一种表达外源基因的番茄褪绿病毒载体及构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种表达外源基因的番茄褪绿病毒载体及构建方法和应用，表达外源基因的番茄褪绿病毒载体以pCass‑RZ‑ToCV‑RNA2载体为骨架，以CP promoter I‑外源基因‑CP promoter II序列替换骨架中Afl II和Nco I酶切位点之间的序列，所述CPpromoter I和II的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术表达外源基因的番茄褪绿病毒载体可用于病毒的标记及示踪，并用于筛选抗番茄褪绿病毒的有效基因。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域和作物分子生物学，具体涉及一种表达外源基因的番茄褪绿病毒载体及构建方法和应用。

技术介绍

1、茄果类蔬菜是重要的蔬菜作物，但是病毒病制约着茄果类蔬菜的安全生产。近年来，番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus，tocv)引起的番茄褪绿病在世界多地发生，并呈逐年递增的趋势发展蔓延。tocv首次于2004年在中国台湾被报道，之后传播扩散，给番茄、辣椒等茄果类蔬菜产业带来巨大损失。

2、tocv是长线形病毒科(closteroviridae)毛形病毒属(crinivirus)成员，由两条正义单链rna组成，且rna1和rna2被包裹在不同的病毒粒子中。rna1包含4个开放阅读框，编码与病毒复制和基因沉默抑制相关的蛋白。rna2包含9个开放阅读框，编码与病毒粒子的组装、胞间移动和介体传播相关蛋白。tocv可以通过粉虱、嫁接的方式传播，不能通过汁液摩擦、种子传播。

3、感染tocv的番茄首先在下部叶片出现脉间褪绿症状，后逐渐蔓延至整个植株，果实大小和质量降低，感染tocv的辣椒典型症状为植株矮化，果本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达外源基因的番茄褪绿病毒载体，其特征在于，所述表达外源基因的番茄褪绿病毒载体以pCass-RZ-ToCV-RNA2载体为骨架，以CP promoter I-外源基因-CP promoterII序列替换骨架中Afl II和Nco I酶切位点之间的序列，所述CP promoter I和II的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的表达外源基因的番茄褪绿病毒载体，其特征在于，所述外源基因选自荧光蛋白基因；

3.一种工程菌，其特征在于，所述工程菌含有权利要求1或2所述表达外源基因的番茄褪绿病毒载体；

4.权利要求1所述表达外...

【技术特征摘要】

1.一种表达外源基因的番茄褪绿病毒载体，其特征在于，所述表达外源基因的番茄褪绿病毒载体以pcass-rz-tocv-rna2载体为骨架，以cp promoter i-外源基因-cp promoterii序列替换骨架中afl ii和nco i酶切位点之间的序列，所述cp promoter i和ii的核苷酸序列如seq id no.3所示。

2.根据权利要求1所述的表达外源基因的番茄褪绿病毒载体，其特征在于，所述外源基因选自荧光蛋白基因；

3.一种工程菌，其特征在于，所述工程菌含有权利要求1或2所述表达外源基因的番茄褪绿病毒载体；

4.权利要求1所述表达外源基因的番茄褪绿病毒载体或权利要求3所述工程菌在筛选抗番茄褪绿病毒有效基因中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用的方法为：将含有权利要求1所述表达外源基因的番茄褪绿病毒载体和pcass-rz-tocv-rna1载体的农杆菌侵染茄科植物，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘思佳，刘学东，鄢秦臧，连毅，周涛，谢利娟，
申请(专利权)人：深圳职业技术大学，
类型：发明
国别省市：