【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于发酵，具体涉及发酵生产古龙酸的半连续发酵工艺。
技术介绍
1、古龙酸是l-抗坏血酸(vc)的合成前体，生产工艺有葡萄糖一步发酵法、山梨醇两步发酵法两种，目前以两步发酵法为主，一步法尚未工业化。随着科研工作者对两步发酵法不断地进行深入研究，包括两菌相互关系的探索、发酵工艺的优化和现代生物技术的应用等，使两步发酵法在产量、产率和生产强度等方面不断提高。
2、古龙酸发酵技术采用分批发酵或者补料分批发酵工艺，均为分批次发酵，即每完成一批次发酵后，需要对发酵罐进行清洗、灭菌，重新进行下一批次的发酵。
3、发酵行业因无菌控制较为严格，需要每批次对发酵罐进行清洗、高温灭菌，因此蒸汽等消耗较大。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种通过葡萄糖或者山梨糖发酵生产古龙酸及其盐的半连续发酵方法。
2、为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：
3、一种生产古龙酸的半连续发酵方法，包括以下步骤：
4、(1)种子培养：在种子罐中培养微生物，采用的培养基a中各成分的质量占种子液体积的含量为：1～2％葡萄糖或山梨糖、0.1～0.5％尿素、0.1～0.5％磷酸二氢钾、1～5％玉米浆干粉，余量为水；培养温度为30～45℃，培养时间15～30h，得到种子液；
5、(2)发酵：发酵时采用的培养基b各成分的质量占发酵液体积的含量为：12±1％葡萄糖或山梨糖、1.0％玉米浆干粉、0.5％尿素、0.1％磷酸
6、将所述的种子液加入发酵罐，种子液接种量为发酵液体积的2～10％，发酵罐内发酵液占发酵罐体积的80～85％；
7、发酵过程中检测葡萄糖或山梨糖的浓度，待发酵液中葡萄糖或山梨糖浓度低于5g/l时，从发酵罐中放出发酵液总量20～50％的发酵液，送下游提取工序进行维生素c的生产；
8、(3)以发酵罐中剩余的发酵液作为菌种，补加葡萄糖或山梨糖料液，继续发酵，补充的料液体积与步骤(2)中放出的发酵液相当。
9、所述微生物为生酮基古龙酸杆菌和巨大芽胞杆菌的混合，两种菌的质量比为1:1，接种量为培养基a的0.2～1％。
10、步骤(1)种子培养过程中的通气量为0.3vvm。
11、步骤(2)发酵过程中采用30±5％的碳酸钠溶液调节发酵液的ph，ph控制在5.0～5.5之间；发酵温度为30～45℃。
12、发酵时的ph值为5；发酵温度为32℃。
13、步骤(2)的发酵在有氧条件下进行，通气量为0.2～1.0vvm，发酵罐的压力控制在0.02～0.05mpa。
14、本专利技术有益效果：
15、本专利技术的半连续发酵，发酵结束后保留部分发酵液作为种液，继续加入营养物质进行发酵，相比于单批发酵可以提高发酵罐的单批产量和利用率，降低单位产量的蒸汽消耗，降低生产成本。
16、试验表明，相比单批发酵古龙酸产量提高了53.16％，且发酵指数与单批发酵相比没有降低，在相同的蒸汽消耗下，提高了古龙酸的单批产量，该方法具有较好的应用和推广价值。
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1.一种生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，所述微生物为生酮基古龙酸杆菌和巨大芽胞杆菌的混合，两种菌的质量比为1:1，接种量为培养基A的0.2～1％。
3.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，步骤(1)种子培养过程中的通气量为0.3vvm。
4.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，步骤(2)发酵过程中采用30±5％的碳酸钠溶液调节发酵液的pH，pH控制在5.0～5.5之间；发酵温度为30～45℃。
5.根据权利要求4所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，发酵时的pH值为5；发酵温度为32℃。
6.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，步骤(2)的发酵在有氧条件下进行，通气量为0.2～1.0vvm，发酵罐的压力控制在0.02～0.05Mpa。
【技术特征摘要】
1.一种生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，所述微生物为生酮基古龙酸杆菌和巨大芽胞杆菌的混合，两种菌的质量比为1:1，接种量为培养基a的0.2～1％。
3.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法，其特征在于，步骤(1)种子培养过程中的通气量为0.3vvm。
4.根据权利要求1所述的生产古龙酸的半连续发酵方法...
【专利技术属性】
技术研发人员：尹双耀，朱腾跃，史立军，张静，汪红兵，杨拓，胡永丽，刘辉，李明月，郑婷婷，邹兴刚，张清河，刘宾，董昱良，
申请(专利权)人：新拓洋生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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