【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物化工，具体涉及一种β-环糊精葡萄糖基转移酶在β-环糊精制备中的应用。
技术介绍
1、β－环糊精是由芽孢杆菌属的某些种产生的β－环状糊精葡萄糖基转移酶(β-cgt酶)，作用于淀粉生成的7个葡萄糖单位的低聚糖。该低聚糖在β-cgt酶的作用下，α－1.4糖苷键连接成环，形成一个中间有空穴的锥状圆筒形结构。该空穴内部具有疏水性，外部为亲水性，空穴可包络有机分子，稀有气体和无机化合物等形成包合物，在医药、环保、化工、材料、食品、分析化学等领域应用广泛。
2、β-cgt酶，是糖基水解酶α-淀粉酶家族中的重要一员。该酶可以催化四种反应，歧化、环化、偶合和水解反应。歧化反应是cgt酶的主体反应，在淀粉体系中，歧化反应发生在催化反应的初始阶段，表现为淀粉糊化液粘度的快速下降；环化反应为分子内转糖基反应，是cgt酶的特征反应；偶合反应是环化的逆反应，当体系中存在高浓度麦芽低聚糖或葡萄糖的情况下会容易发生。水解反应则是将直连淀粉切断分别转移到水分子上。目前工业化生产β－环糊精的工艺存在的问题主要有以下几点：
3、(1)目前市场上的β-cgt酶或者环糊精生产厂家自己生产的β-cgt酶在70-80℃以上酶会失活，因而在前期液化阶段，液化时间至少需要3h，长时间低温液化容易导致淀粉老化，降低转化率。
4、(2)液化后的酶，酶活完全丧失，在后续的转化过程中几乎不起作用，会明显增加生产成本。
5、(3)液化、环化以及降低粘度过程需要不断调节ph,且环化周期较长。
6、(4)环化后蒸发
技术实现思路
1、本专利技术为解决现有技术问题，提供了一种β-环糊精的制备方法。
2、所述β－环糊精的制备方法包括如下步骤：
3、(1)向质量浓度为20-35％的淀粉浆中加入β－环状糊精葡萄糖基转移酶，混匀，升温至80-95℃并维持10-30min，控制de值在2-8；
4、(2)将步骤(1)得到的浆液降温至62-65℃，并向其中加入普鲁兰酶和β－环状糊精葡萄糖基转移酶，加入环己烷，60℃反应3-5小时后，过滤去除清液，留取沉淀；
5、(3)将步骤(2)得到的沉淀加水调浆至质量百分比为40％-70％，并加碱调至ph8，升温至95-100℃，蒸馏回收去除环己烷；
6、(4)将步骤(3)得到的浆液中加入活性炭，趁热抽滤后进行冷却结晶，过滤分离固形物，烘干后即得精制β-环糊精。
7、进一步优选地，步骤(1)中所述淀粉为玉米淀粉、木薯淀粉或马铃薯淀粉；所述β－环状糊精葡萄糖基转移酶的添加量为0.45-2u/g纯淀粉。
8、步骤(2)中β－环状糊精葡萄糖基转移酶的添加量为1.5-3.5u/g纯淀粉，普鲁兰酶的添加量为1-4u/g纯淀粉；环己烷的添加量为淀粉重量的5-20％。
9、步骤(4)中所用的过滤方式为管式离心、转鼓式离心、抽滤、板框过滤中的任意一种。
10、本专利技术提供的β-环糊精制备方法通过添加β－环状糊精葡萄糖基转移酶加速淀粉液化过程，减少液化酶活损失，提高β-环糊精回收率，过程不需要反复调节ph，环化时间缩短为原来的25％，在不经二次液化降低粘度的条件下，结晶可正常过滤，同时仅需一次脱色、2次结晶，即可达到药典要求的纯度，提高生产效率，取得了意料不到的技术效果。所述方法有利于提高β-环糊精的产量，降低其生产成本，应用前景广阔。
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1.一种β－环糊精的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述淀粉为玉米淀粉、木薯淀粉或马铃薯淀粉中的任意一种或多种。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述β－环状糊精葡萄糖基转移酶的添加量为0.45-2U/g纯淀粉。
4.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中β－环状糊精葡萄糖基转移酶的添加量为1.5-3.5U/g纯淀粉。
5.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中普鲁兰酶的添加量为1-4U/g纯淀粉。
6.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中环己烷的添加量为淀粉重量的5-20％。
7.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中所用的过滤方式为管式离心、转鼓式离心、抽滤、板框过滤中的任意一种。
【技术特征摘要】
1.一种β－环糊精的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述淀粉为玉米淀粉、木薯淀粉或马铃薯淀粉中的任意一种或多种。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述β－环状糊精葡萄糖基转移酶的添加量为0.45-2u/g纯淀粉。
4.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中β－环状糊...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓慧，唐波，单凯，孙海燕，王心荷，
申请(专利权)人：无锡蔚蓝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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