一种DNA链置换反应介导的时序性荧光编码的高维度成像标签及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种DNA链置换反应介导的时序性荧光编码的高维度成像标签，所述标签为修饰有不同荧光/淬灭团的寡核苷酸片段按照一定顺序排列而成的组合体，可随着链置换反应的进行切换不同的颜色。本发明专利技术对荧光基团进行时序编码，极大提高了成像蛋白的数量。相应设计出一种设计简单、合成方便、反应速度快、无需酶催化、无需额外洗涤的DNA探针用于概念验证。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物领域，尤其涉及一种dna链置换反应介导的时序性荧光编码的高维度成像标签及其应用。

技术介绍

1、自然界复杂万千的生命体中，每一个细胞都不是一座孤岛，它们存在于特定的组织器官中、行使着各自独特的功能，并且在其生命周期内与其周围环境相互作用、相互影响1。一个典型的组织微环境中包含很多执行特定功能的细胞，如起辅助和杀伤作用的t细胞、起免疫应答作用的b细胞、起杀伤作用的nk细胞、起抗原递呈作用的树突状细胞和起吞噬作用的巨噬细胞等，除了细胞以外，复杂的组织微环境中还存在细胞外基质，包裹有成纤维细胞，贯穿着许多血管和淋巴管等。因此，在空间层面全面探讨组织微环境中的细胞机制和生物学过程至关重要。

2、空间蛋白成像技术使用抗体、多肽、适配体等试剂靶向组织微环境，通过检测试剂上修饰的酶、荧光、金属或dna序列等信息进行成像和定量。其中，基于酶促色素沉积的免疫组织化学技术(简称免疫组化)是最经典的成像手段，该技术利用酶作为标记物，并采用底物被分解后的显色反应显示抗原抗体的结合与否，染色结果用普通光学显微镜的明场模式即可观察2,3。然而，肉眼可分辨本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种DNA链置换反应介导的时序性荧光编码的高维度成像标签，其特征在于，所述标签为修饰有不同荧光基团和淬灭团的DNA片段按照一定顺序排列组合而成的杂交体，可随着DNA链置换反应的进行切换不同的颜色。

2.如权利要求1所述的成像标签，其特征在于，所述荧光基团的个数为2-10个，优选3-6个。

3.如权利要求1所述的成像标签，其特征在于，所述杂交体包括一条轨道DNA链、n条荧光DNA链和n条DNA置换链，轨道链和n条荧光链互补配对，依次加入的n条置换DNA链用于启动DNA链置换；所述每个荧光DNA链的5’端分别修饰了不同颜色的荧光基团，3’端包含一个用于启动链置换的...

【技术特征摘要】

1.一种dna链置换反应介导的时序性荧光编码的高维度成像标签，其特征在于，所述标签为修饰有不同荧光基团和淬灭团的dna片段按照一定顺序排列组合而成的杂交体，可随着dna链置换反应的进行切换不同的颜色。

2.如权利要求1所述的成像标签，其特征在于，所述荧光基团的个数为2-10个，优选3-6个。

3.如权利要求1所述的成像标签，其特征在于，所述杂交体包括一条轨道dna链、n条荧光dna链和n条dna置换链，轨道链和n条荧光链互补配对，依次加入的n条置换dna链用于启动dna链置换；所述每个荧光dna链的5’端分别修饰了不同颜色的荧光基团，3’端包含一个用于启动链置换的游离序列及距离末端7-8nt的用于淬灭邻近荧光链的淬灭基团。

4.如权利要求1所述的成像标签，其特征在于，所述荧光dna链和置换dna链中的n分别为2-10，优选为3-6。

5.如权利要求1所述的成像标签，其特征在于，所述置换链上设有可将所置换的荧光链上的荧光基团淬灭的淬灭基团。

6.一种三色变化的dna链置换反应介导的时序性荧光编码的高维度成像标签，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁显廷，徐佳素，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：