【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物发酵，具体涉及一种发酵法生产dha的方法。
技术介绍
1、二十二碳六烯酸(dha)属于多不饱和脂肪酸，相对分子质量为328.49，熔点为-44℃，沸点为447℃，常温下为液态，为无色至微黄色油脂状液体，不溶于水，但溶于有机溶剂。dha易氧化，天然的dha以其酯类的形式存在，如甲酯型、乙酯型、甘油三酯型以及卵磷脂型等，经人体吸收后，代谢成dha。
2、dha具有十分重要的生理功能，是人体自身不能大量合成但又不可缺少的重要营养素。dha大量存在于人体视网膜及大脑皮层的神经组织中，有促进脑部及视力发育，提高智力，改善记忆力和视力的作用；此外，它还能阻止胆固醇在血管壁上沉积，预防或减轻动脉粥样硬化及冠心病的发生。
3、传统dha的生产途径主要来源于深海鱼油的提取纯化，而深海鱼油资源十分有限，生产成本高，品质不稳定，产量远不能满足市场需求，且近年来海洋环境遭到严重破坏，使其安全性受到严重质疑，迫切需要寻找一种可规模化生产dha的新途径。目前，已发现一些低等海洋细菌、海洋真菌和微藻类，如希瓦氏菌、破囊壶菌、裂殖壶菌、寇氏隐甲藻等都能合成dha。由于微生物具有生长快、营养要求低、且易于进行大规模培养等特点，成为规模化生产dha的首选途径。
4、现有的关于微生物发酵生产dha的相关，如中国专利技术专利cn 101307341 b公开的“生物酶法破壁用于二十二碳六烯酸油脂生产方法”、中国专利技术专利cn 101638361a公开的“一种从裂殖壶菌提取并精制富含二十二碳六烯酸的方法”、中国专利技
5、因此，一种工艺流程更加简单，并能够避免碱的消耗，能够实现资源循环利用的dha油脂的制备方法，则是现有亟待解决的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种发酵法生产dha的方法，以解决的现有的制备工艺流程复杂，同时碱炼脱酸的过程中消耗了大量的碱，不便于资源的节约与循环利用的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种发酵法生产dha的方法，其特征在于，包括以下步骤：
3、s1、取富含dha油脂的微生物发酵液，离心、过滤，得菌体湿品；
4、s2、向s1得到的菌体湿品中添加正己烷，搅拌超声条件下进行破碎，而后加热至沸腾，向其中加入热水，继续搅拌，而后静置弃去水相，得dha油脂的正己烷溶液；
5、s3、向s2得到的dha油脂的正己烷溶液中添加脱色剂，脱色后过滤，得到脱色液；
6、s4、向s3得到的脱色液中添加一定量的乙醇、水，组成乙醇-水-正己烷的三元共沸体系，向共沸体系中加入固定化脂肪酶，缓慢补加乙醇-正己烷混合液，维持共沸条件下蒸干溶剂，过滤，即可得到dha油脂。
7、进一步地，所述的s1中，发酵液包括但不限于裂殖壶菌以及寇氏隐甲藻的发酵液。
8、进一步地，所述的s2中，正己烷与菌体湿品的质量比为5～10:1。
9、进一步地，所述的s2中，超声的强度为15～20khz，时间为20～30min。
10、进一步地，所述的s2中，热水的温度为60～80℃，热水与正己烷的体积比为1～2:1。
11、进一步地，所述的s2中，加入热水后的搅拌时间为20～30min，而后静置20～40min。
12、进一步地，所述的s3中，脱色剂为活性炭与白土的混合物，活性碳与白土的质量比为1:1～1.5，脱色剂添加量为dha油脂的正己烷溶液质量的5～10％，搅拌强度为200～400r/min，处理时间为1～2h。
13、进一步地，所述的s4中，乙醇、水以及正己烷的体积比为10～12：2～3：85～90，控制体系的温度为56℃。
14、进一步地，所述的s4中，固定化脂肪酶为南极假丝酵母属脂肪酶。
15、进一步地，所述的s4中，补加的乙醇-正己烷混合液中，乙醇与正己烷的体积比为10～12:85～90，溶剂的蒸干时间控制在2～4h。
16、本专利技术的有益效果：
17、1、本专利技术制备方法更加的简单，去除了复杂的溶剂萃取以及后处理过程，便于工业生产；
18、2、本专利技术制备方法摒弃了传统的碱炼脱酸的过程，避免了碱的大量消耗，采用乙醇-水-正己烷三元共沸蒸馏的方法，去除游离脂肪酸，保证了产品质量的同时，所使用的溶剂经过处理后能够循环利用，便于资源的节约。
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1.一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S1中，发酵液包括但不限于裂殖壶菌以及寇氏隐甲藻的发酵液。
3.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S2中，正己烷与菌体湿品的质量比为5～10:1。
4.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S2中，超声的强度为15～20KHz，时间为20～30min。
5.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S2中，热水的温度为60～80℃，热水与正己烷的体积比为1～2:1。
6.根据权利要求5所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S2中，加入热水后的搅拌时间为20～30min，而后静置20～40min。
7.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S3中，脱色剂为活性炭与白土的混合物，活性碳与白土的质量比为1:1～1.5，脱色剂添加量为DHA油脂的正己烷溶液质量的5～
8.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S4中，乙醇、水以及正己烷的体积比为10～12：2～3：85～90，控制体系的温度为56℃。
9.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S4中，固定化脂肪酶为南极假丝酵母属脂肪酶。
10.根据权利要求1所述的一种发酵法生产DHA的方法，其特征在于：所述的S4中，补加的乙醇-正己烷混合液中，乙醇与正己烷的体积比为10～12:85～90，溶剂的蒸干时间控制在2～4h。
...【技术特征摘要】
1.一种发酵法生产dha的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种发酵法生产dha的方法，其特征在于：所述的s1中，发酵液包括但不限于裂殖壶菌以及寇氏隐甲藻的发酵液。
3.根据权利要求1所述的一种发酵法生产dha的方法，其特征在于：所述的s2中，正己烷与菌体湿品的质量比为5～10:1。
4.根据权利要求1所述的一种发酵法生产dha的方法，其特征在于：所述的s2中，超声的强度为15～20khz，时间为20～30min。
5.根据权利要求1所述的一种发酵法生产dha的方法，其特征在于：所述的s2中，热水的温度为60～80℃，热水与正己烷的体积比为1～2:1。
6.根据权利要求5所述的一种发酵法生产dha的方法，其特征在于：所述的s2中，加入热水后的搅拌时间为20～30min，而后静置20～40...
【专利技术属性】
技术研发人员：史小利，张建国，史立军，崔凤霞，杨林，陈宏战，贾德坡，秦天苍，陈黎，杜永斌，金亨利，陈高明，史政豪，朱腾跃，刘杉，刘银霞，
申请(专利权)人：新拓洋生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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