一种表达PRRS病毒GP5-M蛋白的重组病毒及制备方法和应用技术

本发明专利技术属于基因重组及疫苗技术领域，公开了一种表达PRRS病毒GP5‑M蛋白的重组病毒及制备方法和应用。本发明专利技术以PRV变异株三基因缺失株PRV‑eGFP为病毒载体，以gIgE基因为插入靶点，设计能够融合表达GP5‑M蛋白的转移载体PUC19‑gIgE‑GP5‑M、敲除质粒pX459‑eGFP‑SgRNA1、pX459‑eGFP‑SgRNA2，利用同源重组原理及基因编辑技术将PRV‑eGFP的eGFP基因替换为PRRSV GP5‑M基因；经噬斑纯化，构建获得重组病毒PRV‑GP5‑M。该重组病毒具有良好遗传稳定性、安全性，易于培养增殖。可用于预防近些年流行的PRRSV和PRV毒株的感染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因重组及疫苗，具体涉及一种表达prrs病毒gp5-m蛋白的重组病毒及制备方法和应用。

技术介绍

1、猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，prrs）是广泛存在于养猪业的重要病毒性传染病，给养猪业造成了巨大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus， prrsv）是该病的病原。2013年和2014年，出现了一种重组prrsv nadc30-like毒株，该毒株是由北美prrsv nadc30毒株与我国本地毒株重组的产物。与其他prrsv株不同，prrsv nadc30-like毒株具有高重组率，其能够与经典prrsv株和高致病性prrsv株在内的其他prrsv株发生重组。疫苗接种是预防和控制传染病的最有效和最实用的方法，由于prrs的反复暴发和新的prrsv变异株的出现，目前，我国广泛使用的六种商业prrsv疫苗：ch-1r，jxa1p80，hun4-f112，gdr180，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种人工修饰合成的猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV GP5-M基因，其特征在于，所述PRRSV GP5-M基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种转移载体，其特征在于，所述转移载体含有如权利要求1所述的PRRSV GP5-M基因，所述转移载体被命名为PUC19-gIgE-GP5-M。

3.一种如权利要求2所述的转移载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的转移载体的制备方法，其特征在于，还包括采用同源臂引物GM-F和GM-R扩增PRRSV GP5-M基因；

5.一种表达PRRS病毒GP5-M蛋白的...

【技术特征摘要】

1.一种人工修饰合成的猪繁殖与呼吸综合征病毒prrsv gp5-m基因，其特征在于，所述prrsv gp5-m基因的核酸序列如seq id no.1所示。

2.一种转移载体，其特征在于，所述转移载体含有如权利要求1所述的prrsv gp5-m基因，所述转移载体被命名为puc19-gige-gp5-m。

3.一种如权利要求2所述的转移载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的转移载体的制备方法，其特征在于，还包括采用同源臂引物gm-f和gm-r扩增prrsv gp5-m基因；

5.一种表达prrs病毒gp5-m蛋白的重组病毒，其特征在于，所述重组病毒被命名为prv-gp5-m，所述重组病毒prv-gp5-m由权利要求2至4任一项所述的转移载体puc19-gige-gp5...

【专利技术属性】
技术研发人员：颜其贵，孙珊珊，李强，张白玉，付萍，彭茜翎，余佩伦，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：