【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，尤其涉及一种供体构建体、用于修饰细胞基因组的组合物及修饰细胞基因组的方法。
技术介绍
1、基因敲入(gene knock-in)是指利用随机整合、转座子系统及同源重组等方式将外源功能基因或片段插入到基因组中，使其在细胞内持续发挥功能的技术。它是研究基因功能、实现基因稳定过表达的一种有效工具。早期的基因敲入主要通过随机整合或转座子系统整合到宿主基因组中，这种敲入方式随机性较强，很容易引起其它基因功能的丧失，同时插入的拷贝数和位置不固定，因此同一来源的细胞系中不同的细胞间表达差异比较明显，不利于控制基因的表达水平及功能研究。利用crispr-cas基因组编辑系统可以实现外源基因的精确定点敲入，使遗传背景更为简单，实验操作更加精准、高效。
2、然而，crispr-cas基因组编辑系统的递送仍然是治疗开发的瓶颈。目前，腺相关病毒(aav)载体是基因治疗递送的主要平台，但其免疫原性和/或细胞毒性使得其具有安全风险。并且，病毒载体价格昂贵，对生产、制造以及供应都有较高的要求，一定程度上限制了基因治疗的应用。
<...【技术保护点】
1.一种供体构建体，其特征在于，所述供体构建体包括至少一种供体模板；
2.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述供体DNA单链模板为单链线性同源定向修复模板；
3.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点的个数为一个或至少两个。
4.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点可结合一种或至少两种转录因子。
5.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点位于和/或接近所述供体DNA单链模板的5'末端，和/或所述转录因子结合位点位于和/或接近所述供...
【技术特征摘要】
1.一种供体构建体，其特征在于，所述供体构建体包括至少一种供体模板；
2.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述供体dna单链模板为单链线性同源定向修复模板；
3.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点的个数为一个或至少两个。
4.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点可结合一种或至少两种转录因子。
5.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点位于和/或接近所述供体dna单链模板的5'末端，和/或所述转录因子结合位点位于和/或接近所述供体dna单链模板的3'末端。
6.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点位于和/或接近所述供体dna单链模板的5'末端。
7.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点位于或接近所述供体dna单链模板的3'末端。
8.根据权利要求1至7中任意一项所述的供体构建体，其特征在于，所述具有转录因子识别基序的dna单链序列和与所述具有转录因子识别基序的dna单链序列形成双链的反向互补多核苷酸单链序列杂交；
9.根据权利要求8所述的供体构建体，所述杂交为不完全互补，所述杂交的数量为一个或至少两个。
10.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述具有转录因子识别基序的dna单链序列和与所述具有转录因子识别基序的dna单链序列形成双链的反向互补多核苷酸单链序列形成一个或至少两个发夹。
11.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述供体模板包含所述供体dna单链模板，位于和/或靠近所述供体dna单链模板3'末端的第一具有转录因子识别基序的dna单链序列，以及位于和/或靠近所述供体dna单链模板5'末端的第二具有转录因子识别基序的dna单链序列，所述第一具有转录因子识别基序的dna单链序列和所述第二具有转录因子识别基序的dna单链序列互补。
12.根据权利要求1所述的供体构建体，其特征在于，所述转录因子结合位点由转录因子识别，所述转录因子选自p53、atf4、atf3、atf2、nr4a2、yap、taz、ar、nrf2、nrf1、atf6、c/ebp、creb、egr1、cbf(nf-y)、er、gata、gr、hsf-1、mtf-1、gli、hnf4、hif-1a、irf1、stat1、stat2、klf4、lxr、srf、elk-1、ap-1、mef2、c-myc、nanog、rbp-jk、nf-κb、oc...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁峻彬，徐辉，梅志超，欧家裕，
申请(专利权)人：广州瑞风生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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