衣壳变体及其使用方法技术

技术编号：41196925 阅读：5 留言：0更新日期：2024-05-07 22:25

本公开部分地涉及可用于递送有效载荷的变体衣壳多肽。

全部详细技术资料下载

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

技术介绍

1、依赖性细小病毒，例如腺相关依赖性细小病毒，例如腺相关病毒(aav)，作为用于将各种有效载荷递送至细胞(包括在人类受试者中)的载体而受到关注。

技术实现思路

1、本公开部分地提供了改进的变体依赖性细小病毒衣壳蛋白(例如aav2变体衣壳多肽)、如vp1、vp2和/或vp3，产生依赖性细小病毒的方法，用于其的组合物，以及由其产生的病毒颗粒。在一些实施例中，与衣壳蛋白中没有突变的病毒颗粒相比，所产生的病毒颗粒具有增加的肝脏转导。

2、在一些实施例中，本公开部分地涉及包含编码如本文所提供的变体衣壳蛋白的序列的核酸。在一些实施例中，依赖性细小病毒是腺相关依赖性细小病毒(aav)。在一些实施例中，aav是aav2，例如变体aav2。

3、在一些实施例中，本公开部分地涉及本文所述的衣壳多肽。

4、在一些实施例中，本公开部分地涉及一种变体衣壳多肽，其包含与seq id no:2或seq id no:3的vp1、vp2或vp3序列具有至少70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99％或100％同一性的多肽。在一些实施例中，多肽包含seq id no:1的变体，其中变体衣壳多肽包含对应于在与seq id no:1相比的35、36、37、38、39、42、51、61、70、449、450、451、452、455、456、458、459或其任意组合中的一个或多个位置处的突变的突变，任选地其中突变包括插入、缺失或取代。</p>

5、在一些实施例中，本公开部分地涉及包含本文所述的核酸的依赖性细小病毒颗粒。

6、在一些实施例中，本公开部分地涉及包含本文所述的核酸的载体，例如质粒。

7、在一些实施例中，本公开部分地涉及核酸分子，该核酸分子包含seq id no:4或5的序列，其片段，或其与其具有至少70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100％序列同一性的变体。

8、在一些实施例中，本公开部分地涉及包含本文所述的核酸(例如，包含编码衣壳多肽，如vp1的序列的核酸)的依赖性细小病毒颗粒，其中编码序列包含如本文所提供的改变或突变。

9、在一些实施例中，本公开部分地涉及包含本文所述的核酸(例如包含编码衣壳多肽(例如vp1多肽)的序列的核酸)的载体，其中编码序列包含如本文所提供的改变或突变。

10、在一些实施例中，本公开部分地涉及细胞、无细胞体系或其他翻译体系，其包含本文所述的核酸或载体，该核酸或载体例如包含编码衣壳多肽(如vp1)的序列，其中衣壳多肽编码序列在编码序列中包含如本文所提供的改变或突变。在一些实施例中，细胞、无细胞体系或其他翻译体系包含本文所述的依赖性细小病毒颗粒，例如，其中该颗粒包含核酸，该核酸包含编码衣壳多肽(如vp1多肽)的序列，其中编码序列包含如本文所提供的改变或突变。

11、在一些实施例中，本公开部分地涉及包含本文所述的多肽的细胞、无细胞体系或其他翻译体系，其中多肽编码序列包含如本文所提供的改变或突变。在一些实施例中，细胞、无细胞体系或其他翻译体系包含本文所述的依赖性细小病毒颗粒，例如，其中该颗粒包含核酸，该核酸包含编码vp1多肽的序列，其中vp1编码序列包含如本文所提供的相应的改变或突变。

12、在一些实施例中，本公开部分地涉及一种将有效载荷递送至细胞的方法，该方法包括使细胞与包含本文所述的核酸的依赖性细小病毒颗粒接触。在一些实施例中，本公开部分地涉及一种将有效载荷递送至细胞的方法，该方法包括使细胞与包含本文所述的衣壳多肽的依赖性细小病毒颗粒接触。

13、在一些实施例中，本公开部分地涉及一种制备依赖性细小病毒颗粒的方法，该方法包括：提供细胞、无细胞体系或其他翻译体系，其包含本文所述的核酸(例如，包含编码如本文所提供的aav2衣壳变体的序列的核酸)；以及在适合于产生依赖性细小病毒颗粒的条件下培养细胞、无细胞体系或其他翻译体系，从而制备依赖性细小病毒颗粒。在一些实施例中，本公开部分地涉及一种制备本文所述的依赖性细小病毒颗粒的方法。

14、在一些实施例中，本公开部分地涉及一种制备依赖性细小病毒颗粒的方法，该方法包括：提供细胞、无细胞体系或其他翻译体系，其包含本文所述的多肽；以及在适合于产生依赖性细小病毒颗粒的条件下培养细胞、无细胞体系或其他翻译体系，从而制备依赖性细小病毒颗粒。在一些实施例中，本公开部分地涉及一种制备本文所述的依赖性细小病毒颗粒的方法。

15、在一些实施例中，本公开部分地涉及在细胞、无细胞体系或其他翻译体系中制备的依赖性细小病毒颗粒，其中该细胞、无细胞体系或其他翻译体系包含编码依赖性细小病毒的核酸，该依赖性细小病毒包含如本文所提供的衣壳变体。

16、在一些实施例中，本公开部分地涉及一种治疗受试者的疾病或病症的方法，该方法包括以有效治疗疾病或病症的量向受试者施用本文所述的依赖性细小病毒颗粒。

17、进一步参考以下编号的实施例描述本专利技术。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种变体衣壳多肽，其包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的VP1、VP2或VP3序列具有至少70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99％或100％同一性的多肽。

2.根据权利要求1所述的变体衣壳多肽，其中变体是与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的多肽相同的血清型。

3.根据权利要求1所述的变体衣壳多肽，其中变体与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的多肽相比是不同的血清型。

4.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述多肽包含SEQ ID NO:1的变体，其中所述变体衣壳多肽包含对应于在与SEQ ID NO:1相比的35、36、37、38、39、42、51、61、70、449、450、451、452、455、456、458、459或其任意组合中的一个或多个位置处的突变的突变，任选地其中所述突变包括插入、缺失或取代。

5.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含：

6.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣

7.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与SEQ ID NO:1相比的选自449至459的任一位置或其任意组合处的突变的突变。

8.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与SEQ ID NO:1相比的位置35、36、37、38、39、42、51、61和70处的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个或所有突变的突变。

9.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与SEQ ID NO:1相比的位置449、450、451、452、455、456、458和459处的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个或所有突变的突变。

10.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含与SEQID NO:1相比的A35N、E36Q、R37Q、H38K、K39Q、S42A、K51N、K61R和A70E中的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个或所有突变。

11.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含在与SEQID NO:1相比的N449Q、T450S、P451G、S452G、T455A、T456A、S458D和R459Q中的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个或所有突变。

12.一种变体衣壳多肽，其包含：(a)SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3中任一者的多肽；(b)包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3中任一者的VP2或VP3序列；(c)包含与其具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一性的序列的多肽，其中相对于SEQID NO:1，所述序列包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3中任一者相关的突变差异中的至少一者(例如，一者、两者、三者或更多者，例如全部)；或(d)相对于(a)或(b)的所述多肽，具有至少1个、但不超过20个、不超过19个、不超过18个、不超过17个、不超过16个、不超过15个、不超过14个、不超过13个、不超过12个、不超过12个、不超过11个、不超过10个、不超过9个、不超过8个、不超过7个、不超过6个、不超过5个、不超过4个、不超过3个或不超过2个氨基酸突变的多肽，其中相对于SEQ ID NO:1，所述多肽包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3中任一者相关的突变差异中的至少一者(例如，一者、两者、三者或更多者，例如全部)。

13.一种包含VP1、VP2或VP3或其任意组合的变体衣壳多肽，其各自与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的多肽至少或约95、96、97、98或99％相同，任选地其中所述变体衣壳多肽包含与SEQ ID NO:2和/或SEQ ID NO:3相关的突变差异中的全部。

14.一种包含VP1、VP2或VP3或其任意组合的变体衣壳多肽，其各自具有与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的多肽相比的约1至约20个突变，任选地其中所述变体衣壳多肽包含与SEQID NO:2和/或SEQ ID NO:3相关的突变差异中的全部。

15...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种变体衣壳多肽，其包含与seq id no:2或seq id no:3的vp1、vp2或vp3序列具有至少70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99％或100％同一性的多肽。

2.根据权利要求1所述的变体衣壳多肽，其中变体是与seq id no:2或seq id no:3的多肽相同的血清型。

3.根据权利要求1所述的变体衣壳多肽，其中变体与seq id no:2或seq id no:3的多肽相比是不同的血清型。

4.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述多肽包含seq id no:1的变体，其中所述变体衣壳多肽包含对应于在与seq id no:1相比的35、36、37、38、39、42、51、61、70、449、450、451、452、455、456、458、459或其任意组合中的一个或多个位置处的突变的突变，任选地其中所述突变包括插入、缺失或取代。

5.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含：

6.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与seq id no:1相比的选自35至70的任一位置或其任意组合处的突变的突变。

7.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与seq id no:1相比的选自449至459的任一位置或其任意组合处的突变的突变。

8.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与seq id no:1相比的位置35、36、37、38、39、42、51、61和70处的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个或所有突变的突变。

9.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含对应于在与seq id no:1相比的位置449、450、451、452、455、456、458和459处的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个或所有突变的突变。

10.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含与seqid no:1相比的a35n、e36q、r37q、h38k、k39q、s42a、k51n、k61r和a70e中的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个或所有突变。

11.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述衣壳多肽包含在与seqid no:1相比的n449q、t450s、p451g、s452g、t455a、t456a、s458d和r459q中的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个或所有突变。

12.一种变体衣壳多肽，其包含：(a)seq id no:2或seq id no:3中任一者的多肽；(b)包含seq id no:2或seq id no:3中任一者的vp2或vp3序列；(c)包含与其具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一性的序列的多肽，其中相对于seqid no:1，所述序列包含与seq id no:2或seq id no:3中任一者相关的突变差异中的至少一者(例如，一者、两者、三者或更多者，例如全部)；或(d)相对于(a)或(b)的所述多肽，具有至少1个、但不超过20个、不超过19个、不超过18个、不超过17个、不超过16个、不超过15个、不超过14个、不超过13个、不超过12个、不超过12个、不超过11个、不超过10个、不超过9个、不超过8个、不超过7个、不超过6个、不超过5个、不超过4个、不超过3个或不超过2个氨基酸突变的多肽，其中相对于seq id no:1，所述多肽包含与seq id no:2或seq id no:3中任一者相关的突变差异中的至少一者(例如，一者、两者、三者或更多者，例如全部)。

13.一种包含vp1、vp2或vp3或其任意组合的变体衣壳多肽，其各自与seq id no:2或seq id no:3的多肽至少或约95、96、97、98或99％相同，任选地其中所述变体衣壳多肽包含与seq id no:2和/或seq id no:3相关的突变差异中的全部。

14.一种包含vp1、vp2或vp3或其任意组合的变体衣壳多肽，其各自具有与seq id no:2或seq id no:3的多肽相比的约1至约20个突变，任选地其中所述变体衣壳多肽包含与seqid no:2和/或seq id no:3相关的突变差异中的全部。

15.一种包含vp1、vp2或vp3或其任意组合的变体衣壳多肽，其各自具有与seq id no:2或seq id no:3的多肽相比的约1至约10个突变，任选地其中所述变体衣壳多肽包含与seqid no:2和/或seq id no:3相关的突变差异中的全部。

16.一种包含vp1、vp2或vp3或其任意组合的变体衣壳多肽，其各自具有与seq id no:2或seq id no:3的多肽相比的约1至约5个突变，任选地其中所述变体衣壳多肽包含与seqid no:2和/或seq id no:3相关的突变差异中的全部。

17.一种变体衣壳多肽，其包含seq id no:2或seq id no:3的vp1、vp2或vp3序列。

18.一种变体衣壳多肽，其由seq id no:2或seq id no:3的vp1、vp2或vp3序列组成。

19.根据前述权利要求中任一项所述的变体衣壳多肽，其中所述变体衣壳多肽为vp1多肽、vp2多肽或vp3多肽。

20.一种核酸分子，其编码根据权利要求1至19中任一项所述的衣壳变体...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·拉潘，H·莱维汀，
申请(专利权)人：迪诺治疗公司，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人