【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学成分分析，具体涉及一种水芫花化学成分的检测方法。
技术介绍
1、水芫花(学名:pemphis acidula j.r.et forst.)是千屈菜科、水芫花属多分枝小灌木有时成小乔木状，其具有千屈菜科植物中独特的二型花往，对于研究异型花柱植物的形成和演化具有重要意义。因此，水芫花有重要的保护价值和深入研究意义。水芫花提取物富含多糖、黄酮等多种化学成分，具有体外抗氧化，抑菌，抗炎以及抗肿瘤等多种生物活性，其药用及保健价值逐渐引起人们的关注。本研究采用uplc-q-tof-ms技术对水芫花提取物中化学成分进行分析，采用电喷雾离子源(esi)，在正负离子模式下扫描采集数据，利用unifi科学信息系统，结合相关文献数据，对各主要色谱峰进行归属，快速定性其主要化学组成，为进一步对水芫花的生理活性物质的研究提供参考，为科学合理的进行水芫花保护提供基础依据。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种水芫花化学成分的检测方法，能够有效分离和鉴定水芫花中的化学成分。
2、本专利技术的第一个方面是提供一种水芫花化学成分的检测方法，以水芫花为检测对象，采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱进行测定。
3、超高效液相色谱的条件为：
4、色谱柱为100mm×2.1mm，1.8μm waters acquity uplc hss t3色谱柱；柱温：38-42℃；体积流量：0.2-0.4ml/min；流动相：流动相a为体积浓度0
5、0～2min，99％→92％流动相a，1％→8％流动相b；
6、2～7min，92％→84％流动相a，8％→16％流动相b；
7、7～10min，84％→80％流动相a，16％→20％流动相b；
8、10～11min，80％→64％流动相a，20％→36％流动相b；
9、11～14min，64％→24％流动相a，36％→76％流动相b；
10、14～15min，24％→1％流动相a，76％→99％流动相b；
11、15～19min，1％流动相a，99％流动相b；
12、19～20min，1％→99％流动相a，99％→1％流动相b；
13、20～23min，99％流动相a，1％流动相b。
14、其中，在采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱进行测定前，将检测对象采用醇提取，所述醇优选为甲醇和/或乙醇。
15、优选地，所述柱温为40℃。
16、优选地，所述体积流量为0.25-0.35ml/min，更优选为0.3ml/min。
17、优选地，流动相a为流动相a为体积浓度0.08-0.12％甲酸水溶液，更优选为体积浓度0.1％甲酸水溶液。
18、优选地，流动相b为体积浓度0.008-0.012％甲酸乙腈溶液，优选为体积浓度0.01％甲酸乙腈溶液。
19、其中，质谱仪的质谱条件为：质谱仪的质谱条件为：采用电喷雾离子源(esi)，在正、负离子条件下采集mse数据。
20、优选地，质谱仪的质谱条件还包括：扫描范围m/z 50～1200，扫描时间0.2s，检测时间20min；低能量碰撞电压(ce)6v，高能量碰撞电压为20～60v；正、负离子模式的毛细管电压分别为3.8kv和2kv，锥孔电压为45v，离子源温度为120℃，辅助喷雾电离与去溶剂气体为高纯度n2，去溶剂化温度350℃，锥孔气体流量50l·h-1，正、负离子模式的去溶剂化气体流量分别为650l·h-1和600l·h-1。
21、采用本专利技术的检测方法能够从水芫花中鉴定出50个化合物，其中包括21个黄酮类化合物，12个三萜类化合物，10个原花青素类成分，3个环烯醚萜，2个酚酸和2个其他类型结构，鉴定结果见表1，化合物结果见图3和图4。
22、本专利技术的第二个方面是提供一种水芫花化学成分的分离方法，以水芫花为分离对象，采用超高效液相色谱进行分离。
23、超高效液相色谱的条件为：
24、色谱柱为100mm×2.1mm，1.8μm waters acquity uplc hss t3色谱柱；柱温：38-42℃；体积流量：0.2-0.4ml/min；流动相：流动相a为体积浓度0.05-0.15％甲酸水溶液；流动相b为体积浓度0.005-0.015％甲酸乙腈溶液；梯度洗脱，洗脱梯度如下：
25、0～2min，99％→92％流动相a，1％→8％流动相b；
26、2～7min，92％→84％流动相a，8％→16％流动相b；
27、7～10min，84％→80％流动相a，16％→20％流动相b；
28、10～11min，80％→64％流动相a，20％→36％流动相b；
29、11～14min，64％→24％流动相a，36％→76％流动相b；
30、14～15min，24％→1％流动相a，76％→99％流动相b；
31、15～19min，1％流动相a，99％流动相b；
32、19～20min，1％→99％流动相a，99％→1％流动相b；
33、20～23min，99％流动相a，1％流动相b。
34、其中，在采用超高效液相色谱进行分离前，将分离对象采用醇提取，所述醇优选为甲醇和/或乙醇。
35、优选地，所述柱温为40℃。
36、优选地，所述体积流量为0.25-0.35ml/min，更优选为0.3ml/min。
37、优选地，流动相a为流动相a为体积浓度0.08-0.12％甲酸水溶液，更优选为体积浓度0.1％甲酸水溶液。
38、优选地，流动相b为体积浓度0.008-0.012％甲酸乙腈溶液，优选为体积浓度0.01％甲酸乙腈溶液。
39、采用本专利技术的分离方法，能够从水芫花中分离出68个化合物。
40、本专利技术的第三个方面是提供一种化合物的制备方法，所述化合物为下述表格中化合物的一种或几种：
41、
42、
43、
44、采用超高效液相色谱从水芫花中分离得到，超高效液相色谱的条件为：
45、色谱柱为100mm×2.1mm，1.8μm waters acquity uplc hss t3色谱柱；柱温：38-42℃；体积流量：0.2-0.4ml/min；流动相：流动相a为体积浓度0.05-0.15％甲酸水溶液；流动相b为体积浓度0.005-0.015％甲酸乙腈溶液；梯度洗脱，洗脱梯度如下：
46、0～2min，99％→92％流动相a，1％→8％流动相b；
47、2～7min，92％→84％流动相a，8％→16本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种水芫花化学成分的检测方法，其特征在于，以水芫花为检测对象，采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱进行测定；
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱进行测定前，将检测对象采用醇提取，所述醇优选为甲醇和/或乙醇。
3.根据权利要求1或2所述的化学成分检测方法，其特征在于，超高效液相色谱的条件中，所述柱温为40℃；所述体积流量为0.25-0.35mL/min，优选为0.3mL/min；流动相A为体积浓度0.08-0.12％甲酸水溶液，优选为体积浓度0.1％甲酸水溶液；流动相B为体积浓度0.008-0.012％甲酸乙腈溶液，优选为体积浓度0.01％甲酸乙腈溶液。
4.根据权利要求1所述的化学成分检测方法，其特征在于，质谱仪的质谱条件为：采用电喷雾离子源(ESI)，在正、负离子条件下采集MSE数据；
5.一种水芫花化学成分的分离方法，其特征在于，以水芫花为分离对象，采用超高效液相色谱进行分离；
6.根据权利要求5所述的分离方法，其特征在于，在采用超高效液相色谱进行分离前，
7.根据权利要求5或6所述的分离方法，其特征在于，超高效液相色谱的条件中，所述柱温为40℃；所述体积流量为0.25-0.35mL/min，优选为0.3mL/min；流动相A为体积浓度0.08-0.12％甲酸水溶液，优选为体积浓度0.1％甲酸水溶液；流动相B为体积浓度0.008-0.012％甲酸乙腈溶液，优选为体积浓度0.01％甲酸乙腈溶液。
8.一种化合物的制备方法，其特征在于，所述化合物为下述表格中化合物的一种或几种：
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，在采用超高效液相色谱进行分离前，将分离对象采用醇提取，所述醇优选为甲醇和/或乙醇。
10.根据权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，超高效液相色谱的条件中，所述柱温为40℃；所述体积流量为0.25-0.35mL/min，优选为0.3mL/min；流动相A为体积浓度0.08-0.12％甲酸水溶液，优选为体积浓度0.1％甲酸水溶液；流动相B为体积浓度0.008-0.012％甲酸乙腈溶液，优选为体积浓度0.01％甲酸乙腈溶液。
...【技术特征摘要】
1.一种水芫花化学成分的检测方法，其特征在于，以水芫花为检测对象，采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱进行测定；
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱进行测定前，将检测对象采用醇提取，所述醇优选为甲醇和/或乙醇。
3.根据权利要求1或2所述的化学成分检测方法，其特征在于，超高效液相色谱的条件中，所述柱温为40℃；所述体积流量为0.25-0.35ml/min，优选为0.3ml/min；流动相a为体积浓度0.08-0.12％甲酸水溶液，优选为体积浓度0.1％甲酸水溶液；流动相b为体积浓度0.008-0.012％甲酸乙腈溶液，优选为体积浓度0.01％甲酸乙腈溶液。
4.根据权利要求1所述的化学成分检测方法，其特征在于，质谱仪的质谱条件为：采用电喷雾离子源(esi)，在正、负离子条件下采集mse数据；
5.一种水芫花化学成分的分离方法，其特征在于，以水芫花为分离对象，采用超高效液相色谱进行分离；
6.根据权利要求5所述的分离方法，其特征在于，在采用超高效液相色谱进行分离前，将分...
【专利技术属性】
技术研发人员：羊青，王茂媛，王清隆，王祝年，晏小霞，李英英，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：
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