【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体涉及菌株bacillus velezensis hs-3及其培养该菌株的培养基和应用。
技术介绍
1、随着人口的增加，人类对食物的需求日益增长。植物病原体和害虫导致农业生产重大损失。对于一些关键作物，植物病害可能导致产量减少21％至30％。在过去的几十年中，农药的广泛使用导致土壤健康逐渐恶化，土壤微生物群落也受到了影响。作为化学控制的替代方案，由假单胞菌属(pseudomonas spp.)、芽孢杆菌属(bacillus spp.)和木霉属(trichoderma sp.)领导的生物防治剂(bcas)在促进植物生长、控制叶面和根部病害方面表现出优异的能力。bcas可以通过多种机制保护植物免受伤害，如分泌次生代谢物质，如抗生素和挥发性有机化合物，与病原体竞争空间和营养，合成水解酶以降解病原体和害虫的细胞壁或结构，以及诱导植物系统性抗性。
2、芽孢杆菌属细菌由于易于分离和培养、对恶劣环境条件的适应性强、具有多种生物活性以及作为重组蛋白表达宿主的能力，在农业、医药和工业领域得到了广泛应用。作为典型的芽孢杆菌，贝莱斯芽孢杆菌(b.velezensis)可以在各种复杂环境中生存，如根际土壤、植物的地上部分、植物组织内部作为内生菌、水体和空气。根据先前的研究，贝莱斯芽孢杆菌(b.velezensis)通过合成抗微生物肽和挥发性有机化合物(vocs)、在生态位内竞争养分、分泌水解酶以及诱导植物抗性来增加植物对病害的抵抗力。此外，它还可以通过合成植物生长激素来促进作物生长。
3、番茄作为一种重要
4、目前，解决ccos的主要方法是通过科学的轮作和改善土壤。生物防治利用有益微生物、拮抗生物和生物有机材料，旨在通过促进种植多样性和调节土壤生态系统来减少ccos的负面影响。这种方法有效降低了土壤害虫和病原体的数量，增强了土壤健康，促进了养分循环和植物免疫力，从而减少了对农药的依赖，降低了生产成本。此外，通过引入有益微生物和其他生物资源，可以建立更稳定、更平衡的土壤生态系统。重要的是，生物防治不会污染或损害生态环境，有助于维持生态平衡和保护生物多样性。作为影响ccos的重要因素，根结线虫也可以被生物防治剂控制，如包括贝莱斯芽孢杆菌在内的各种真菌和细菌拮抗剂。然而，现有的贝莱斯芽孢杆菌的防治效果仍有待提升，尤其是对土传病虫害的防治。尽管利用细菌递送dsrna对病虫害进行防治的策略已有报道，但尚未见到以提升生物防治为目的的针对贝莱斯芽孢杆菌的遗传改造。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提供了菌株bacillus velezensis hs-3和遗传改造后的工程菌以及培养该菌株的培养基和应用。
2、菌株bacillus velezensis hs-3，分类命名为：bacillus velezensis，于2023年08月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cctccno.m20131563。
3、一种菌剂，所述菌剂以权利要求1所述的菌株bacillus velezensis hs-3或其遗传改造的工程菌为有效成分。
4、优选的，所述菌株bacillus velezensis hs-3的浓度为10^5-10^7cfu/ml。
5、优选的，所述工程菌是将权利要求1所述的菌株bacillus velezensis hs-3引入靶向性dsrna表达质粒而形成。
6、一种培养权利要求1所述的菌株bacillus velezensis hs-3的培养基，所述培养基以葡萄糖为碳源，以蛋白胨为氮源，添加cacl2、k2hpo4和mgso4。
7、优选的，所述培养基中葡萄糖浓度为5-20g/l，蛋白胨的浓度为5-20g/l，cacl2的浓度为10-20g/l、k2hpo4的浓度为0.5-2g/l和mgso4的浓度为0.5-2g/l。
8、优选的，该培养基培养时以lb培养基为基础培养基，培养温度为25℃，培养时间36h。
9、所述的菌株bacillus velezensis hs-3在抑制植物灰霉病中的应用。
10、优选的，所述植物为番茄。
11、所述的菌株bacillus velezensis hs-3在防控植物连作障碍中的应用。
12、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
13、本专利技术成功地从番茄根际土壤中分离出一株细菌，命名为b.velezensis hs-3，分类命名为：bacillus velezensis，于2023年08月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cctcc no.m20131563。
14、b.velezensis hs-3对botrytis cinerea具有出色的抗真菌活性。与许多先前的研究结果不同，hs-3的抗真菌机制主要不依赖于小分子脂肽类化合物，而是依赖于分子量超过3kda的分泌蛋白质。这些分泌蛋白质含有各种蛋白酶和几丁质酶，可能有助于真菌细胞壁降解和随后的抑制作用。有趣的是，尽管hs-3拥有一系列降解酶，但其无法有效地抑制具有几丁质外骨骼的线虫的生长。这可能归因于进入土壤后活性降低或与线虫接触不足。为了解决这个问题，研究引入了一个针对线虫酪氨酸磷酸酶(tp)基因的dsrna表达载体到hs-3中，并展示了其增强的抑制线虫发育的能力。这项专利技术为作物病害管理和减轻作物cco提供了新的材料和方法。
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1.菌株Bacillus velezensis HS-3，分类命名为：Bacillus velezensis，于2023年08月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CCTCCNo.M20131563。
2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂以权利要求1所述的菌株Bacillus velezensisHS-3或其改造后的工程菌为有效成分。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌株Bacillus velezensis HS-3的浓度为10^5-10^7cfu/mL。
4.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述工程菌是将权利要求1所述的菌株Bacillus velezensis HS-3引入靶向性dsRNA表达质粒而形成。
5.一种培养权利要求1所述的菌株Bacillus velezensis HS-3的培养基，其特征在于，所述培养基以葡萄糖为碳源，以蛋白胨为氮源，添加CaCl2、K2HPO4和MgSO4。
6.根据权利要求5所述的培养基，其特征在于，所述培养基中葡萄糖浓度为5-20g
7.根据权利要求6所述的培养基，其特征在于，该培养基以LB培养基为基础培养基，培养温度为25℃，培养时间36h。
8.一种权利要求1所述的菌株Bacillus velezensis HS-3在抑制植物灰霉病中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述植物为番茄。
10.一种权利要求1所述的菌株Bacillus velezensis HS-3及其工程菌在防控植物连作障碍中的应用。
...【技术特征摘要】
1.菌株bacillus velezensis hs-3，分类命名为：bacillus velezensis，于2023年08月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cctccno.m20131563。
2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂以权利要求1所述的菌株bacillus velezensishs-3或其改造后的工程菌为有效成分。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌株bacillus velezensis hs-3的浓度为10^5-10^7cfu/ml。
4.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述工程菌是将权利要求1所述的菌株bacillus velezensis hs-3引入靶向性dsrna表达质粒而形成。
5.一种培养权利要求1所述的菌株bacillus velezensis hs...
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