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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程,尤其涉及一种重组海藻糖酶及其应用。
技术介绍
1、海藻糖(trehalose)是由2分子葡萄糖以α,α-1,1-糖苷键连接而成的二糖,没有还原性,性质稳定,难以降解。海藻糖在自然界中存在广泛,细菌、真菌、植物和无脊椎动物和昆虫体内都有海藻糖存在。海藻糖是生物体应激合成代谢产物,主要帮助生物体应对高温、冷冻、高渗透压等不利环境。在干旱环境中的生物体内有高浓度的海藻糖存在。这种情况下,海藻糖的功能是稳定大分子结构,特别是细胞中的蛋白质、细胞膜脂质和核酸,通过在这些分子周围形成玻璃状的结构,从而使它们可以免受脱水和氧化造成的损害。很多微生物在发酵后期,会在培养基中积累海藻糖,影响糖的转化效率。
2、海藻糖酶(trehalase)是一种糖苷水解酶,国际酶学编号为ec3.2.1.28,可以特异性的催化1分子海藻糖水解为2分子葡萄糖,如图1所示。在发酵乙醇生产过程中,在发酵体系中添加海藻糖酶可以使最后的乙醇产量增加2%以上,因为酵母在乙醇发酵过程中会产生海藻糖,而不能将海藻糖作为碳源利用。因此,添加海藻酸酶可以提高最后的乙醇产量。在谷氨酸发酵过程中同样会产生较多的海藻糖,这些海藻糖同样不能为谷氨酸棒状杆菌利用,通过在发酵液中添加海藻糖酶,可以使发酵结束后的糖酸转化率提高0.5%~1%,从而提高最后的谷氨酸产量和降低发酵结束时发酵液中的残糖含量。
3、但目前海藻糖酶发酵活力较低,高活性海藻糖酶具有非常重要的应用价值。
技术实现思路
1、为了解决上述
2、为了实现上述目的,本专利技术采用了以下技术方案:
3、本专利技术提供了一种海藻糖酶基因tre37,其核苷酸序列如seq id no.1所示,氨基酸序列如seq id no.2所示。
4、本专利技术还提供了一种重组海藻糖酶基因tre37-1,由所述海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如seq id no.3所示,氨基酸序列如seq id no.4所示。
5、本专利技术还提供了一种重组海藻糖酶基因tre37-2,也由所述海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如seq id no.5所示,氨基酸序列如seq id no.6所示。
6、本专利技术还提供了一种重组海藻糖酶基因tre37-3,同样由所述海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如seq id no.7所示,氨基酸序列如seq id no.8所示。
7、本专利技术还提供了一种载体,所述载体中含有所述海藻糖酶基因tre37或所述重组海藻糖酶基因tre37-1或所述重组海藻糖酶基因tre37-2或所述重组海藻糖酶基因tre37-3。
8、本专利技术还提供了一种细胞,所述细胞含有所述载体。
9、本专利技术还提供了一种所述载体或所述细胞在发酵生产中的应用。
10、优选的,所述应用具体为在乙醇发酵生产中的应用。
11、优选的,所述应用具体为在氨基酸发酵生产中的应用。
12、与现有技术相比,本专利技术具有如下技术效果:
13、本专利技术中的重组海藻糖酶催化ph范围为2.5~7.5,且重组菌株gs115/tre37、gs115/tre37-1、gs115/tre37-2和gs115/tre37-3摇瓶发酵后酶活分别达到48.2u/ml、92.7u/ml、146.4u/ml和125.1u/ml,具有催化ph范围广,发酵活力高等优点,具有很好的应用前景。
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1.一种海藻糖酶基因tre37,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种重组海藻糖酶基因tre37-1,其特征在于,由权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.一种重组海藻糖酶基因tre37-2,其特征在于,由权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
4.一种重组海藻糖酶基因tre37-3,其特征在于,由权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。
5.一种载体,其特征在于,含有权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37或权利要求2所述的重组海藻糖酶基因tre37-1或权利要求3所述的重组海藻糖酶基因tre37-2或权利要求4所述的重组海藻糖酶基因tre37-3。
6.一种细胞,其特征在于,含有权
7.权利要求5所述的载体或权利要求6所述的细胞在发酵生产中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用具体为在乙醇发酵生产中的应用。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用具体为在氨基酸发酵生产中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种海藻糖酶基因tre37,其特征在于,其核苷酸序列如seq id no.1所示,氨基酸序列如seq id no.2所示。
2.一种重组海藻糖酶基因tre37-1,其特征在于,由权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如seq id no.3所示,氨基酸序列如seq id no.4所示。
3.一种重组海藻糖酶基因tre37-2,其特征在于,由权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37优化获得,其核苷酸序列如seq id no.5所示,氨基酸序列如seq id no.6所示。
4.一种重组海藻糖酶基因tre37-3,其特征在于,由权利要求1所述的海藻糖酶基因tre37优化获得,其核...
【专利技术属性】
技术研发人员:曲元凯,李明潭,
申请(专利权)人:威海市世代海洋生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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