System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽及其深度精制方法和应用技术_技高网

一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽及其深度精制方法和应用技术

技术编号:41209820 阅读:3 留言:0更新日期:2024-05-09 23:32
本发明专利技术公开了一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽及其深度精制方法和应用。本发明专利技术通过对干制的大黄鱼鱼鳔进行预处理、系统性免疫原性清除、限制性酶解、有机膜分子量逐层筛分、基于重组3D皮肤模型的抗衰老功能定向筛选、包装及灭菌,得到一种大黄鱼鳔低聚肽。所述深度精制方法制备的大黄鱼鳔低聚肽的肽段分子量小、总蛋白含量高、端肽清除率高、且纯度高、免疫原性低、无皮肤刺激性,还能有效地保护人皮肤细胞的氧化损伤以及对光老化细胞具有显著保湿作用,进而起到延缓衰老的作用抗衰老活性高。因此,大黄鱼鳔低聚肽能够从内源性及外源性两方面综合发挥抗衰功效,为鱼鳔低聚肽护肤品及医美产品的开发提供物质基础和技术保证。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于原料制备,具体涉及一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽及其深度精制方法和应用


技术介绍

1、随着生活水平不断提高和技术的发展,人类寿命在逐渐延长,老龄化现象也日趋严重。皮肤作为人体的外部器官,是机体抵御外界刺激的第一道防线,更易受到外部侵袭损伤老化。皮肤衰老(skin aging)也称为皮肤老化,是皮肤组织在内外环境的不断作用下细胞结构和功能发生退化,出现皮肤质地改变(如弹性、张力、厚薄及表面纹理等)、色素改变、血管萎缩或增生的生理现象。皮肤衰老通常分为内源性老化(自然衰老)和外源性老化(光老化等)。为了保持年轻的肌肤状态,越来越多的消费者开始关注具有抗衰老功效的功能产品。

2、大黄鱼(larimichthys crocea)是石首鱼科、黄鱼属鱼类,在其生产加工过程中会产生大量副产物,鱼鳔就是其中一种重要的副产物。鱼鳔中含有丰富的营养物质,包括蛋白质、多糖、无机盐及维生素,鱼鳔中含量最高的蛋白质包括胶原蛋白、肌原纤维蛋白、弹性蛋白及糖蛋白等,其中胶原蛋白、弹性蛋白等蛋白是多种护肤活性肽的良好材料来源。糖蛋白含有表面抗原,会引起过敏等免疫原反应。蛋白酶酶解技术已被广泛应用于鱼鳔、鱼皮等海洋生物组织为原料的海洋生物肽的制备中,但现有的蛋白酶解技术却存在酶切位点不确定、水解程度不可控、制得活性肽在混合肽中占比低、活性成分特异性低及糖蛋白和内毒素等过高的问题。因此,在医药、化妆品等领域中,低免疫原性、高护肤活性海洋活性肽的制备成为近年来学者和相关从业者的关注,对抗衰老等特定功效和活性肽的需求也越发迫切。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽及其深度精制方法和应用。本专利技术以富含胶原蛋白的大黄鱼鱼鳔为原料,通过基于免疫原去除技术、内毒素清除技术的系统性免疫原去除手段、基于体外重组3d皮肤模型与有机膜分子量逐层筛分技术、活性肽功能定向筛选制备技术的合理配合,有效除去大黄鱼鱼鳔天然组织中的免疫原性物质,实现特定抗光老化及抗皱功效的高活性肽段的综合定向筛选,优选出了一种免疫原性低、安全性好,并能够从内源性及外源性两方面综合发挥抗衰功效的大黄鱼鳔低聚肽及其深度精制技术。、为实现上述专利技术目的,本专利技术予采用的技术方案如下:

2、本专利技术提供了一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽的深度精制方法,其包括以下步骤:

3、(1)取鱼鳔清洗、泡发,然后加入表面抗原去除液搅拌,搅拌结束后使用纯水清洗鱼鳔表皮,匀浆,得到除去端肽、表面糖蛋白及内毒素的鱼鳔匀浆;

4、(2)在所述步骤(1)的鱼鳔匀浆中加入纯水,再加入菠萝蛋白酶酶解,得到鱼鳔低聚肽酶解液;

5、(3)将所述步骤(2)的鱼鳔低聚肽酶解液过膜,然后加入活性炭脱色,离心收集上清并超滤至鱼鳔低聚肽酶解液澄清透明,得到鱼鳔低聚肽脱色液;

6、(4)将所述步骤(3)的鱼鳔低聚肽脱色液使用有机膜进行纳滤,收集得到鱼鳔低聚肽过膜液;

7、(5)将所述步骤(4)的鱼鳔低聚肽过膜液进行脱盐,收集得到鱼鳔低聚肽脱盐液;

8、(6)将所述步骤(5)的鱼鳔低聚肽脱盐液经冷冻干燥、包装、辐照,得到鱼鳔低聚肽。

9、进一步的,所述步骤(1)中表面抗原去除液与鱼鳔的表皮的液料比为15:1-30:1;加入表面抗原去除液的搅拌温度为2-8℃,搅拌时间为4-12h。

10、进一步的,所述表面抗原去除液是由浓度为0.5-1.5%的脱氧胆酸钠、浓度为0.05-0.10mol/l的磷酸二氢钠和酶活力为80-240u/g胃蛋白,混合配制而成的。

11、进一步的,所述步骤(2)中菠萝蛋白酶的添加量为2000-4000u/g,其酶解温度为45-50℃,酶解时间为200-360min。

12、进一步的,所述步骤(3)中活性炭的粒径位60-120目,其添加量为所述鱼鳔低聚肽酶解液体积的0.3%-0.5%,脱色温度为50-65℃,脱色时间为30-50min。

13、进一步的,所述步骤(3)中超滤采用的是100μm的陶瓷膜,陶瓷膜分离实验机的运行温度为20-25℃,压力为0.30mpa-0.38mpa,流速为27-45ml/min。

14、进一步的,所述步骤(4)中纳滤使用的是700da的有机纳滤膜,有机膜分离实验机的压力为0.21mpa-0.26mpa,流速为27-45ml/min,温度为20-25℃;当过膜液体体积与未过膜液体积达到5:1时,停止有机膜实验机工作,收集得到鱼鳔低聚肽过膜液。

15、进一步的,所述步骤(5)中脱盐使用的是200da的有机纳滤膜,有机膜分离实验机的压力为0.21mpa-0.26mpa,流速为30-60ml/min,温度为20-25℃。

16、进一步的,所述鱼鳔为大黄鱼鱼鳔。

17、本专利技术还提供了所述的深度精制方法制备得到的鱼鳔低聚肽,其蛋白含量高于91%,重均分子量<1kda。

18、本专利技术还提供了所述的鱼鳔低聚肽在制备具有抗衰老和/或保湿功效的化妆品和/或护肤品中的应用。

19、与现有技术相比,本专利技术的优点和有益效果是:

20、1、本专利技术首次以大黄鱼鱼鳔为原料,针对性的对高抗衰老活性鱼鳔肽进行了筛选,综合抗光老化、抗氧化等多因素筛选高活性抗衰老肽段,得到了一种大黄鱼鱼鳔来源的免疫原性低、综合抗衰老活性高的鱼鳔肽的深度精制方法,该方法简单、高效,操作性强。

21、2、本专利技术在传统酶解制备过程中针对原料大黄鱼鳔中蛋白质的结构组成特点,引入合理的系统性免疫原去除手段,能够有效除去鱼鳔天然组织中存在的内毒素及端肽等免疫原性物质,降低免疫原性,提高生物安全性,使其更适于化妆品的应用;并通过体外重组3d皮肤模型与有机膜分子量逐层筛分技术的合理配合,达到特定抗光老化及抗皱功效的高活性肽段的综合定向筛选,优选出具有高抗衰老活性大黄鱼鳔低聚肽段;且在免疫原清除剂清除过程中,能够较好提升活性肽品质,进一步获得颜色纯白、流动性好、活性更高的大黄鱼鳔低聚肽。

22、3、本专利技术的深度精制方法制备的大黄鱼鳔低聚肽的肽段分子量小、总蛋白含量高、端肽清除率高、且纯度高、免疫原性低、无皮肤刺激性,还能有效地保护人皮肤细胞的氧化损伤以及对光老化细胞具有显著保湿作用,进而起到延缓衰老的作用抗衰老活性高。因此,大黄鱼鳔低聚肽能够从内源性及外源性两方面综合发挥抗衰功效,为鱼鳔低聚肽护肤品、化妆品及医美产品的开发提供物质基础和技术保证。

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【技术保护点】

1.一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽的深度精制方法,其特征在于:包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(1)中表面抗原去除液与鱼鳔的表皮的液料比为15:1-30:1;加入表面抗原去除液的搅拌温度为2-8℃,搅拌时间为4-12h。

3.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述表面抗原去除液是由浓度为0.5-1.5%的脱氧胆酸钠、浓度为0.05-0.10mol/L的磷酸二氢钠和酶活力为80-240U/g胃蛋白,混合配制而成的。

4.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(2)中菠萝蛋白酶的添加量为2000-4000U/g,其酶解温度为45-50℃,酶解时间为200-360min。

5.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(3)中活性炭的粒径位60-120目,其添加量为所述鱼鳔低聚肽酶解液体积的0.3%-0.5%,脱色温度为50-65℃,脱色时间为30-50min。

6.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(3)中超滤采用的是100μm的陶瓷膜,陶瓷膜分离实验机的运行温度为20-25℃,压力为0.30MPa-0.38MPa,流速为27-45mL/min。

7.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(4)中纳滤使用的是700Da的有机纳滤膜,有机膜分离实验机的压力为0.21MPa-0.26MPa,流速为27-45mL/min,温度为20-25℃;当过膜液体体积与未过膜液体积达到5:1时,停止有机膜实验机工作,收集得到鱼鳔低聚肽过膜液。

8.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(5)中脱盐使用的是200Da的有机纳滤膜,有机膜分离实验机的压力为0.21MPa-0.26MPa,流速为30-60mL/min,温度为20-25℃。

9.权利要求1-8任一项所述的深度精制方法制备得到的鱼鳔低聚肽,其特征在于:所述鱼鳔低聚肽的蛋白含量高于91%,重均分子量<1kDa。

10.权利要求9所述的鱼鳔低聚肽在制备具有抗衰老和/或保湿功效的化妆品和/或护肤品中的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种具有抗皮肤衰老功效的鱼鳔低聚肽的深度精制方法,其特征在于:包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(1)中表面抗原去除液与鱼鳔的表皮的液料比为15:1-30:1;加入表面抗原去除液的搅拌温度为2-8℃,搅拌时间为4-12h。

3.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述表面抗原去除液是由浓度为0.5-1.5%的脱氧胆酸钠、浓度为0.05-0.10mol/l的磷酸二氢钠和酶活力为80-240u/g胃蛋白,混合配制而成的。

4.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(2)中菠萝蛋白酶的添加量为2000-4000u/g,其酶解温度为45-50℃,酶解时间为200-360min。

5.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特征在于:所述步骤(3)中活性炭的粒径位60-120目,其添加量为所述鱼鳔低聚肽酶解液体积的0.3%-0.5%,脱色温度为50-65℃,脱色时间为30-50min。

6.根据权利要求1所述的深度精制方法,其特...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙彦庆刘楚怡李福臣杜芬朱宗敏李八方尚丽丽付雪媛
申请(专利权)人:青岛黛优佳生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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