多种生命活动中起到重要作用，其中，wrky转录因子作为植物特有的最大的转录因子家族之一，已被证实在植物应对生物及非生物胁迫过程中扮演了非常关键的角色。例如，茶树wrky29基因能够显著提高植物的抗寒性。但是到目前为止，针对茶树源wrky转录因子基因及其编码产物在植物抗虫性方面的研究还未见研究和报道。茶树作为一种多年生木本植物，存在传统育种周期长、效率低、转基因技术体系尚未建立健全等诸多问题。
4、因此，研究茶树源wrky转录因子基因的抗虫功能、并将其应用到抗虫茶树分子育种中，对于茶
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供茶树源转录因子cswrky71在提高植物抗虫性及制备植物抗虫品种中的应用，所述茶树源转录因子cswrky71能够提高草本植物和木本植物对害虫的抗性，为抗虫植物新品种的选育和应用以及有害生物的绿色防控提供了基因资源和技术手段，具有良好的应用前景和价值。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供了茶树源转录因子cswrky71在提高植物抗虫性中的应用，所述茶树源转录因子cswrky71的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、优选的，通过过表达茶树源转录因子cswrky71来提高植物的抗虫性。
5、优选的，所述植物为草本植物或木本植物。
6、优选的，所述草本植物为拟南芥，所述木本植物为茶树。
7、本专利技术还提供了一种过表达茶树源转录因子cswrky71的重组载体，包括所述的茶树源转录因子cswrky71和pbwa(v)hs载体。
8、本专利技术还提供了所述过表达茶树源转录因子cswrky71的重组载体的构建方法，包括如下步骤：
9、(1)将所述的茶树源转录因子cswrky71连接至peasy-blunt zero载体，获得peasy-cswrky71；
10、(2)pcr扩增peasy-cswrky71，得到扩增产物rdna；
11、(3)分别对扩增产物rdna和表达载体pbwa(v)hs进行bsai/eco31i双酶切反应，获得线性化rdna和线性化载体pbwa(v)hs；
12、(4)对步骤(3)获得的线性化rdna和线性化载体pbwa(v)hs进行同源重组和goldengate连接反应，获得过表达重组载体pbwa(v)hs-cswrky71。
13、本专利技术还提供了一种过表达茶树源转录因子cswrky71的重组菌，将所述的过表达重组载体转入农杆菌gv3101中获得。
14、本专利技术还提供了过表达茶树源转录因子cswrky71在制备拟南芥抗虫品种中的应用。
15、优选的，在制备拟南芥抗虫品种时将所述的过表达茶树源转录因子cswrky71的重组菌通过农杆菌介导的花絮侵染法转化至拟南芥中。
16、本专利技术还提供了过表达茶树源转录因子cswrky71在制备茶树抗虫品种中的应用。
17、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
18、本专利技术通过利用rt-pcr和race技术首次分离并克隆了一种茶树源转录因子基因cswrky71，并通过同源和异源过表达实验首次验证了所述基因的生物学功能，证明其能够提高植物对害虫的抗性能力，为培育抗虫植物新品种以及害虫绿色防控提供宝贵的基因资源及技术手段，具有良好的潜在应用前景。
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1.茶树源转录因子CsWRKY71在提高植物抗虫性中的应用，其特征在于，所述茶树源转录因子CsWRKY71的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，通过过表达茶树源转录因子CsWRKY71来提高植物的抗虫性。
3.权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述植物为草本植物或木本植物。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述草本植物为拟南芥，所述木本植物为茶树。
5.一种过表达茶树源转录因子CsWRKY71的重组载体，其特征在于，包括权利要求1或2所述的茶树源转录因子CsWRKY71和pBWA(V)HS载体。
6.权利要求5所述过表达茶树源转录因子CsWRKY71的重组载体的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
7.一种过表达茶树源转录因子CsWRKY71的重组菌，其特征在于，将权利要求5所述的过表达重组载体转入农杆菌GV3101中获得。
8.过表达茶树源转录因子CsWRKY71在制备拟南芥抗虫品种中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用
10.过表达茶树源转录因子CsWRKY71在制备茶树抗虫品种中的应用。
...【技术特征摘要】
1.茶树源转录因子cswrky71在提高植物抗虫性中的应用，其特征在于，所述茶树源转录因子cswrky71的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，通过过表达茶树源转录因子cswrky71来提高植物的抗虫性。
3.权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述植物为草本植物或木本植物。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述草本植物为拟南芥，所述木本植物为茶树。
5.一种过表达茶树源转录因子cswrky71的重组载体，其特征在于，包括权利要求1或2所述的茶树源转录因子cswrky71和pbwa(v)hs载体。...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶萌，丁长庆，姜琦，
申请(专利权)人：中国农业科学院茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：
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