【技术实现步骤摘要】
本披露涉及crispr基因编辑领域，具体涉及一种cas蛋白及其应用。
技术介绍
1、crispr-cas系统是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御，可用来对抗入侵的病毒及外源dna。成簇规律间隔的短回文重复序列（crispr）和crispr相关蛋白系统（crispr-cas系统）可直接在细胞中对基因序列进行更改，是一种快速、有效的方法。
2、本领域的很多研究人员都在致力于寻找新的cas蛋白及crispr-cas基因编辑系统。
技术实现思路
1、本专利技术提供了cas蛋白及其应用。
2、在一方面，本专利技术提供的一个技术方案为：一种cas蛋白，所述cas蛋白的氨基酸序列包含或为与seq id no: 1或2相比具有至少50％同一性的氨基酸序列。
3、在本专利技术的具体实施方案中，所述至少50％同一性为至少55％、至少60%、至少65％、至少70%、至少75％、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、至少99.1%、至少99.2%、至少99.3%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%同一性。
4、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列包含或为与seq id no:1或2相比具有至少55％、至少60%、至少65％、至少70%、至少75％、
5、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列包含或为与seq id no:1、2中任一项相比具有100%同一性的氨基酸序列。
6、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列包含seq id no: 1、2、9、10中任一项所示序列。
7、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列如seq id no: 1所示。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列如seq id no: 2所示。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列如seq id no: 9所示。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白的氨基酸序列如seq id no: 10所示。
8、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna形成复合物。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna特异性结合至靶核酸。
9、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna形成复合物。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna特异性结合至靶核酸。
10、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna形成复合物，所述复合物可特异性结合至靶核酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna形成复合物，所述复合物可特异性结合至靶dna。
11、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna特异性结合并切割靶核酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna特异性结合并切割靶dna。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna形成复合物，所述复合物可特异性结合并切割靶核酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可与指导rna形成复合物，所述复合物可特异性结合并切割靶dna。
12、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白可识别序列为5'-ttn-3'的pam，所述n任选自a、t、c和g。
13、在本专利技术的一些实施方案中，所述cas蛋白为cas蛋白失活变体。在本专利技术的一些实施方案中，所述cas蛋白失活变体为dead cas或nickase cas。
14、在本专利技术的一些实施方案中，所述cas蛋白选自构成本专利技术任一项所述cas蛋白的活性片段。
15、在另一方面，本专利技术提供的一个技术方案为：一种指导rna，其包含(i)同向重复序列，所述同向重复序列与seq id no: 3或4相比具有至少50%同一性，(ii)工程化以与靶核酸杂交的指导序列；所述同向重复序列与所述指导序列连接，所述指导rna能够与cas蛋白形成复合物并指导所述复合物与所述靶核酸的序列特异性结合。
16、在本专利技术的一些实施方案中，所述同向重复序列与seq id no: 3或4所示序列相比具有至少50%同一性。
17、在本专利技术的一些实施方案中，所述同向重复序列与seq id no: 3或4相比具有至少55％、至少60%、至少65％、至少70%、至少75％、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性。
18、在本专利技术的一些实施方案中，所述同向重复序列为seq id no: 3或4所示序列。
19、在优选的实施方案中，所述cas蛋白为本专利技术所述的cas蛋白。
20、在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15-60个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15-50个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15-40个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15-35个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15-30个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15-25个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含18-25个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含20-25个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含18-22个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含20-22个核苷酸。在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列包含15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个或40个核苷酸。
21、在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列位于所述同向重复序列的3'端。
22、在本专利技术的具体实施方案中，所述指导序列位于所述同向重复序列的5'端。
23、在另一方面，本专利技术提供的一个技术方案为：一种cas蛋白失活变体，其特征在于，所述cas蛋白失活变体为如本专利技术所述的cas蛋白的核酸酶活性失活变体。
24、在本专利技术的具体实施方案中，所述cas蛋白失活变体为核酸酶活性完全失活的变体，即dead cas蛋白失活变体（dcas）。所述dcas只能在本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种Cas蛋白，其特征在于，所述Cas蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示。
2.一种指导RNA，其特征在于，其包含
3. 一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包含以下元件：
4.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1所述的Cas蛋白或如权利要求3所述的融合蛋白。
5. 一种CRISPR-Cas系统，其特征在于，所述CRISPR-Cas系统包含：
6.如权利要求1所述的Cas蛋白、如权利要求3所述的融合蛋白、如权利要求4所述的核酸或如权利要求5所述的CRISPR-Cas系统在制备用于诊断、治疗或预防疾病的药物中的用途。
【技术特征摘要】
1.一种cas蛋白，其特征在于，所述cas蛋白的氨基酸序列如seq id no: 1所示。
2.一种指导rna，其特征在于，其包含
3. 一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包含以下元件：
4.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1所述的cas蛋白或如权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁峻彬，陈重建，孙阳，潘伟业，徐辉，黄连成，
申请(专利权)人：广州瑞风生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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