【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于乳酸菌，具体涉及一种乳酸菌的高密度培养方法。
技术介绍
1、乳酸菌是一种益生菌，其能够将碳水化合物发酵成乳酸，因而得名。乳酸菌分布广泛，通常存在于肉、乳和蔬菜等食品及其制品中。此外，乳酸菌也广泛存在于畜、禽肠道及少数临床样品中，其中，在人类和其他哺乳动物的口腔、肠道等环境中的乳酸菌，是构成特定区域正常微生物菌群的重要成员，乳酸菌是发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌，其包含许多种属，大多数乳酸菌不运动，少数以周毛运动，菌体常排列成链。乳酸链球菌族，菌体球状，通常成对或成链。乳酸杆菌族，菌体杆状，单个或成链，有时成丝状，产生假分枝，普通的乳酸菌，活力极弱，它们只能在相对受限制的环境中存活，一旦脱离这些环境，其自身就会遭到灭亡，从分类上而言，乳酸菌作为真细菌纲目中的乳酸细菌科，形态上可分成球菌、杆菌。其中，球形乳酸菌包括链球菌、明串珠菌属、片球菌；杆状菌包括乳球菌、乳杆菌、双歧杆菌等；从生长温度上而言，可分成高温型、中温型；从发酵类型而言，可分成同型发酵、异型发酵；从来源上分，大体上可分为动物源乳酸菌和植物源乳酸菌。
2、现有的益生菌培养方法采用通用培养基对益生菌进行统一培养，不便于根据菌株特性、培养目的和所需产物的特性确定培养基成分和配方，不利于提高培养效果和产量，且菌株纯度不稳当，乳酸菌的品质及活性不佳，为此我们提出一种乳酸菌的高密度培养方法来解决上述问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种乳酸菌的高密度培养方法，能够根据菌株
2、本专利技术采取的技术方案具体如下：
3、一种乳酸菌的高密度培养方法，所述培养方法包括以下步骤：
4、步骤1.确定培养基成分和配方；
5、步骤2.培养基的配制和调整；
6、步骤3.灭菌和无菌操作；
7、步骤4.种子菌的准备；
8、步骤5.接种操作；
9、步骤6.控制培养条件；
10、步骤7.培养时间和方式；
11、步骤8.分离和收获菌体；
12、步骤9.菌体处理和保存。
13、在一种优选方案中，所述确定培养基成分和配方为考虑菌株的特性、培养的目的和所需产物的特性，所述培养基成分为碳源、氮源、无机盐、水分，所述碳源为葡萄糖、乳糖、麦芽糖中的一种或多种，所述氮源为酵母膏、酵母提取物、肉膏中的一种或多种，所述无机盐为磷酸盐、硫酸盐、氯化物中的一种或多种，添加辅助成分包括维生素、激素，以促进菌体的生长和代谢产物的产量。
14、在一种优选方案中，所述培养基的配制和调整为按照培养基配方，在蒸馏水中逐个加入各种成分，确保溶解均匀，通过添加ph缓冲剂来调节和稳定培养基的ph值，添加抗氧化剂或防腐剂，以保持培养基的稳定性。
15、在一种优选方案中，所述灭菌和无菌操作为将配制好的培养基装入培养容器，所述培养容器为培养瓶、试管、培养皿中的一种或多种，并进行高压灭菌处理，以121℃高压蒸汽灭菌20-30分钟，在操作过程中，需要确保无菌操作，使用无菌操作台、无菌手套和其他无菌器皿，以避免细菌和真菌的污染。
16、在一种优选方案中，所述种子菌的准备为挑选纯净的种子菌液作为培养的起始菌株，提前将种子菌液预培养一夜，以增强其活性，在活化种子菌液后，进行菌种的鉴定和纯化，以确保选用的菌株是目标乳酸菌。
17、在一种优选方案中，所述接种操作为在培养基中加入适量的活化种子菌液，摇匀均匀涂布在培养容器中，确保接种的菌液均匀分布，避免菌落的局部过浓或过稀，控制接种量，过少的接种量会导致菌体生长缓慢，过多的接种量能会导致菌落过于密集，影响氧气和营养物的供应，进而影响菌体的生长和产量。
18、在一种优选方案中，所述控制培养条件为调节培养的温度和氧气，所述乳酸菌在适宜的温度下生长，适宜温度为35-40°c，所述氧气供应通过控制摇床速度、通气量和培养容器的形状来调节，以提供适宜的氧气供应，厌氧乳酸菌选择厌氧培养条件。
19、在一种优选方案中，所述培养时间和方式为确定培养时间及培养方式，所述培养时间是根据具体乳酸菌菌种和需求来确定，乳酸菌的培养时间为24-48小时，对于一些慢生长或特殊需求的乳酸菌，培养时间需要更长的持续时间，所述培养过程中进行适时的取样和监测，通过观察菌体生长曲线、ph值的变化和代谢产物的积累情况，判断最佳的收获时机。
20、在一种优选方案中，所述分离和收获菌体为在高密度培养结束后，通过离心机或滤膜将菌体与培养基分离，将沉淀的菌体用无菌物质冲洗，去除残留的培养基，并采用适当的浓缩方法将菌体得到一定浓度，使用微孔滤膜或离心机以去除残余的培养基和其他杂质。
21、在一种优选方案中，所述菌体处理和保存为将收获的菌体用于进一步的处理和利用，所述处理方法为冷冻保存、干燥保存、冷冻干燥中的一种或多种，在保存过程中，保证菌体的无菌状态，并使用适宜的保存条件和容器。
22、本专利技术取得的技术效果为：
23、根据菌株特性、培养目的和所需产物的特性来确定培养基成分和配方，能够满足不同菌株的需求，提高培养效果和产物产量，通过配制和调整培养基的方法，确保培养基成分充分溶解均匀，ph值稳定，添加抗氧化剂或防腐剂，维持培养基的稳定性，提供适宜的环境供给菌体生长；
24、灭菌和无菌操作确保培养环境的无菌状态，使用高压蒸汽灭菌设备，配合无菌操作台、无菌手套等无菌器皿，避免细菌和真菌的污染，保证培养过程的纯净性，在种子菌的准备中，通过挑选纯净的种子菌液作为起始菌株，经过预培养和鉴定纯化等步骤，确保选用的菌株是目标乳酸菌，提高培养效果和产量；
25、通过调节培养的温度和氧气供应，提供适宜的生长环境，对于厌氧乳酸菌选择厌氧培养条件，保证菌体的生长和代谢产物的产量，根据具体菌种和需求确定最佳培养时间，通过适时的取样和监测，确保在最佳的收获时机分离和收获菌体，提高后续处理和利用的效果，通过适当的处理方法如冷冻保存、干燥保存等，保证菌体的无菌状态，并使用适宜的保存条件和容器，确保菌体品质和活性的保持，方便后续利用。
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1.一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述培养方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述确定培养基成分和配方为考虑菌株的特性、培养的目的和所需产物的特性，所述培养基成分为碳源、氮源、无机盐、水分，所述碳源为葡萄糖、乳糖、麦芽糖中的一种或多种，所述氮源为酵母膏、酵母提取物、肉膏中的一种或多种，所述无机盐为磷酸盐、硫酸盐、氯化物中的一种或多种，添加辅助成分包括维生素、激素，以促进菌体的生长和代谢产物的产量。
3.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述培养基的配制和调整为按照培养基配方，在蒸馏水中逐个加入各种成分，确保溶解均匀，通过添加pH缓冲剂来调节和稳定培养基的pH值，添加抗氧化剂或防腐剂，以保持培养基的稳定性。
4.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述灭菌和无菌操作为将配制好的培养基装入培养容器，所述培养容器为培养瓶、试管、培养皿中的一种或多种，并进行高压灭菌处理，以121℃高压蒸汽灭菌20-30分钟，在操作过程中，需要确保无菌操作，使用无
5.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述种子菌的准备为挑选纯净的种子菌液作为培养的起始菌株，提前将种子菌液预培养一夜，以增强其活性，在活化种子菌液后，进行菌种的鉴定和纯化，以确保选用的菌株是目标乳酸菌。
6.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述接种操作为在培养基中加入适量的活化种子菌液，摇匀均匀涂布在培养容器中，确保接种的菌液均匀分布，避免菌落的局部过浓或过稀，控制接种量，过少的接种量会导致菌体生长缓慢，过多的接种量能会导致菌落过于密集，影响氧气和营养物的供应，进而影响菌体的生长和产量。
7.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述控制培养条件为调节培养的温度和氧气，所述乳酸菌在适宜的温度下生长，适宜温度为35-40°C，所述氧气供应根据乳酸菌喜好厌氧环境的特点，通过静置培养、充入惰性气体等方法控制氧气供应。
8.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述培养时间和方式为确定培养时间及培养方式，所述培养时间是根据具体乳酸菌不同菌种和需求来确定，乳酸菌的培养时间为15-48小时，对于一些慢生长或特殊需求的乳酸菌，培养时间需要更长的持续时间，所述培养过程中进行适时的取样和监测，通过观察菌体生长曲线、pH值的变化和代谢产物的积累情况，判断最佳的收获时机。
9.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述分离和收获菌体为在高密度培养结束后，通过离心机或滤膜将菌体与培养基分离，将沉淀的菌体用无菌物质冲洗，去除残留的培养基，并采用适当的浓缩方法将菌体得到一定浓度，使用微孔滤膜或离心机以去除残余的培养基和其他杂质。
10.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述菌体处理和保存为将收获的菌体用于进一步的处理和利用，所述处理方法为冷冻保存、干燥保存、冷冻干燥中的一种或多种，在保存过程中，保证菌体的无菌状态，并使用适宜的保存条件和容器。
...【技术特征摘要】
1.一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述培养方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述确定培养基成分和配方为考虑菌株的特性、培养的目的和所需产物的特性，所述培养基成分为碳源、氮源、无机盐、水分，所述碳源为葡萄糖、乳糖、麦芽糖中的一种或多种，所述氮源为酵母膏、酵母提取物、肉膏中的一种或多种，所述无机盐为磷酸盐、硫酸盐、氯化物中的一种或多种，添加辅助成分包括维生素、激素，以促进菌体的生长和代谢产物的产量。
3.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述培养基的配制和调整为按照培养基配方，在蒸馏水中逐个加入各种成分，确保溶解均匀，通过添加ph缓冲剂来调节和稳定培养基的ph值，添加抗氧化剂或防腐剂，以保持培养基的稳定性。
4.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述灭菌和无菌操作为将配制好的培养基装入培养容器，所述培养容器为培养瓶、试管、培养皿中的一种或多种，并进行高压灭菌处理，以121℃高压蒸汽灭菌20-30分钟，在操作过程中，需要确保无菌操作，使用无菌操作台、无菌手套和其他无菌器皿，以避免细菌和真菌的污染。
5.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述种子菌的准备为挑选纯净的种子菌液作为培养的起始菌株，提前将种子菌液预培养一夜，以增强其活性，在活化种子菌液后，进行菌种的鉴定和纯化，以确保选用的菌株是目标乳酸菌。
6.根据权利要求1所述的一种乳酸菌的高密度培养方法，其特征在于：所述接种操作为在培养基中加入适量的...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁之铨，刘侠，王顺岭，高明景，
申请(专利权)人：天地成微生物技术北京有限公司，
类型：发明
国别省市：
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