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【技术实现步骤摘要】
本专利技术所述为电泳领域,具体地,涉及变性剂领域。
技术介绍
1、聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,简称page),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,带电颗粒在电场作用下,通过电荷和分子筛效应从而达到纯化目的。核酸上样前需加入变性剂,常见核酸变性剂为尿素、甲酰胺等。目前使用的变性剂为饱和尿素溶液。核酸氨水单管烘箱氨解后需进行排氨处理,一般操作为放置烘箱长时间进行烘干,甚至长达十个小时,防止残留nh4+影响电泳过程的质荷比造成上方拖带。排氨时间过长,导致核酸电泳纯化周期长,实验时间成本高。目前,尚未有解决办法可以缩短排氨时间,因此,急需一种新型的变性剂,缩短电泳纯化周期。
技术实现思路
1、本申请一方面提供了一种在电泳前对核酸样品进行处理的变性剂,所述变性剂为dmso溶液与尿素的混合试剂,其中,尿素浓度为50-500g/l。
2、优选地,所述变性剂中尿素浓度为200-400g/l。
3、更优选地,所述变性剂中尿素浓度为300-350g/l。
4、所述核酸包括dna、rna;优选地,所述核酸为dna。
5、优选地,所述核酸长度不超过500个核苷酸。
6、更优选地,所述核酸长度不超过100个核苷酸。
7、本申请另一方面提供了一种变性剂的制备方法,所述制备方法包括在dmso溶液中加入尿素干粉,其中,所述dmso溶液与尿素干粉的添加比例为1l:50-
8、优选地,所述dmso溶液与尿素干粉的添加比例为1l:200-400g。
9、更优选地,所述dmso溶液与尿素干粉的添加比例为1l:300-350g。
10、在一些实施方式中,所述制备方法在室温下进行。
11、本申请又一方面提供了一种核酸变性方法,具体包括:
12、步骤1.对核酸样品进行氨解处理;
13、步骤2.对步骤1所得产物进行烘干处理;
14、步骤3.使用本申请所述电泳变性剂在合适条件下对步骤2所得核酸产物进行变性处理;
15、其中,所述步骤2中烘干处理条件为60℃~80℃,60min~120min。
16、优选地,所述步骤2中烘干处理条件为60℃~80℃,60min~90min。
17、所述步骤3中,变性处理的条件为60℃~95℃变性5min~20min。
18、优选地,所述述步骤3中变性处理条件包括60℃~80℃变性10min~20min。
19、本专利技术再一方面提供了所述变性剂或所述的变性方法在纯化核酸中的用途。
20、有益效果:
21、本专利技术所述的变性剂可用于核酸变性、核酸纯化过程,减少烘干时间6-8个小时,具有耗时少、周期短、效率高的优势,且利用本专利技术所述的变性剂进行核酸变性后,核酸电泳的结果具有条带清晰、位置正确、纯度高、回收率高的有益效果。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种在电泳前对核酸样品进行处理的变性剂,所述变性剂为DMSO溶液与尿素的混合试剂,其中,尿素浓度为50-500g/L。
2.根据权利要求1所述的变性剂,其中,所述尿素浓度为200-400g/L。
3.根据权利要求2所述的变性剂,其中,所述尿素浓度为300-350g/L。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的变性剂,所述核酸包括DNA、RNA;优选地,所述核酸为DNA。
5.根据权利要求4所述的变性剂,所述核酸长度不超过500个核苷酸;优选地,所述核酸长度不超过100个核苷酸。
6.一种变性剂的制备方法,所述制备方法包括在DMSO溶液中加入尿素干粉,其中,所述DMSO溶液与尿素干粉的添加比例为1L:50-500g。
7.根据权利要求6所述的制备方法,所述DMSO溶液与尿素干粉的添加比例为1L:200-400g。
8.根据权利要求7所述的制备方法,所述DMSO溶液与尿素干粉的添加比例为1L:300-350g。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的制备方法,其中,所述制备方法在室温下进行
10.一种核酸变性方法,具体包括:
11.根据权利要求10所述的方法,其中,所述步骤2中烘干处理条件为60℃~80℃,60min~120min。
12.根据权利要求11所述的方法,所述步骤2中烘干处理条件为60℃~80℃,60min~90min。
13.根据权利要求10-12中任一项所述的方法,所述步骤3中,变性处理的条件为60℃~95℃变性5min~20min。
14.根据权利要求13所述的方法,所述步骤3中变性处理条件包括60℃~80℃变性10min~20min。
15.如权利要求1-5中任一项所述的变性剂或权利要求10-14中任一项所述的变性方法在纯化核酸中的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种在电泳前对核酸样品进行处理的变性剂,所述变性剂为dmso溶液与尿素的混合试剂,其中,尿素浓度为50-500g/l。
2.根据权利要求1所述的变性剂,其中,所述尿素浓度为200-400g/l。
3.根据权利要求2所述的变性剂,其中,所述尿素浓度为300-350g/l。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的变性剂,所述核酸包括dna、rna;优选地,所述核酸为dna。
5.根据权利要求4所述的变性剂,所述核酸长度不超过500个核苷酸;优选地,所述核酸长度不超过100个核苷酸。
6.一种变性剂的制备方法,所述制备方法包括在dmso溶液中加入尿素干粉,其中,所述dmso溶液与尿素干粉的添加比例为1l:50-500g。
7.根据权利要求6所述的制备方法,所述dmso溶液与尿素干粉的添加比例为1l:200-400g。
8.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴志强,刘仁杰,戴兵,
申请(专利权)人:江苏金斯瑞生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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