【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业微生物，具体涉及一株有效促进丹参生长和提高丹参品质的内生假单胞菌属细菌c145及其应用。
技术介绍
1、假单胞菌为直或稍弯的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于自然界，如土壤、水、食物和空气中。目前假单胞菌在农业领域内的应用和对植物生长影响的研究较多，但是有关于假单胞菌作用于中药材的研究较为缺乏。
2、中国是药用植物资源最丰富的国家之一，中药材的品质受到药用植物品种、土壤、气候因子、农艺措施、采收加工贮藏等因素的影响。丹参是双子叶植物唇形科鼠尾草属多年生直立草本植物，该种根入药，含丹参酮，为强壮性通经剂，有祛瘀、活血等效用。在人工栽培条件下，由于药田生态环境中生物群落多样性差、丰富度低，病虫害优势种群突出，常常发生严重的病虫危害，导致药材产量下降，品质变劣。而且随着医疗行业对丹参需求的增加，丹参种植面积不断扩大。然而，由于环境因素对药用植物的生长存在一定的制约性，适合丹参栽培的土地面积十分有限，导致道地产区逐渐开始出现连作障碍，也会导致药材产量下降，品质变劣。
3、植物内生菌是指在植物生命周期内存在于植物体中的非致病性的微生物，目前已被发现的内生菌有200多个属，约100多万个种。内生菌不会对宿主产生不利影响，在植物病害控制、次生代谢物合成、植物生长调节和抗逆性等方面发挥着重要作用。内生菌可以通过吸收水分养分，诱导产生激素、铁载体和抗菌次生代谢物，调节脯氨酸含量，提高抗氧化酶活性等一系列措施促进植物生长。因此，本专利技术利用从健康丹参根内筛选到的功能型细菌假单胞菌，研究了其对丹参种苗生长及大田丹参
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于针对生产实践中的实际问题和需求，提供一株有效促进丹参生长和提高丹参品质的内生假单胞菌属细菌c145及其应用。
2、本专利技术的目的可通过以下技术方案实现：
3、本专利技术第一方面提供了一株内生假单胞菌属细菌c145，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年11月22日，保藏编号为cgmcc no.29111。
4、本专利技术第二方面提供了上述内生假单胞菌属细菌c145制备的菌剂。
5、进一步地，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.29111的内生假单胞菌属细菌c145进行液体发酵，发酵结束后离心获得菌体，用无菌水重悬菌体，得到菌悬液。
6、更进一步地，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.29111的内生假单胞菌属细菌c145接种于液体培养基中进行液体发酵，所述液体培养基包括tsb液体培养基、lb液体培养基或r2a液体培养基，液体发酵条件为：温度28-30℃，转速170-200r·min-1，发酵时间1-2d；发酵结束后离心获得菌体，用无菌水重悬菌体，得到菌悬液，菌悬液中菌含量≥1×109cfu/ml。
7、本专利技术第三方面提供了上述内生假单胞菌属细菌c145在促进丹参生长、提高丹参品质中的应用，促进丹参生长包括提高丹参种苗质量、提高丹参产量；提高丹参品质包括提高丹参药性成分含量，所述丹参药性成分包括丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa、丹参新酮、丹酚酸a、丹酚酸b。
8、本专利技术第四方面提供了上述菌剂在栽培丹参高质量种苗中的应用。
9、进一步地，应用时，将丹参种子埋于育苗基质中，待丹参种子发芽一段时间后两次施入所述菌剂，每次施入量为≥1×107cfu/g干重育苗基质，两次施入间隔时间为10-14天。
10、本专利技术第五方面提供了上述菌剂在提高丹参产量和药性成分含量中的应用，所述药性成分包括丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa、丹参新酮、丹酚酸a、丹酚酸b。
11、进一步地，应用时，以腐熟有机肥作为基肥，丹参移栽后一段时间两次施入所述菌剂，每次施入量为≥1×1010cfu/株丹参，两次施入间隔时间为15-20天。
12、本专利技术的有益效果：
13、本专利技术通过在丹参的道地产区大尺度采集长势健壮和长势差的丹参，提取其根内的dna进行高通量测序，得到测序结果后，分析长势健壮和长势差丹参的微生物群落差异，发现假单胞菌属细菌为长势健壮丹参微生物群落中的关键细菌之一。用涂布分离的方法从丹参根内分离细菌，经分子生物学鉴定后，得到若干株假单胞菌属细菌及其他菌株，经试验验证，其中一株内生假单胞菌属细菌可以有效促进丹参的生长，并将其命名为c145。
14、本专利技术筛选到的内生假单胞菌属细菌c145能够有效促进丹参生长和提高丹参品质。与添加清水对照相比，在向每克干重育苗基质中添加1×107 cfu的内生假单胞菌属细菌c145后，显著促进了丹参种苗的生长，生长指标测定（叶片长宽、茎粗、株高）均有显著体现，提高了丹参种苗的质量。大田试验表明，加入内生假单胞菌属细菌c145菌剂，有效提高了丹参的产量和药性成分含量（丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa、丹参新酮、丹酚酸a、丹酚酸b）。
15、本专利技术筛选到的内生假单胞菌属细菌c145对丹参有促生作用，并且可以提高丹参的品质，对丹参的生产和专用生物有机肥的研制有指导意义。
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1.一株内生假单胞菌属细菌C145，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年11月22日，保藏编号为CGMCC NO.29111。
2.权利要求1所述的内生假单胞菌属细菌C145制备的菌剂。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为CGMCC NO.29111的内生假单胞菌属细菌C145进行液体发酵，发酵结束后离心获得菌体，用无菌水重悬菌体，得到菌悬液。
4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为CGMCC NO.29111的内生假单胞菌属细菌C145接种于液体培养基中进行液体发酵，所述液体培养基包括TSB液体培养基、LB液体培养基或R2A液体培养基，液体发酵条件为：温度28-30℃，转速170-200r·min-1，发酵时间1-2d；发酵结束后离心获得菌体，用无菌水重悬菌体，得到菌悬液，菌悬液中菌含量≥1×109CFU/mL。
5.权利要求1所述的内生假单胞菌属细菌C145在促进丹参生长、提高丹参品质中的应用，促进丹
6.权利要求2-4任一权利要求所述的菌剂在栽培丹参高质量种苗中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，应用时，将丹参种子埋于育苗基质中，待丹参种子发芽一段时间后两次施入所述菌剂，每次施入量为≥1×107CFU/g干重育苗基质，两次施入间隔时间为10-14天。
8.权利要求2-4任一权利要求所述的菌剂在提高丹参产量和药性成分含量中的应用，所述药性成分包括丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参新酮、丹酚酸A、丹酚酸B。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，应用时，以腐熟有机肥作为基肥，丹参移栽后一段时间两次施入所述菌剂，每次施入量为≥1×1010CFU/株丹参，两次施入间隔时间为15-20天。
...【技术特征摘要】
1.一株内生假单胞菌属细菌c145，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年11月22日，保藏编号为cgmcc no.29111。
2.权利要求1所述的内生假单胞菌属细菌c145制备的菌剂。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.29111的内生假单胞菌属细菌c145进行液体发酵，发酵结束后离心获得菌体，用无菌水重悬菌体，得到菌悬液。
4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.29111的内生假单胞菌属细菌c145接种于液体培养基中进行液体发酵，所述液体培养基包括tsb液体培养基、lb液体培养基或r2a液体培养基，液体发酵条件为：温度28-30℃，转速170-200r·min-1，发酵时间1-2d；发酵结束后离心获得菌体，用无菌水重悬菌体，得到菌悬液，菌悬液中菌含量≥1×109cfu/ml。
<...【专利技术属性】
技术研发人员：李荣，潘如斌，沈其荣，沈宗专，郭赛，王瑞雪，
申请(专利权)人：南京农业大学三亚研究院，
类型：发明
国别省市：
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