一种盖塔病毒质粒载体、弱毒株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种盖塔病毒质粒载体、弱毒株及其制备方法和应用。本发明专利技术制备的盖塔病毒重组弱毒株对乳鼠和仔猪的毒力显著减弱，不引起任何临床症状，并且引入的突变设计具有良好的遗传稳定性，10代以内未恢复到野生型基因组表型，可以用于盖塔病毒减毒活疫苗的制备中，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，尤其涉及一种盖塔病毒质粒载体、弱毒株及其制备方法和应用。

技术介绍

1、盖塔病毒（getah virus，getv）一直在动物中流行，近几年的流行病学研究显示，getv的流行趋势逐渐上升，危害越来越严重。getv严重影响马和猪的健康，感染马后主要表现一过性发热和后肢肿胀。而感染妊娠母猪则可能引起流产和垂直传播，新生仔猪感染后常引起严重的腹泻、后肢瘫痪甚至死亡。

2、虽然在养殖动物中危害严重，且具有潜在的公共卫生风险。但我国目前仍没有商品化的疫苗来防控这一疾病。灭活疫苗通常需要2次甚至更多次的加强免疫才能达到理想的免疫效果。这加大了猪群的应激反应，并提升了养殖的人力成本。随着反向遗传学技术的快速发展，通过直接修饰病毒基因组而产生的弱毒株具有更高的安全性，因为其通常依赖于大片段的基因修饰亦或协同突变，而不仅仅依赖于少量的点突变所造成的毒力衰减。此外，基于cdna克隆衍生的弱毒株可以通过在基因组中插入外源病毒基因序列，有望进一步开发重组二价疫苗。因此，对于getv防控而言，单剂量的减毒活疫苗更具应用前景，急需研制一种安全性高、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种质粒载体，其特征在于，所述质粒载体含有nsP3突变蛋白的编码基因和Cap突变蛋白的编码基因，其中，所述nsP3突变蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述Cap突变蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的质粒载体，其特征在于，所述质粒载体以pSM-GETV-HNFL为骨架质粒，所述pSM-GETV-HNFL的序列如SEQ ID NO.3所示。

3.根据权利要求2所述的质粒载体，其特征在于，所述质粒载体的序列如SEQ ID NO.4所示。

4.一种盖塔病毒弱毒株的制备方法，其特征在于，将权利要求1-3任一...

【技术特征摘要】

1.一种质粒载体，其特征在于，所述质粒载体含有nsp3突变蛋白的编码基因和cap突变蛋白的编码基因，其中，所述nsp3突变蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示；所述cap突变蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的质粒载体，其特征在于，所述质粒载体以psm-getv-hnfl为骨架质粒，所述psm-getv-hnfl的序列如seq id no.3所示。

3.根据权利要求2所述的质粒载体，其特征在于，所述质粒载体的序列如seq id no.4所示。

4.一种盖塔病毒弱毒株的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：粟硕，姜智文，邢刚，秦颖，
申请(专利权)人：南京农业大学三亚研究院，
类型：发明
国别省市：