猪传染性胸膜肺炎ＰＣＲ诊断试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种猪传染性胸膜肺炎ＰＣＲ诊断试剂盒，它包括４００μＬ浓度为２０ｍｇ／ｍＬ的蛋白酶Ｋ，１０００μＬ裂解液，１５００μＬ？ＴＥ缓冲液，２５０μＬＰＣＲ酶，１７０μＬ超纯水，５０μＬ的ＭａｒｋｅｒＤＬ２０００，４０μＬ等体积混合的引物Ｐ１、Ｐ２，引物Ｐ１、Ｐ２的浓度均为２０μＭ，２０μＬ阴性对照以及２０μＬ阳性对照。本发明专利技术通过对ＰＣＲ反应条件进行优化，研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ＰＣＲ试剂盒，通过ＰＣＲ检测结果与阴性对照及阳性对照比较，可以得到检测结论，从而起到快速检测样品是否含有猪传染性胸膜肺炎的目的。本发明专利技术检测结果准确，并且快捷、灵敏，检测方式简单，使用效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种试剂盒，尤其是一种猪传染性胸膜肺炎PCR诊断试剂盒。
技术介绍
猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumoniae， PCP)是胸膜肺炎 放线杆菌(Actinobacillus Pleuropneumoniae, APP)引起的猪呼吸道疾病，以出血性、坏 死性肺炎和慢性纤维素性胸膜肺炎为特征，该病可引起猪死亡或生长缓慢，给世界各地的 养猪业造成巨大的经济损失(Sebunya T N K等，1983， Macinnes J L等，1988， Gram T等， 2000)。 80年代在我国开始流行，近年来形成广泛的流行并且成上升趋势。根据是否依赖 NAD可分为生物I型和生物II型两个生物型。生物I型中的1、5、9、10等血清型致病力最 强。据统计，我国流行的血清型为1、2、3、5、7、10等型，以1、3、7型为主，主要血清型缺乏交 叉免疫性。现在缺少一种能对临床样品的猪传染性胸膜肺炎进行简便、快捷、灵敏、准确的 检测的试剂盒。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种猪传染性胸膜肺炎PCR诊断试剂盒，它可以在快速检 测到猪传染性胸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪传染性胸膜肺炎ＰＣＲ诊断试剂盒，其特征在于：它包括４００μＬ浓度为２０ｍｇ／ｍＬ的蛋白酶Ｋ，１０００μＬ裂解液，１５００μＬ的ＴＥ缓冲液，２５０μＬ的ＰＣＲ酶，１７０μＬ超纯水，５０μＬ的Ｍａｒｋｅｒ　ＤＬ２０００，４０μＬ等体积混合的引物Ｐ１、Ｐ２，引物Ｐ１、Ｐ２的浓度均为２０μＭ，２０μＬ阴性对照以及２０μＬ阳性对照。

【技术特征摘要】
一种猪传染性胸膜肺炎PCR诊断试剂盒，其特征在于它包括400μL浓度为20mg/mL的蛋白酶K，1000μL裂解液，1500μL的TE缓冲液，250μL的PCR酶，170μL超纯水，50μL的Marker DL2000，40μL等体积混合的引物P1、P2，引物P1、P2的浓度均为20μM，20μL阴性对照以及20μL阳性对照。2. 根据权利要求1所述的猪传染性胸膜肺炎PCR诊断试剂盒，其特征在于裂解液为由Tris-HcL50mM、EDTA2mM、NaC1100mM以及占裂解液总体积5%的SDS组成的混合溶液。3. 根据权利要求1所述的奶牛乙型肝炎PCR快速诊断试剂盒，其特征在于TE缓冲液包括Tris-HcL100mM及EDTAlmM组成的混合溶液，混合溶液的值为8. 0。...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡一鸣，徐景峨，谭诗文，余波，王璇，任荣清，
申请(专利权)人：贵州省畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：52[中国|贵州]