System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用技术_技高网

一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用技术

技术编号:41129420 阅读:2 留言:0更新日期:2024-04-30 17:58
本发明专利技术涉及核酸检测领域,且公开了一种适用于快速检测的核酸释放剂,包括盐离子溶液、去污剂及RNA酶抑制剂,盐离子溶液包括10mM Tris‑HCl、100mM NaCl;盐离子溶液中的Tris‑HCl溶液PH为中性;去污剂成分为5%NP40和0.5%的曲拉通100,该适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,核酸快速裂解体系能够对拭子样本进行快速的核酸释放,并且释放的核酸能够满足下游的扩增需求,表现出较好的稳定性,核酸释放剂可以快速释放出样本材料中的核酸,且获得核酸可以直接用于扩增反应。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸检测领域,具体为一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用


技术介绍

1、由于核酸检测技术的高灵敏度、高特异性等特点,核酸检测已成为目前分子诊断使用最广泛的一种检测手段;但是由于其反应条件的限制,核酸检测要求样本核酸的纯度较高,所以需要进行繁琐耗时的核酸提取与纯化过程,降低了检测效率。现在使用的核酸释放方法包括;煮沸法、柱式法、磁珠法、化学裂解发等;其中热裂解法就是高温加热的形式对样本进行处理,使得样本中的待测核酸从样本中释放出来,其裂解产物可以直接用于核酸检测;煮沸法提取时需要多次换管离心等步聚,样本处理时间长。柱式法是利用裂解液破碎样本细胞,使样本中的核酸释放出来;然后将核酸特异地吸附在有较强的亲和力和吸附力硅载体上,通过漂洗液,使对其他生化成分如蛋白质、多糖、脂类等物质去除,最后洗脱、分离得到纯化的核酸;柱式法提取效果较好,但步聚繁多,需要低温高速离心机等设备,导致其在基层使用的局限性。磁珠法的原理是在磁珠表面修饰有对核酸有吸附作用的特定活性官能基团,通过不同的裂解液结合液洗涤液在特定的条件下能够与目的物质进行特异性结合,同时利用磁珠自身的磁性,在外磁场的作用下可以方便的实现定向移动与富集,从而达到核酸与杂质分离的目的,进而实现对目标物质的分离纯化,获得纯化核酸;磁珠法提取步聚简单,回收率高,易于自动化提取,但产品价格十分昂贵。基于目前的核酸提取的现状,为了满足核酸快速检测和需求,本专利技术以新型冠状病毒咽拭子样本为材料,使用本核酸释放剂只需要按照体积比进行样本核酸释放即可,核酸释放液可直接作为扩增模板,然后进行后续的靶标基因检测,为此我们提出了一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用。


技术实现思路

1、(一)解决的技术问题

2、针对现有技术的不足,本专利技术提供了一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,核酸快速裂解体系能够对拭子样本进行快速的核酸释放,并且释放的核酸能够满足下游的扩增需求,表现出较好的稳定性,核酸释放剂可以快速释放出样本材料中的核酸,且获得核酸可以直接用于扩增反应。

3、(二)技术方案

4、为实现上述所述目的,本专利技术提供如下技术方案:一种适用于快速检测的核酸释放剂,包括盐离子溶液、去污剂及rna酶抑制剂,盐离子溶液包括10mm tris-hcl、100mmnacl;

5、盐离子溶液中的tris-hcl溶液ph为中性;

6、去污剂成分为5% np40和0.5%的曲拉通100。

7、优选的,所述rna酶抑制剂含量为1000u/ml。

8、优选的,所述盐离子溶液中的tris-hcl溶液的ph为7.5。

9、一种适用于快速检测的核酸释放剂的制备方法,包括以下步骤:

10、第一步:准备物料10mm tris-hcl、100mm nacl、5% np40、0.5%的曲拉通100以及1000u/ml的rna酶抑制剂;

11、第二步:将100mm nacl、5% np40以及0.5%的曲拉通100进行混合搅拌,得到母液;

12、第三步:母液使用0.22微米的滤膜过滤,备用;

13、第四步:向过滤后的母液中加入10mm tris-hcl以及1000u/ml的rna酶抑制剂,混合,得到核酸释放剂。

14、一种适用于快速检测的核酸释放剂的应用,包括以下步骤:

15、步骤1:取样本于1.5ml ep管中;

16、步骤2:加入样本2倍体积的核酸释放剂;

17、步骤3:将混合溶液上下颠倒混匀,室温放置3-5min,混合液即为扩增模板;

18、步骤4:进行下游核酸扩增检测。

19、(三)有益效果

20、与现有技术相比,本专利技术提供了一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,具备以下有益效果:

21、1、该适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,核酸快速裂解体系能够对拭子样本进行快速的核酸释放,并且释放的核酸能够满足下游的扩增需求,表现出较好的稳定性,核酸释放剂可以快速释放出样本材料中的核酸,且获得核酸可以直接用于扩增反应。

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【技术保护点】

1.一种适用于快速检测的核酸释放剂,其特征在于,包括盐离子溶液、去污剂及RNA酶抑制剂,盐离子溶液包括10mM Tris-HCl、100mM NaCl;

2.根据权利要求1所述的一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,其特征在于:所述RNA酶抑制剂含量为1000U/mL。

3.根据权利要求1所述的一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,其特征在于:所述盐离子溶液中的Tris-HCl溶液的pH为7.5。

4.一种适用于快速检测的核酸释放剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

5.一种适用于快速检测的核酸释放剂的应用,其特征在于,包括以下步骤:

【技术特征摘要】

1.一种适用于快速检测的核酸释放剂,其特征在于,包括盐离子溶液、去污剂及rna酶抑制剂,盐离子溶液包括10mm tris-hcl、100mm nacl;

2.根据权利要求1所述的一种适用于快速检测的核酸释放剂及其制备方法和应用,其特征在于:所述rna酶抑制剂含量为1000u/ml。

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【专利技术属性】
技术研发人员:颜菁张毅周雁云李凤娟
申请(专利权)人:上海邦先医疗科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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