【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、作为由细菌产生以杀伤相关细菌物种的抗细菌蛋白，细菌素是细菌竞争环境资源的重要手段。细菌素包括数个不同的结构域，负责易位到其靶细菌中、与其受体结合以及发挥其杀细菌活性。受体结合结构域和易位结构域首先发挥作用，使得细菌素通过利用易位机制和靶细菌的细胞表面受体获得进入到易感细菌细胞中。在被运输穿过细胞膜后，然后细菌素的杀伤结构域发挥作用以导致靶细菌细胞的死亡。在另一方面，由于某些免疫蛋白的存在可以中和细菌素，产生细菌素的细菌自身受到保护免受这样的细菌素的杀伤作用。因此，靶细胞的易感性以这样的事实为依据：存在细胞表面受体和易位蛋白而不存在同源免疫蛋白。这些因素共同确定了天然存在的细菌素的有效性的窄范围。
2、克雷伯菌素(klebicin)是由克雷伯菌属(klebsiella spp.)产生的细菌素，并且特异性地杀伤克雷伯菌属的另一些易感成员，例如肺炎克雷伯菌，即是已知会引起严重感染性疾病的药物抗性病原细菌物种并因此是这些疾病治疗中的治疗靶标。由于克雷伯菌素的治疗用途趋向于在克雷伯菌属内经受窄的靶标范围的缺点，因此迫切需要开发具有较宽靶细胞范围的新的和改进的克雷伯菌素，以便有效治疗克雷伯菌感染。本专利技术通过公开新的嵌合细菌素来解决这个和其他相关的需求，所述新的嵌合细菌素由以下来表征：包含来自多种原始克雷伯菌素的多种结构域，保留了两种单独克雷伯菌素的活性，并且能够利用多种受体进入。这些新的嵌合克雷伯菌素还具有降低的抗性频率(frequency ofresistance，for)，并且水平等于或优于单独的克雷伯菌
技术实现思路
0、专利技术概述
1、考虑到开发具有改善的特性(例如广泛的靶细菌细胞范围和增强的抗细菌活性)的新的细菌素的目标，本专利技术人采用从不同天然存在的克雷伯菌素中得到的易位结构域、受体结合结构域和杀细菌结构域(或“杀伤结构域”)的不同组合改造了一组嵌合克雷伯菌素，以研究其针对克雷伯菌属的细菌，特别是肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae)的杀细菌效力。因此，在第一方面中，本专利技术提供了能够抑制克雷伯菌属细菌(例如，肺炎克雷伯菌)生长的新的嵌合克雷伯菌素多肽。嵌合多肽包含一个或更多个易位结构域、一个或更多个受体结合结构域和杀伤结构域，这些结构域中的每一个均从天然存在的克雷伯菌素中得到，并且所述杀伤结构域和至少一个受体结合结构域从两种不同的天然存在的克雷伯菌素中得到。在一些实施方案中，多肽从其n端到c端包含易位结构域、受体结合结构域和杀伤结构域。在一些实施方案中，在嵌合克雷伯菌素多肽中可以有两个受体结合结构域和两个易位结构域，并且所述两个受体结合结构域和易位结构域来自两种不同的天然存在的克雷伯菌素。在一些实施方案中，嵌合多肽还可包含位于受体结合结构域(例如，最靠近多肽c端的受体结合结构域)与杀伤结合结构域之间的肽接头，所述肽接头可以是柔性接头或刚性接头。在一些实施方案中，杀伤结构域包含全长天然存在的克雷伯菌素。在一些实施方案中，受体结合结构域之一和易位结构域来源于p628或p764。在一些实施方案中，杀伤结构域包含全长p764或p801。在一些实施方案中，两个不同的受体结合结构域从p764和p774中得到。在一些实施方案中，多肽由以下组成或基本上由以下组成：在本公开内容的表3中的特定组合中命名的组分(参见第3列“结构域细节”)。例如，嵌合克雷伯菌素可包含以下或由以下组成：表3中所示的氨基酸序列(例如seq id no：7、33、45、47、51、57、59、61、65、67、69、71、73或75)之一。还提供了包含本专利技术嵌合多肽以及生理学上可接受的赋形剂的组合物。在一些情况下，组合物被配制成用于全身或局部施用，例如以适合用于注射或用于吸入或用于局部递送的形式。
2、本专利技术还提供了编码上述和本文中所述嵌合多肽的多核苷酸序列，其相应的表达盒、载体和宿主细胞。在一些实施方案中，本专利技术提供了包含编码所述多肽的多核苷酸序列的核酸，其包含以下或者由以下组成：seq id no：8、34、46、48、52、58、60、62、66、68、70、72、74或76。在一些实施方案中，本专利技术提供了包含这样的多核苷酸序列的表达盒、或者包含所述表达盒的载体、或者包含上述或本文中所述表达盒或载体的宿主细胞。
3、在一些实施方案中，提供了用于重组产生上述和本文中所述嵌合克雷伯菌素多肽的方法。该方法包括在允许表达由表达盒或载体编码的嵌合多肽的条件下培养包含编码这样的多肽的表达盒(例如载体的一部分)的宿主细胞。
4、在第二方面中，本专利技术提供了用于抑制肺炎克雷伯菌生长的方法，其通过将有效量的含有本专利技术的嵌合克雷伯菌素的组合物施加于其中存在肺炎克雷伯菌的位置。在一些实施方案中，通过以下将所述组合物施加于患有肺炎克雷伯菌感染的患者：通过注射，例如液体形式，如用于静脉内或肌内或皮下注射的溶液剂或乳剂或混悬剂；或者通过成雾状或雾化的喷雾(spray)或雾(mist)等的吸入；或者通过局部递送例如表面施加，例如，多肽以糊剂、乳膏剂、洗剂、软膏剂、喷雾剂的形式，或者作为贴剂/绷带或伤口敷料的并入部分施加。
5、本专利技术的一个相关方面是本文中所述嵌合克雷伯菌素多肽用于抑制肺炎克雷伯菌生长或产生用于治疗肺炎克雷伯菌感染的药物的用途。在一些实施方案中，多肽存在于被配制成用于注射、或用于吸入、或用于局部施加的组合物中。在一些实施方案中，在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：7或由seq id no：7组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：33或由seq id no：33组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：45或由seq id no：45组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：47或由seq id no：47组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：51或由seq id no：51组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：57或由seq id no：57组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：59或由seq id no：59组成，或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：61或由seq id no：61组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seqid no：65或由seq id no：65组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq idno：67或由seq id no：67组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：69或由seq id no：69组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含seq id no：71或由seq id no：71组成；或者在所要求保护的方法中使用的多肽可包含se本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.多肽，其包含一个或更多个易位结构域、一个或更多个受体结合结构域以及杀伤结构域，其中所述结构域中的每一个均来源于天然存在的克雷伯菌素，并且其中所述杀伤结构域和至少一个所述受体结合结构域来源于两种不同的天然存在的克雷伯菌素。
2.权利要求1所述的多肽，其从N端至C端包含所述易位结构域、所述受体结合结构域和所述杀伤结构域。
3.权利要求1所述的多肽，其包含来源于两种不同的天然存在的克雷伯菌素的两个受体结合结构域。
4.权利要求2或3所述的多肽，其还包含所述受体结合结构域与所述杀伤结构域之间的肽接头。
5.权利要求1所述的多肽，其中所述杀伤结构域包含全长天然存在的克雷伯菌素。
6.权利要求1所述的多肽，其中所述易位结构域之一和所述受体结合结构域之一来源于P628或P764。
7.权利要求1所述的多肽，其中所述杀伤结构域包含全长P764或P801。
8.权利要求3所述的多肽，其中所述两个受体结合结构域来源于P764和P774。
9.权利要求1所述的多肽，其包含SEQ ID NO：7、33、4
10.权利要求1所述的多肽，其由SEQ ID NO：7、33、45或47的氨基酸序列组成。
11.核酸，其包含编码权利要求1至10中任一项所述多肽的多核苷酸序列。
12.表达盒，其包含编码权利要求1至10中任一项所述多肽的多核苷酸序列。
13.载体，其包含权利要求12所述的表达盒。
14.宿主细胞，其包含权利要求12所述的表达盒或权利要求13所述的载体。
15.重组产生权利要求1至10中任一项所述多肽的方法，其包括在允许表达由权利要求12所述的表达盒或权利要求13所述的载体编码的多肽的条件下培养权利要求14所述的宿主细胞。
16.组合物，其包含权利要求1至10中任一项所述的多肽以及生理学上可接受的赋形剂。
17.权利要求16所述的组合物，其被配制成用于通过注射或吸入来施用。
18.用于抑制肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)生长的方法，其包括将有效量的权利要求16所述的组合物施加于其中存在肺炎克雷伯菌的位置。
19.权利要求18所述的方法，其中通过注射将所述组合物施加于患有肺炎克雷伯菌感染的患者。
20.权利要求18所述的方法，其中通过吸入将所述组合物施加于患有肺炎克雷伯菌感染的患者。
21.权利要求1至10中任一项所述的多肽用于抑制肺炎克雷伯菌生长的用途。
22.权利要求1至10中任一项所述的多肽用于制备用于治疗肺炎克雷伯菌感染的药物的用途。
23.权利要求21或22所述的用途，其中所述多肽存在于被配制成用于注射的组合物中。
24.权利要求21或22所述的用途，其中所述多肽存在于被配制成用于吸入的组合物中。
25.用于抑制肺炎克雷伯菌生长的药盒，其包含含有组合物的第一容器，所述组合物包含有效量的权利要求1至10中任一项所述的多肽。
26.权利要求25所述的药盒，其中所述组合物被配制成用于注射。
27.权利要求25所述的药盒，其中所述组合物被配制成用于吸入。
28.权利要求25所述的药盒，其还包含说明手册。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.多肽，其包含一个或更多个易位结构域、一个或更多个受体结合结构域以及杀伤结构域，其中所述结构域中的每一个均来源于天然存在的克雷伯菌素，并且其中所述杀伤结构域和至少一个所述受体结合结构域来源于两种不同的天然存在的克雷伯菌素。
2.权利要求1所述的多肽，其从n端至c端包含所述易位结构域、所述受体结合结构域和所述杀伤结构域。
3.权利要求1所述的多肽，其包含来源于两种不同的天然存在的克雷伯菌素的两个受体结合结构域。
4.权利要求2或3所述的多肽，其还包含所述受体结合结构域与所述杀伤结构域之间的肽接头。
5.权利要求1所述的多肽，其中所述杀伤结构域包含全长天然存在的克雷伯菌素。
6.权利要求1所述的多肽，其中所述易位结构域之一和所述受体结合结构域之一来源于p628或p764。
7.权利要求1所述的多肽，其中所述杀伤结构域包含全长p764或p801。
8.权利要求3所述的多肽，其中所述两个受体结合结构域来源于p764和p774。
9.权利要求1所述的多肽，其包含seq id no：7、33、45、47、51、57、59、61、65、67、69、71、73或75的氨基酸序列。
10.权利要求1所述的多肽，其由seq id no：7、33、45或47的氨基酸序列组成。
11.核酸，其包含编码权利要求1至10中任一项所述多肽的多核苷酸序列。
12.表达盒，其包含编码权利要求1至10中任一项所述多肽的多核苷酸序列。
13.载体，其包含权利要求12所述的表达盒。
14.宿主细胞，其包含权利要求12所述的表达盒或权利要求13...
【专利技术属性】
技术研发人员：阿尼沙·阿姆巴迪，舍米拉·比达帕·阿普阿亚，维韦克·丹尼尔·保罗，R·桑吉夫·萨拉瓦南，吉尔萨那·安巴拉甘，
申请(专利权)人：拜克多科利尔私人控股有限公司，
类型：发明
国别省市：
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