【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物。具体地说，本专利技术涉及cnr基因及其编码的蛋白质在调控植物角质层厚度中的应用。
技术介绍
1、新鲜果品蔬菜含水量高达85％-95％，采收后由于蒸腾作用，水分很容易损失，导致果蔬的失重和失鲜，严重影响果蔬的商品外观和储藏寿命。
2、角质层作为植物的一级保护屏障，发挥着重要的生理作用，例如，防止植物体的失水。角质层由蜡质和角质基质构成。角质基质是含羟基和羟基环氧基的c16、c18脂肪酸交联形成的聚酯基质，其与表皮细胞壁交织在一起，形成角质层的骨架结构。蜡质或镶嵌或覆盖在角质基质上，形成完整角质层。这两种主要成分的缺失会导致角质层厚度及功能发生改变。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供cnr基因的应用。
2、本专利技术提供了调控cnr基因表达或调控cnr蛋白含量的物质在如下任一中的应用：
3、(1)调控植物果实失水；
4、(2)制备调控植物果实失水的产品；
5、(3)调控植物果实角质层形成；
6、(4)制备调控植物果实角质层形成的产品；
7、(5)调控植物果实总蜡负荷量；
8、(6)制备调控植物果实总蜡负荷量的产品。
9、可选地，根据上述的应用，所述调控植物果实失水为调控植物果实生长发育和/或采后失水率；所述调控植物果实角质层形成为调控植物果实角质层厚度。
10、本专利技术还提供了cnr基因、cnr蛋白或cnr基因的相关生物材料在如下任
11、(1)调控植物果实失水；
12、(2)制备调控植物果实失水的产品；
13、(3)调控植物果实角质层形成；
14、(4)制备植物果实角质层形成的产品；
15、(5)调控植物果实总蜡负荷量；
16、(6)制备调控植物果实总蜡负荷量的产品。
17、可选地，根据上述的应用，所述调控植物果实失水为调控植物果实生长发育和/或采后失水，例如调控植物果实生长发育和/或采后失水率；所述调控植物果实角质层形成为调控植物果实角质层厚度。
18、本文中，所述cnr基因可为如下任一种：
19、d1)核苷酸序列是是如seq id no.5所示的dna分子；
20、d2)编码序列是如seq id no.6所示的dna分子；
21、d3)与d1)或d2)限定的核苷酸序列具有90％或90％以上同一性，来源于番茄且编码cnr蛋白的dna分子；
22、d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的核苷酸序列杂交，且编码cnr蛋白的dna分子。
23、本文中，所述cnr蛋白可为如下任一种：
24、(a1)氨基酸序列为seq id no.7所示的蛋白质；
25、(a2)将(a1)所限定的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；
26、(a3)与(a1)-(a2)中任一所限定的氨基酸序列具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白质。
27、本文中，所述相关生物材料可为下述任一种：
28、c1)抑制cnr基因表达或降低cnr蛋白含量的核酸分子；
29、c2)含有c1)所述核酸分子的表达盒；
30、c3)含有c1)所述核酸分子的重组载体、或含有c2)所述表达盒的重组载体；
31、c4)含有c1)所述核酸分子的重组微生物、或含有c2)所述表达盒的重组微生物、或含有c3)所述重组载体的重组微生物；
32、c5)含有c1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有c2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
33、c6)含有c1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有c2)所述表达盒的转基因植物组织；
34、c7)含有c1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有c2)所述表达盒的转基因植物器官；
35、c8)含有cnr基因的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系。
36、可选地，根据上述的相关生物材料，c1)所述的核酸分子为特异sgrna或表达所述特异sgrna的dna分子，所述特异sgrna的靶点序列如seq id no.1-4中的至少一种所示。
37、可选地，根据上述的相关生物材料，c2)所述的表达盒为含有表达所述特异sgrna的dna分子的表达盒，所述特异sgrna的靶点序列如seq id no.1-4中的至少一种所示。
38、可选地，根据上述的相关生物材料，c3)所述的重组载体为含有表达所述特异sgrna的dna分子的表达盒，所述特异sgrna的靶点序列如seq id no.1-4中的至少一种所示，例如下述实施例制备的pylcrispr/cas9pubi-h-slcnr。
39、可选地，根据上述的相关生物材料，c8)所述的重组载体为含有seq id no.5所示的dna分子的载体，例如下述实施例制备的pcambia1300-35s-gfp-slcnr。
40、上述生物材料中，所述的表达盒是指能够在宿主细胞中表达基因的dna，该dna不但可包括启动基因转录的启动子，还可包括终止基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。
41、上文中，所述核酸分子可以是dna，如cdna、基因组dna或重组dna；所述核酸分子也可以是rna，如mrna、sirna、shrna、sgrna、mirna或反义rna。
42、本文中，术语“同一性”指与天然序列的序列相似性。同一性可以用计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。
43、上述应用中，调控cnr蛋白含量的物质可为敲除cnr蛋白的编码基因的物质和/或调控cnr蛋白的编码基因表达的物质。
44、上述应用中，调控cnr基因表达的物质可为进行如下6种调控中至少一种调控的物质：1)在所述基因转录水平上进行的调控；2)在所述基因转录后进行的调控(也就是对所述基因的初级转录物的剪接或加工进行的调控)；3)对所述基因的rna转运进行的调控(也就是对所述基因的mrna由细胞核向细胞质转运进行的调控)；4)对所述基因的翻译进行的调控；5)对所述基因的mrna降解进行的调控；6)对所述基因的翻译后的调控(也就是对所述基因翻译的蛋白质的活性进行调控)。
45、上述应用中，调控cnr基因表达可为抑制或降低cnr基因表达，所述抑制或降低所述基因表达可通过基因敲除实现或通过基因沉默实现。
46、所述基因敲除(gene knockout)是通过dna序列的改变使特定靶基因失活。
47、所述基因沉默是指在不损伤原有dna的情况下使基因不表达或低表达的现象。基因沉默以不改变dna序列为前提，使基因不表达或低表达。基因沉默可本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.调控CNR基因表达或调控CNR蛋白含量的物质在如下任一中的应用：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述调控植物果实角质层形成为调控植物果实角质层厚度。
3.CNR基因、CNR蛋白或CNR基因的相关生物材料在如下任一中的应用：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述调控植物果实角质层形成为调控植物果实角质层厚度。
5.根据权利要求1-4所述的应用，其特征在于：
6.根据权利要求1-4所述的应用，其特征在于：
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述相关生物材料为下述任一种：
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：
9.根据权利要求1-8任一所述的应用，其特征在于：所述植物为茄科植物、番茄属植物或番茄。
【技术特征摘要】
1.调控cnr基因表达或调控cnr蛋白含量的物质在如下任一中的应用：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述调控植物果实角质层形成为调控植物果实角质层厚度。
3.cnr基因、cnr蛋白或cnr基因的相关生物材料在如下任一中的应用：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述调控植物果实角质层形成为调控植物果实角质层厚度...
【专利技术属性】
技术研发人员：曲桂芹，王烶宇，陈笛，张巧丽，陈雪，朱鸿亮，曹建康，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：
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