【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学与生物能源领域，具体地涉及一种改变大肠杆菌脂肪酸组 成的方法，使工程大肠杆菌胞内不饱和脂肪酸的含量增加，由此制备的生物柴油更适合实 际应用。
技术介绍
柴油作为一种重要的石油炼制产品，在各国燃料结构中占有较高的份额，已成为 重要的动力燃料。面临石油储量的不断减少、能源需求的不断增长以及化石燃料引起的 环境污染问题，开发新的、对环境无害的、非石油类的可再生资源是未来能源发展的主题思 路。生物柴油是生物质能的一种形式，其主要成分是脂肪酸甲酯，被国际可再生能源界誉为 最具发展前景的替代油品，也是柴油发动机燃料的最佳替代品，其对柴油的替代有助于降 低化石燃料对环境的影响，与普通柴油相比，可减少90%的空气毒性。在世界性能源危机的 背景下，生物柴油已经成为时代的新宠，受到多方关注。传统的生物柴油生产工艺是以油料作物、野生油料植物以及动物油脂、餐饮垃圾 油等为原料通过酯交换反应从而制成脂肪酸甲酯。但利用植物油为原料成本高，其成本占 到总生产成本的70% -85%，而以餐饮废弃油为原料，也存在原料难以收集和运输困难等 问题，这些都严重制约了生物柴油的产...
【技术保护点】
一种改变大肠杆菌细胞脂肪酸组成的方法，主要步骤如下： ａ）将编码大肠杆菌β－羟基癸酰－ＡＣＰ脱水酶（ＦａｂＡ）和β－酮脂酰－ＡＣＰ合成酶Ｉ（ＦａｂＢ）的基因重组到表达质粒启动子的下游，转化大肠杆菌细胞，获得工程大肠杆菌菌株； ｂ）将工程大肠杆菌按体积比０．５－１．５％的接种量接种到４００－５００ｍＬ含５０μｇ·ｍＬ↑［－１］卡那霉素的ＬＢ液体培养液中，在３５－３７℃和２００－２５０ｒｐｍ的条件下振荡培养至ＯＤ↓［６００］约为０．６－０．８，加入诱导剂ＩＰＴＧ至终浓度０．１↑［－１］ｍｍｏｌ·Ｌ↑［－１］，继续培养３－２４小时，离心收集菌体； ｃ）菌体采用１－２ｍＬ去离...
【技术特征摘要】
一种改变大肠杆菌细胞脂肪酸组成的方法，主要步骤如下a)将编码大肠杆菌β 羟基癸酰 ACP脱水酶(FabA)和β 酮脂酰 ACP合成酶I(FabB)的基因重组到表达质粒启动子的下游，转化大肠杆菌细胞，获得工程大肠杆菌菌株；b)将工程大肠杆菌按体积比0.5 1.5％的接种量接种到400 500mL含50μg·mL 1卡那霉素的LB液体培养液中，在35 37℃和200 250rpm的条件下振荡培养至OD600约为0.6 0.8，加入诱导剂IPTG至终浓度0.1 1mmol·L 1，继续培养3 24小时，离心收集菌体；c)菌体采用1 2mL去离子水悬浮，然后加入5 10mL氯仿/甲醇(体积比2∶1)，涡旋震荡3 ...
【专利技术属性】
技术研发人员：咸漠，曹玉锦，杨建明，刘炜，徐鑫，孟鑫，
申请(专利权)人：青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：95
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